第六講人類疾病的動物模型第一節動物模型的概念（animalmodelofhumandisease)一、人類疾病動物模型：是生物醫學科學研究中建立的具有人類疾病模擬性表現的動物實驗對象和材料。精品PPT二、動物模型的意義1、避免人體實驗造成的危害2、可復制臨床上平時不易見到的疾病3、可復制發病率低、潛伏期和病程長的疾病4、嚴格控制試驗條件，增加實驗的可比性5、樣品易得，實驗操作簡化6、有助于全面認識疾病本質精品PPT第二節動物模型分類一動物模型分類一）按產生原因分類1、自發性動物模型（SpontaneousAnimalModel）如肥胖小鼠、高血壓大鼠、突變裸鼠等2、誘發性或實驗性動物模型（ExperimentalAnimalModel）通過化學、放射線等3、陰性動物模型不能復制某些疾病的動物品種或品系，即一定的刺激或處理對一些實驗動物產生效應但對另外的實驗動物無反應4、孤立動物模型某種疾病最初在一些動物身上發現并被研究，但在人體內無法證實，如哺乳動物上皮乳頭瘤，瘋牛病二）按系統范圍分類如心血管、消化等系統疾病模型精品PPT嚴重聯合免疫缺陷小鼠（severe-combinedimmuodeficientmiceSCID）

外觀正常與正常小鼠無異，生長發育正常胸腺、脾、淋巴結重量不及正常的30%,組織學上表現為T、B淋巴細胞缺失T、B細胞功能陰性，對外來抗原無細胞免疫和抗體反應，但其巨噬細胞、紅細胞、自然殺傷細胞等功能正常。精品PPT第三節動物模型的選擇和設計一）原則1相似性結扎兔的闌尾血管，可以使闌尾壞死、穿孔并導致腹膜炎，但這與人類急性梗阻性闌尾炎合并穿孔和腹膜炎不一樣。結扎兔闌尾基部而保留原來的血液供應。2重復性品種、品系、年齡、性別、體重、健康3可靠性鉛中毒使沙鼠出現相應的腎病變4適用性、可控性5易行性和經濟性精品PPT二）注意事項

1、要盡可能再現所要求的人類疾病2、注意實用價值（易于管理飼養3、注意環境的影響（出血、麻醉、噪聲）4、不盲目用近交系5、靈長類不一定接近人6、正確評估模型價值7、中醫中動物不能脈診。精品PPT第四節、動物模型的建立一、誘發性腫瘤模型一）概念二）誘發腫瘤動物實驗方法經口給藥法涂抹法注射法氣管灌注法穿線法埋藏法精品PPT三）誘發腫瘤的要求1方法簡單易行重復性高2腫瘤誘發率高3所誘發的腫瘤與人類腫瘤有相似性4選擇對致癌劑敏感的種系5致癌劑量要適當6輔以誘癌動物的飼養條件精品PPT四）誘發腫瘤的要求和注意事項1設置陰性和陽性對照2有的實驗要輔以促癌劑才能成功3動物實驗結果注意種屬的區別4注意對人和環境的保護5注意將腫瘤發生的內外因結合起來精品PPT1、肺水腫模型P1840.1%腎上腺素按照5ml/g靜脈注射0.8%一氧化氮給大鼠吸入精品PPT2、誘發性肝癌（LiverCarcinoma）1）二乙基亞硝胺誘發肝癌0.25%DEN灌胃，10mg/kg,每周一次，其余5天0.025%DEN飲水，4個月可成功精品PPT3、誘發性鼻咽癌1二甲基膽蒽插管法半年后動物死亡2二乙基亞硝胺滴鼻法半年后死亡4、誘發性皮膚癌方法：甲基膽蒽蓖麻油涂抹皮膚，每周3次，150~200天后出現乳頭狀瘤精品PPT（三）移植性腫瘤動物模型1）實體瘤的移植人肝癌胰腺癌原位移植

方法：18～20g的裸鼠，新鮮癌組織切成2mm3小塊，暴露肝臟或胰腺，植入，縫合，長到2cm3時（3～5周后）取出。人肺癌（LungCarcinoma）裸鼠原位移植：暴露氣管，用8號針頭于氣管環之間刺小孔，用6號針頭向右支氣管注射4×105PG（肺巨細胞癌），4～5周后死亡。精品PPT2）腹水瘤移植2.5～3.0×107／mL，每只鼠接種0.2mL。作腹腔注射（接種成腹水瘤）或皮下注射（接種成實體瘤）精品PPT

消化系統動物模型一）幽門螺桿菌感染動物模型經口感染無特異病原CD1小鼠4～8周內，為胃腺體消失，上皮細胞脫落，潰瘍形成及粘膜固有層炎性細胞浸潤。精品PPT二）胃潰瘍動物模型1、造模機制1)常用方法：應激法：以各種傷害性刺激引起潰瘍2）藥物法投予組胺、胃泌素等3）燒灼法用電極燒灼胃壁精品PPT三）呼吸系統疾病動物模型（一）慢性支氣管炎動物模型（animalmodelofchronicbronchitis)二氧化硫法：小鼠1%so2每天20s，20d煙霧法：大鼠，鋸目、煙葉、干辣椒、硫磺混合點燃，每天1h，44d精品PPT二）肺炎1、大腸桿菌肺炎家兔：菌液3.0×107／mL，通過支氣管注射，回抽見氣泡后注射入氣管。2、白念珠菌肺炎Wistar大鼠：氣管內注射菌液，對照組同時用生理鹽水氣管內注入。3、支原體肺炎金黃地鼠：鼻腔滴入精品PPT

四、心血管系統疾病動物模型一、高血壓模型一）常用動物犬、大鼠二）自發性高血壓大鼠用WISTAR大鼠繁殖近親交配得到三）實驗性高血壓模型精品PPT1實驗性腎動脈狹窄性高血壓二腎一夾(two—kidney—one—clip)腎性高血壓：用套環縮小腎動脈，同時給予青霉素鈉注射液1O萬U／只，四周可成。2腎外包扎性高血壓乳膠膜繞腎門交叉包扎，并切除右腎3神經源性及應急性高血壓：噪音加電刺激大鼠：每天二次，20d，足底電擊精品PPT二高血脂和動物粥樣硬化模型一）高脂飼料誘發高血脂及粥樣硬化模型方法：小型豬：1%~2%高脂食物飼喂6個月,小鼠：雄性小鼠飼以1%膽固醇及10%豬油的高脂食物精品PPT二）非喂養法誘發高血脂及動脈粥樣硬化癥模型1、免疫誘發模型大鼠主動脈勻漿給兔注射，可引起血膽固醇升高2、兒茶酚胺誘發模型給兔靜注去甲腎上腺素1mg/24h3、半光氨酸誘發模型給兔皮下注射半胱氨酸硫代內酯每天20~25mg/kg精品PPT二、肝膽疾病動物模型一）四氯化碳誘發急性中毒性肝炎1、造模機制進入肝細胞后，溶解線粒體膜的脂質，造成酶的破壞，使肝細胞壞死。精品PPT2、造模方法1）小鼠40%CCL4橄欖油口服0.4ml2)大鼠CCL40.05ml/100g皮下注射3）兔CL41.2ml/kg一次性口服二)肝纖維化動物模型1、造模機制引起肝組織長期損傷，導致肝纖維化2、造模方法精品PPT1）免疫法雄性Wistar大鼠，取豬血清腹腔注射，每周2次共8次2）四氯化碳法Wistar大鼠，皮下注射40%~50%油溶液，每周2次，從第2周起，隔日經20%~30%酒精1ml灌胃3、模型特點1）免疫法肝纖維化86%左右，對動物生長發育無影響，是較理想的模型精品PPT2）四氯化碳模型大鼠成活率60%~80%三）膽石癥動物模型1病因:與生活習慣有關膽囊的慢性炎癥盲目節食減肥膽固醇的代謝失調。感染腸道寄生蟲者2、造模機制感染、膽汁淤滯、膽固醇代謝障礙、自主神經調節障礙精品PPT4、造模方法1）感染法膽囊注入蛔蟲卵2）食餌法雌性豚鼠，飼喂高膽固醇食物如：酪蛋白1%，蔗糖1.5%,豬油1%，纖維素1%，膽酸0.02%,膽固醇0.05%3）狹窄成石法包括膽囊、膽總管結扎法4）切除迷走神經法5）異物植入法精品PPT五胰腺炎動物模型一病因:膽汁返流胰液分泌亢進,使胰管內壓升高----暴飲暴食，酒精

二方法:一）結扎胰管二）牛膽酸鈉致急性出血性胰腺炎大鼠注射牛膽酸鈉導致胰腺細胞壞死出血治療:

解痙止痛.胰酶抑制劑,針取陽陵泉、足三里,胰腺切除精品PPT第六節內分泌、營養代謝性疾病動物模型一、甲狀腺疾病動物模型1、模型機制飼喂甲狀腺腫病區糧食、抗甲狀腺藥物、手術摘除、口服甲狀腺素等2、造模方法1）缺碘及功能減退法飼喂缺碘食物2）實驗性甲狀腺腫法腹腔注射PTU精品PPT3)淋巴細胞性甲狀腺炎法選用Beagle犬4）實驗性甲亢法腹腔注射T43、模型特點精品PPT二、糖尿病動物模型1、造模機制注射高血糖因子、引起胰島細胞損傷的藥物、手術切除胰腺、自發性糖尿病鼠2、造模方法1）自發性糖尿病鼠2）四氧嘧啶法1％的生理鹽水配制，40mg/kg靜注,注射后2h高血糖，6h低血糖，18h高血糖，穩定2周后作為成功模型,但對肝腎有損傷。3）鏈脲佐菌素法SD大鼠，禁食12h，PH4.5，1％的生理鹽水配制，STZ50mg／kg尾靜脈內注射造模，3d后測血糖，大于16．7mmol／L為模型精品PPT3治療:磺脲類降糖藥---刺激胰島β細胞釋放胰島素雙胍類降糖藥---促進外周組織對血糖的利用

三、肥胖動物模型一）營養性肥胖動物模型造模方法1）基礎或者營養飼料精品PPT

第七節外科學動物模型小腸缺血再灌注方法：麻醉，展開腸系膜，結扎動靜脈，并設置對照組。于不同時相去除結扎線，恢復血循環。如去除結扎線后血循環未恢復者要剔除。腎缺血再灌注

方法：結扎腎動脈，不同時間解除結扎，并注射胰島素觀察不同濃度的胰島素的作用。

需要設置對照組，并同時選用多只大鼠或家兔。精品PPT癲癇模型方法：注射馬桑內酯：雄性以3mg／kg，雌性以2.5mg／kg為宜。腦缺血再灌注模型方法：暴露并用魚線阻塞頸總動脈，一定時間后抽去線，恢復血循環。治療：可采用注射干細胞法。精品PPT第八節五官、皮膚科一耳鼻喉科1氨基甙類抗生素中毒性耳聾抗生素破壞毛細胞，改變內耳微循環等，大鼠肌注慶大霉素80～250mg/kg,持續1~4周。鼻超敏反應

10％的2、4二異氰酸甲苯酯（TDI)橄欖油10ml滴入兩個鼻孔，連續7日后改為隔日滴，出現噴嚏，鼻癢，大量酸性和肥大細胞出現于鼻粘膜上，組胺含量增多。精品PPT二系統性紅斑狼瘡方法：1、淋巴細胞分離取出親代鼠脾、淋巴結細胞，按2：1混合制成細胞懸液。

2、淋巴細胞靜脈注射1x107個，0天和7天各注射一次，同時注射50IU肝素第四周就出現SLE病變。癥狀：大量抗組蛋白、抗dsDNA抗體等。治療：糖皮質激素，IL-2等精品PPT陽虛動物模型

輕化可的松小鼠每日肌注0.4~1.25g/kg，連續10天后出現反應遲鈍，豎毛等癥狀。用于補陽藥物篩選，陽虛本質研究。陰虛動物模型每天甲狀腺素3mg和利血平20mg予小鼠灌胃3周即可，造成甲亢癥狀，口渴，煩躁，體重減輕，用于補陰藥物篩選和陰虛的研究。第九節中醫證候動物模型p216精品PPT血虛動物模型

2％的乙酰苯肼，1ml/100g體重皮下注射。造成口唇粘膜發白，四肢無力，毛發失澤。血瘀動物模型

10%高分子右