HPLC法測(cè)定雙黃消炎片中鹽酸小檗堿含量

【摘要】目的用HPLC法測(cè)定雙黃消炎片中鹽酸小檗堿的含量。方法HPLC用外標(biāo)一點(diǎn)法，DiamonsilODS1C18柱，乙腈-/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相，流速為/min，λ=265nm。結(jié)果鹽酸小檗堿在～μg/ml范圍內(nèi)呈良好線性,回歸方程為Y=+，r=，平均加樣回收率%，RSD為%。結(jié)論方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，專(zhuān)屬性強(qiáng)，測(cè)定結(jié)果重復(fù)性好，為雙黃消炎片中鹽酸小檗堿的定量分析提供了科學(xué)有效的方法。

【關(guān)鍵詞】雙黃消炎片鹽酸小檗堿HPLC

【Abstract】ObjectiveToestablishthemethodfordeteminingt,/LPotassiumPhosphateMonobasicacidasthemobilephase,/～μg/mlfortheBerberinehydrochlorideandlinearequationwasY=+=%%.ConclusionThismethodwassimpleandaccurateandproper,whichcanbeprovideforscientificquantitativeanalysismethodofBerberinehydrochlorideinshuanghuangxiaoyanPianandthereduplicationoftheresultwasgood.

【Keywords】shuanghuangxiaoyanPian；Berberinehydrochloride；HPLC

雙黃消炎片收載于部頒藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第二冊(cè)中，功能主治：消炎，用于咽喉疼、腹瀉、痢疾、慢性痢疾。處方由三顆針、黃芩組成，原標(biāo)準(zhǔn)中只鑒別項(xiàng)檢查，沒(méi)有含量控制項(xiàng)。為了更好地控制雙黃消炎片的質(zhì)量，筆者對(duì)雙黃消炎片處方進(jìn)行了分析，本處方中的君藥三顆針為小檗科植物，小檗堿為三顆針的主要成分之一。為更好控制產(chǎn)品質(zhì)量，提高藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，參照文獻(xiàn)資料與《中國(guó)藥典》2005年版一部復(fù)方黃連素片項(xiàng)下含量測(cè)定方法，對(duì)雙黃消炎片中鹽酸小檗堿的含量測(cè)定進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究［1，2］。采用高效液相色譜法測(cè)定鹽酸小檗堿含量，方法簡(jiǎn)便快速，穩(wěn)定可靠，專(zhuān)屬性強(qiáng)。

1儀器與試藥

儀器：高效液相譜儀：SPD-10A日本島津；紫外分光儀：上?？祷瘍x器制造廠；超聲波清洗器：SK3200H上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司。試藥：鹽酸小檗堿對(duì)照品由中國(guó)生物制品檢定所提供,其他試劑均為分析純；雙黃消炎片由河南百年康鑫藥業(yè)有限公司提供,上市藥品：通化某藥業(yè)有限公司。

2方法與結(jié)果

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-/L磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為265nm；流速為1ml/min；柱溫為室溫。理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

溶液的制備對(duì)照品溶液的制備：取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得。供試品溶液的制備：取本品20片，研細(xì)，取，精密稱(chēng)定，置25ml量瓶中，加甲醇20ml，超聲處理30min,放冷，加甲醇至刻度，混勻，濾過(guò)，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液1ml置5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用μm的微孔濾膜濾過(guò)，即得。

陰性樣品的測(cè)試取缺三顆針的樣品，按供試品制備法制備陰性樣品后測(cè)定，在鹽酸小檗堿相應(yīng)位置無(wú)峰出現(xiàn)，說(shuō)明陰性樣品的其他成分無(wú)干擾。見(jiàn)圖1～3。圖1鹽酸小檗堿對(duì)照品色譜圖圖2雙黃消炎片色譜圖圖3陰性樣品色譜圖線性關(guān)系的考察取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量,加甲醇配制不同濃度的對(duì)照品溶液，分別為μg/ml、μg/ml、μg/ml、μg/ml、μg/ml，照上述色譜條件各進(jìn)樣10μl測(cè)定峰面積，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，以不同濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程Y=+=,表明鹽酸小檗堿在～μg/ml之間呈良好的線性關(guān)系。表1線性關(guān)系的考察

精密度試驗(yàn)精密吸取對(duì)照品溶液進(jìn)樣量10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積，測(cè)定結(jié)果RSD為%，表明精密度良好。表2精密度試驗(yàn)

重現(xiàn)性試驗(yàn)取本品20片，稱(chēng)取平均處重，研細(xì)，取6份，每份，精密稱(chēng)定，照供試品溶液制備方法，制成供試品溶液，照上述色譜條件進(jìn)行試驗(yàn)，進(jìn)樣10μl，測(cè)定每份鹽酸小檗堿含量，結(jié)果RSD為%，重現(xiàn)

性良好。表3重現(xiàn)性試驗(yàn)

穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液，分別在0、2、4、6、8h進(jìn)樣10μl，測(cè)定鹽酸小檗堿峰面積，RSD為%。表明制備的供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。表4穩(wěn)定性試驗(yàn)

加樣回收率試驗(yàn)精密稱(chēng)取已知含量的同一批號(hào)供試品5份，取樣量為，精密稱(chēng)定,分別加入濃度為/ml的對(duì)照品溶液1ml，按照供試品溶液制備方法，制備供試品溶液，進(jìn)樣量10μl，測(cè)定鹽酸小檗堿含量，平均回收率為%，RSD為%。表5加樣回收率試驗(yàn)

樣品測(cè)定按照供試品溶液制備方法對(duì)3批產(chǎn)品進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表6。表6含量測(cè)定結(jié)果

3討論

樣品每片含三顆針以鹽酸小檗堿計(jì)，均不少于，由于各地三顆針?biāo)幉牡牟顒e較大，因此暫規(guī)定：本品每片含三顆針以鹽酸小檗堿計(jì)，不得少于。

參考《中國(guó)藥典》2005年版一部復(fù)方黃連素片項(xiàng)下含量測(cè)定方法所用的流動(dòng)相，分別采用乙腈：/L磷酸二氫鉀為流動(dòng)相，進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果以乙腈－/L磷酸二氫鉀為流動(dòng)相所得色譜圖分離效果及出峰時(shí)間較為合適。因此選擇流動(dòng)相為乙腈-/L磷酸二氫鉀。

【參考文獻(xiàn)】

1孫雪妹，楊明華，戴影