檢驗師免疫知識點匯總隨機誤差的主要特征是具有抵償性。在某些情況下，自身耐受被破壞導致免疫自穩功能低下，機體免疫系統對自身成分發生免疫應答，稱為自身免疫。CEA為含有復雜的抗原決定簇和多種異構型的糖蛋白。一般認為AFP含量起過400ng/ml,對原性肝癌有較高的診斷價值。PCR-SBT方法是一種通過對擴增后的HLA基因片段進行核酸序列測定，從而判斷HLA基因多態性的方法，是最精確、直濕的方法免疫原性是指抗原分子能誘導免疫應答的特性。抗原性是指抗原分子能與應答產物發生特異性反應的特性完全抗原既有免疫原性，又有免疫反應性（抗原性）。既能刺激機體產生免疫應答，包括誘導產生抗體及效應T淋巴細胞，又能與抗體或效應T淋巴細胞發生特異性結合的能力。半抗原僅能與相應的抗體發生特異性結合反應（即有抗原性），自身不能誘導機體產生抗體（即無免疫原性）。制備人工抗原常用為載體牛血清白蛋白溶解度大，免疫活性強，且易獲得。淋巴結、脾、扁桃體等為外周淋巴器官，是成熟淋巴細胞定居的場所，執行免疫應答功能。單克隆抗體理化性狀高度均一，其抗原結合部位和同種型都相同，生物活性專一。特異性強，純度高，易于實驗室標準化和大量制備。人-鼠嵌合抗體是通過基因工程技術將人Ig的C區與鼠1g的V區連接，導入細胞內表達制備的抗體。免疫球蛋白的型及亞型是根據CL（恒定區輕鏈）抗原性的不同進行分類的，各Ig可分為K型和入型。免疫球蛋白類及亞類的是根據（CH）（恒定區重鏈）的結構和抗原性不同區分的，可將Ig分為IgG、IgA、IgM>IgD>IgE5類。抗原抗體反應必須在合適的PH環境中進行，一般PH為6-9,有補體參與的反應pH為7.2-7.4,過高或過低都將影響抗原與抗體反應采用磷酸鹽作為包被緩沖液一般選擇中性條件，即PH7.2-7.4。MHC是majorhistocompatibilitycomplex的縮寫，含義為主要組織相容性復合體。M蛋白是Monoclonalprotein,其含義是單個B細胞惡性增殖所分泌的免疫球蛋白，無抗體生物活性。B淋巴細胞表面標志有mlg、CD19/15、CD21、CD35、CD32、CD40、CD80/86分子等。成熟B淋巴細胞表面表達SmlgM和SmlgDoCD19區分外周血B細胞與其他細胞；應用CD5可分類B1細胞和B2細胞B1細胞不表達CD23,表達CD5,與機體的免疫調節、自身免疫病及B細胞源性腫瘤密切相關B2細胞不表達CD5,表達CD23,是外周血中主要的B細胞。是執行體液免疫的主要細胞，其通常在接受多數抗原刺激后經活化、增殖、分化以及伴隨的體細胞突變和親和力成熟的過程中，產生高親和力抗體。成熟B細胞可同時表達mlgD和mlgM,未成熟的B細胞膜表達mlgM,無論B細胞成熟與否均表達mlgM,即u鏈；所以用抗口鏈的抗體可活化B細胞，其他細胞均不表達mlgM。TCR是T細胞抗原受體，表達于所有成熟T細胞表面，是T細胞識別外來抗原并與之結合的特異受體。T細胞表面具有SRBC受體（CD2）,能與SRBC結合形成花環CD3表達在全部T細胞表面，是T細胞共同的表面標志。CD4、CD8只表達在部分T細胞上CD2表達在全部人T細胞上和部分NK細胞上，因其能與綿陽紅細胞結合，又稱綿陽紅細胞受體。利用E花環試驗測定外周血中T細胞總數。是胸腺細胞最早表達的分化抗原。CD32：又稱Fc受體，此受體可與抗體包被的紅細胞結合形成EAC玫瑰花環，是鑒別B細胞的方法。CD抗原（簇分化抗原）：區別淋巴細胞的重要標志CD3表達于全部T細胞表面，是T細胞的共同的表面標志。是組成TCR-CD8復合物的重要組成部分。CD4：主要是輔助性T細胞（Th細胞），HIV受體。Th細胞作用有抗原特異性，但通常不能直接殺傷靶細胞。CD8：主要是細胞毒T細胞（Tc細胞）,Tc細胞既具有抗原特異性又能直接殺傷靶細胞。CD14：單核細胞特異性免疫標志CD19/CD5分子：成熟B細胞均表達CD19CD21：B細胞上的EB病毒受體。CD34：造血干細胞CD35：C3b受體。此分子與相應補體或者分子結合后，可使B細胞活化CD56：臨床上將CD3-CD56+CD16+認作NK細胞。NK細胞標志NKT細胞：大多數CD4-CD8-T細胞CD41：巨核細胞CD3+CD8+CD30-：Tel細胞CD3+CD8+CD30+：Tc2細胞CD3+CD4+CD8-：輔助性T細胞（Th）CD3+CD4-CD8+：細胞毒性T細胞（Tc或CTL）CD4+CD25+調節性T細胞（Tr或Treg）NK細胞、巨噬細胞、中性粒細胞作用無特異性。腫瘤病灶中浸潤的巨噬細胞與腫瘤的擴散及轉移呈負相關，腫瘤患者巨噬細胞的吞噬率和吞噬指數明顯下降。Tc（細胞毒性T細胞）細胞具有CD8分子，與相應抗體結合，與磁性顆粒結合。CD4和CD8是T淋巴細胞上的抗原蛋白質cd4+稱為輔助性T細胞（Th細胞）CD8+稱為細胞毒性T細胞（Tc細胞）.當特異性抗原記憶T細胞再次與相應過敏原接觸時，可迅速增殖分化為效應T細胞,即CD4+Thl細胞T（tdh）細胞和CTL細胞.Raji細胞表面有大量C3b、Clq和C3d受體，沒有Smlg。B細胞與尼龍棉結合單核細胞黏附玻璃或塑料表面特性CD4+T細胞和CD8+T細胞的區別主要在于分化抗原，只能通過特異性抗體區分，故采用免疫磁珠法分離。M蛋白是由于單克隆漿細胞異常增殖所產，其理化性質十分均一，但無免疫活性，可為疫球蛋白的任何類型。T細胞介導細胞免疫應答，其功能檢測包括體內（0T試驗）和體外（T細胞及其亞群、淋巴細胞轉化等）。T細胞表面具有PHA受體，能與PHA結合，促進體外培養的T細胞發生轉化并增殖。T細胞表面具有PIIA受體，能與PHA結合，促進體外培養的T細胞發生轉化并增殖。這一過程稱為淋巴細胞轉化，常用于反映細胞免疫的功能。培養72小時溶血空斑試驗為檢測B細胞功能的試驗。EPAP含義為辣根過氧化物酶-抗辣根過氧化物酶復合物，酶為辣根過氧化物酶。“P”為辣根過氧化物酶英文的字頭。DAB為HRP的不溶性底物，氧化后形成的不溶物沉積于組織中，通過顯微鏡可觀察到。Bruton病屬于體液免疫缺陷，但由于新生兒體液中存在一定量由母體合成的IgG及slgA,因此，出生后6個月才會出現反復化膿性感染。慢性肉芽腫屬原發性吞噬細胞功能缺陷，其中性粒細胞和單核細胞的調理、吞噬和殺傷能力受損。體液免疫缺陷者易發生細菌性感染，且以化膿性細菌感染為主，細胞免疫缺陷者還易發生惡性腫瘤。性聯鎖重癥聯合免疫缺陷病是由于IL-2,IL-4,IL-7,IL-9和IL-15共同擁有的受體Y鏈（yc）基因突變，使之不能正常合成ye鏈。此鏈為共用鏈，從而使T細胞和B細胞不能接受CK作用，均不能活化。HIV除感染CD4+T細胞外，還能感染巨噬細胞、樹突狀細胞、B細胞和腦組織中的小肢質細胞。乳膠法主要用于定性IgM-RF的測定而速率散射比濁法主要用于IgM-RF的定量T型TH型超敏反應均為體液免疫所致，將患病動物血清（抗體）轉移至正常動物體內，可復制出類似癥狀。血清特異性IgE測定、皮內試驗和激發試驗均能檢出過敏原，但后兩者屬于體內試驗放射變應原吸附試驗（RAST實驗）：將純化的變應原吸附于固相載體，加入待測血清，再用放射性核素標記的抗IgE抗體反應，定量檢測血清中特異性IgE水平。1型超敏反應引起效應器官的功能損害，無實質性病理損害。由于變應原再次進入體內后引發的超敏反應。反應的特點包括：發生快，幾秒鐘至兒十分鐘內出現癥狀，消退亦快；為可逆性反應。由結合在肥大細胞和嗜堿性粒細胞上的IgE抗體所介導。主要病變在小動脈，毛細血管擴張，通透性增加，平滑肌收縮。有明顯的個體差異和遺傳背景。補體不參與此型反應。肥大細胞、嗜堿性粒細胞表面可吸附IgE,與變應原結合后脫果直粒，嗜酸性粒細胞被趨化到局部釋放活性介質。皮內試驗原理：變應原的稀釋保存液或生理鹽水一般用做陰性對照，二硝基氟苯和白三烯是變應原，陽性對照液常用鹽酸組胺。皮試假陽性的原因：變應原稀釋液偏酸或偏堿；患者有皮膚劃痕癥；變應原變質或污染H型超敏反應（溶細胞型超敏反應）：屬于體液免疫，抗體、補體、NK細胞、吞噬細胞均參與。抗原或抗原抗體復合物存在于細胞膜上：介導的抗體是IgG、IgM,有補體、吞噬細胞、NK細胞參與，導致靶細胞破壞。（CD4+TH1細胞）輸血反應、新生兒溶血癥、自身免疫性溶血性貧血和藥物過敏性血細胞減少癥血細胞抗體是II型超敏反應的主要介質，檢測抗紅細胞抗體方法是乳膠凝集試驗。III型超敏反應是由可溶性免疫復合物沉積于局部或全身多處毛細血管基底膜后，通過激活補體和在一些效應細胞參與作用下，引起的以充血水腫、局部壞死和中性粒細胞浸潤為主要特征的炎癥反應和組織損傷。III型超敏反應是可溶性抗原與相應抗體結合，形成中等大小的可溶性免疫復合物，沉積于局部或全身毛細血管基底膜后，通過激活補體系統，吸引白細胞和血小板聚集，引起以充血水腫、中性粒細胞浸潤、組織壞死為主要特征的病理性免疫應答。（IgE）III型超敏反應的發生主要是由循環免疫復合物（CIC）引起，通過檢測CIC可證實某些疾病是否與HI型超敏反應有關。PEG沉淀法IV型超敏反應是細胞免疫介導的變態反應，T細胞介導。傳染性變態反應由病毒和其他胞內寄生菌引起，是細胞免疫過程伴隨的病理損傷。IV型超敏反應是由效應T細胞（CD8+T細胞）與相應致敏原作用引起的以單個核細胞（巨噬細胞、淋巴細胞）浸潤和組織細胞變性壞死為主的吞噬反應。（無補體抗體）混合淋巴細胞反應不能判定HLA型別，只能說明供受體HLA-D抗原配合程度，如果摻入量和轉化細胞最多，表示MLC強陽說明D抗原完全錯配。淋巴細胞功能測定的體內試驗主要是進行遲發型超敏反應，借此了解淋巴細胞對抗原、半抗原和有絲分裂原刺激后的應答反應移植物抗宿主排斥反應發生于干細胞移植。移植物內干細胞在宿主體內存活并增殖，這種免疫細胞被宿主HLA抗原活化、發生免疫應答，引起宿主廣泛組織損傷。超急性排斥反應主要由體液免疫介導，由于患者體液中預先存在抗供者HLA抗體所致。數分鐘或數小時即可發生。患者體內預存抗體與移植物血管內細胞結合，壞死性血管炎癥是超急性排斥反應的主要病理改變。移植前如果受者血清中預先存在抗供者淋巴細胞的抗體，移植后80%發生超急性排斥反應，必須做淋巴細胞交叉毒性試驗以檢測受者體內抗供者淋巴細胞的細胞毒性抗體。急性排斥反應主要由細胞免疫介導，患者T細胞直接識別供者HLA分子，T細胞大量活化，攻擊移植物，引起損傷。主要原因是細胞免疫應答。CD8+Tc能直接識別異體MHC分子，是重要的效應細胞。小血管壁上有單個核細胞為主的細胞浸潤、間質水腫與血管損害。為急性排斥反應的病理改變。3H-TdR4小時細胞轉化試驗是一種檢測受者致敏T細胞的方法，是一項預報急性排斥反應危象較為滿意的試驗。急性體液排斥反應的病理改變： 激活補體，導致急性血管炎癥為其主要病理改變。急性細胞排斥反應由細胞免疫介導，主要為CD8+CTL細胞毒性及巨噬細胞的作用，導致急性間質炎癥。慢性排斥反應屬于遲發型變態反應，表現為血管壁細胞浸潤、間質纖維化和痕跡形成。NK細胞、巨噬細胞、中性粒細胞等在抗腫瘤體液免疫效應中發揮作用的共同機制是借ADCC效應殺傷IgG包裹的腫瘤細胞。細胞免疫應答在機體抗腫瘤效應發揮重要作用，且腫瘤抗原屬于內源性抗原，腫瘤細胞可將抗原提呈給CD8+Tc細胞，使其活化，發揮細胞毒效應。NK細胞屬于非特異性免疫細胞，無需抗原活化，直接發揮殺傷腫瘤效應。NK細胞在腫瘤發生早期起重要效應。K562為人NK細胞敏感的靶細胞，測定NK細胞活性時以K562為靶細胞。抗血清保存有三種方法：第一種是4c保存，通常可保存3個月-半年，效價高時可保存1年左右;第二種是-20C至卜40℃低溫保存，可保存5年左右，但需防止反復凍融第三種是真空冰凍干燥保存，可保存5-10年。免疫印跡同時檢測多種自身抗體，為ENA抗體檢測的常用方法。抗-CCP對類風濕性關節炎的敏感性為80%,且具有較高特異性。CA125是子宮內膜癌的標志物。胰腺癌的標志物是CA19-9CA15-3是監測乳腺癌患者術后復發的最佳指標。葡聚糖-泛影葡胺（Ficoll）等密度梯度離心法是利用一種密度介于1.075-1.092之間而近于等滲的溶液作密度梯度離心，使一定密度的細胞按相應密度梯度分布，可將各種血細胞與單個核細胞分離。Ficoll分離液法是一種單次差速密度梯度離心的分離法。Ficoll分層液主要用于分離外周血中單個核細胞，是一種單次密度梯度離心分離法，其分布由上到下依次為：稀釋的血漿層、單個核細胞層、粒細胞層和紅細胞層。從單個核細胞懸液中除去單核細胞，從而獲得純淋巴細胞群的主要方法有：吸附柱過濾法、黏附貼壁法、磁鐵吸引法及試劑分離法。對分離細胞可采用的短期保存技術為：將分離的細胞用適量含10%?20%滅活小牛血清的Hanks或其他培養液稀釋重懸，短期保存可置于4c保存；長期保存技術為：液氮深低溫（-196C）環境保存細胞，加入二甲亞碉作為保護劑。Percoll分離液法是一種連續密度梯度離心分離法，該法是純化分離單核細胞和淋巴細胞的一種較好的方法。Percoll分層液法:1、死細胞層、血小板，2、富含單核細胞組分層，3、富含淋巴細胞的組分層4、粒細胞與紅細胞層IgGM蛋白：B至慢丫球蛋白IgAM蛋白：B和丫球蛋白之間IgD和IgEM蛋白：B到丫球蛋白輕鏈病M蛋白：丫球蛋白有時也可在a2-B球蛋白區域非抗原性刺激物包括脂多糖(LPS)、植物血凝素(PHA)、刀豆素A(ConA)、美洲商陸(PWM)oLPS刺激B細胞PWM可刺激T和B類細胞PHA和ConA刺激T細胞增殖PPD為T細胞增殖的特異性刺激物植物血凝素、刀豆蛋白、CD3單克隆抗體為T細胞增殖的非特異性刺激物DiGeorge綜合征的病因為胚胎胸腺發育不良，屬于原發性T細胞免疫缺陷病原發性吞噬細胞缺陷慢性肉芽腫。選擇性IgA缺陷癥屬于原發性B細胞缺陷。細菌脂多糖為B細胞增殖的非特異性刺激物凝膠過濾法又稱分子篩層析。通過凝膠分子篩作用，可將大、中、小三類分子分開，選擇凝膠柱時應注意選用適于分離范圍內的凝膠。離子交換層析是利用一些帶電離子基團的凝膠或纖維素，吸附帶有相反電荷的蛋白質抗原。常用的離子交換劑有離子交換纖維素、離子交換凝膠、離子交換樹脂。HAT系次黃喋吟(hypoxantin)＞氨基蝶聆(aminopterin)和胸腺嗑噬核昔(thymidin)三種物質各英文首字之綴列，HAT培養基也就是指含有這三種物質的細胞培養基。次黃噤吟磷酸核酸核糖轉化酶是HGPRTo人一鼠嵌合抗體是將人IgC區與鼠IgV區連接，導入細胞內表達制備而成的抗體。制備單克隆抗體的方法是用缺乏次黃喋吟悔酸核糖轉化酶或胸腺喀咤核昔酸酶的瘤細胞變異株與經免疫的小鼠脾臟的B細胞融合。體液中的溶菌酶主要由巨噬細胞分泌。炭粒廓清實驗用來檢測巨噬細胞功能吞噬功能檢測巨噬細胞對顆粒性抗原物質具有很強的吞噬功能，常用雞紅細胞、白色念珠菌、酵母細胞等作為吞噬顆粒用斑螫敷貼法收集人巨噬細胞或從腹腔滲出液獲得鼠巨噬細胞TNF-a由細菌脂多糖活化的單核-巨噬細胞產生。IFN-丫又稱H型干擾素或免疫干擾素，主要由T細胞和自然殺傷細胞產生。幾乎所有的有核細胞均可產生IL—1,主要以巨噬細胞為主。IL—6可誘導肝細胞合成a1—抗糜蛋白酶，能刺激漿細胞生長。IL-4是能夠增強Th2細胞反應，促進IgE類別轉換的一類細胞因子。IgG、IgA、IgM的測定方法是：單向瓊脂擴散法、速率散射比濁法等；IgD的測定方法是：單向瓊脂擴散法、ELISA等；IgE的測定方法是：ELISA、間接血凝試驗、放射免疫法、化學發光免疫分析、免疫熒光測定法等。血清區帶電泳是測定M蛋白的一種定性試驗，常用乙酸纖維素膜和瓊脂糖電泳兩種方法。主要是以正常電泳圖譜與標本圖譜進行比較，可看出異常Ig的區帶和位置。①M區帶：M區帶多見于丫區或B區IgG型一y區為主 IgA型一丫與B區IgM型一B2區或丫區 IgD型一B或丫區②多克隆丙球病：在丫區著色深，寬大而不均勻。③低丙球病：丫區無區帶。AIDS的發病過程中無替代途徑補體的激活。T細胞分化成熟的場所是胸腺B細胞發育的中樞器官是骨髓淋巴細胞發生免疫應答的場所是淋巴結直接凝集試驗檢測顆粒性抗原間接凝集試驗是以抗原致敏載體檢測抗體反向間接凝集試驗是以抗體致敏載體檢測抗原間接凝集抑制試驗將標本首先加人抗體，然后加入抗原致敏顆粒，如未出現凝集，則說明待測標本中含有相應抗原協同凝集試驗以金黃色葡萄球菌作為載體標準品是含量確定的處于一定基質中特性明確的物質。質控品是含量已知的處于與實際標本相同的基質中的特性明確的物質。電化學發光免疫分析常將抗原或抗體包被于磁性顆粒表面，通過磁場達到分離目的。ELISA是將抗原或抗體吸附于聚苯乙烯的微孔板中，用洗滌方法去除游離標記物，屬于固相吸附分離技術。RIA采用PEG沉降結合標記物，然后測定沉淀物，屬于PEG沉降分離。1271食物碘EL1SA法主要用于可溶性細胞因子的測定。酶聯免疫斑點試驗可在光學顯微鏡下觀察分泌細胞因子的細胞。分子生物學測定方法可檢測細胞因子基因的缺失和突變非霍奇金淋巴痛是淋巴結或其他淋巴組織中的淋巴細胞或組織細胞發生惡性增生所致。M蛋白：篩選：蛋白區帶電泳類型：免疫固定電泳定量：免疫比濁法HLA復合體是一組復雜基因系統，遺傳特征包括：多態性、單元型和連鎖不平衡。同時'也表現為共顯性遺傳規律。B2-M是MHC-I類分子的輕鏈，由15號染色體上的基因編碼。受者T細胞對供者MHC分子的識別可以是通過直接途徑和間接途徑，不僅僅指直接識別；受者T細胞識別經過受者APC加工處理的、來源于供者MHC分子的肽被稱為間接識別。T細胞對供者MHC分子的識別，被識別分子的形式是經處理的同種異型MIIC分子來源的肽。HLAT、H類分子的抗原多肽結合區是體現HLA分子多態性的主要區域。Ig樣區由a2和B2組成，系非多態區域。HLA-I分子主要提呈內源性抗原。利用特異性抗血清，通過微量細胞毒試驗可對所有HLA-I類抗原和HLA-DR抗原進行分型，其他抗原需通過細胞分型法鑒定。淋巴細胞豐富表達HLA分子，獲取容易，可作為待檢細胞。HLAT類分子可廣泛表達于各種組織的有核細胞上，以淋巴細胞、白細胞表面的表達密度最高，肝、腎、皮膚、主動脈和肌細胞次之，血小板和網織紅細胞也表達此類抗原，而成熟紅細胞、神經細胞和滋養層細胞則不表達。HLATT類分子的分布較窄，主要存在于B細胞、單核/巨噬細胞、樹突狀細胞及其他抗原遞呈細胞上。血清學分型法所用的分型血清，同時含有I類和II類兩種抗原的抗體，為防止I類抗原的抗體干擾，必須經多人份血小板吸附(血小板只表達I類抗原)。細胞因子大多數是低分子量蛋白質，多以單體形式存在，以非特異的方式發揮作用，不受MHC限制。IL-2：(白細胞介素2)由活化T細胞產生，促進T細胞增殖，通過自分泌或旁分泌方式發揮作用。細胞免疫促進因子可用于腫瘤治療。以單體形式存在，分子量較小。能促進B細胞增生和分泌抗體，但不能促進免疫球蛋白類別的轉換。IL-4：能夠促進免疫球蛋白類別的轉換腫瘤壞死因子：誘導腫瘤細胞凋亡，殺傷和抑制腫瘤細胞；同時是一種炎癥因子，參與炎癥反應。可上調MHC分子表達水平，促進抗原提呈。IL-3與血細胞分化發育密切相關，能促進多能干細胞的定向分化。IL-3可刺激多能干細胞和多種祖細胞的增殖與分化，又稱為多重集落刺激因子(multi-colonystimulatingfactor,multi-CSF)和造血細胞生長因子(hemopoieticcellgrowthfactor,HCGI;)Raji細胞是由Burkitt淋巴瘤患者分離建立的B細胞株。腫瘤相關抗原是指非腫瘤所特有的、正常細胞和其他組織上也存在的抗原，只是其含量在細胞癌變時明顯增高，此類抗原只表現為量的變化而無嚴格的腫瘤特異性。腫瘤標志物免疫測定對高危人群進行篩查和對可疑腫瘤患者進行動態觀察,但不能用于普通人群早期普查。注射丙種球蛋白、抗毒素、細胞因子等以治療或緊急預防感染的措施屬于被動人工免疫注射滅活疫苗、類毒素等使之產生特異性免疫為自動人工免疫。顆粒性抗原包括各種細胞、細菌、寄生蟲、SRBC等。用于凝集反應。組織液、細胞裂解液、血清蛋白、細菌培養液均為可溶性抗原，均可與相應抗體結合形成沉淀反應。（可溶性抗原與相應抗體在一定條件下形成。）研磨法是制備組織細胞抗原的方法具備免疫原性的佐劑，如卡介苗、枯草分枝桿菌、短小棒狀桿菌、百日咳桿菌、脂多糖、細胞因子等；不具備免疫原性的佐劑，如氫氧化鋁佐劑、磷酸鋁、磷酸鈣、石蠟油、羊毛脂、表面活性劑、藻酸鈣、多聚核甘酸、胞壁肽等。單克隆抗體只識別單一抗原表位，與抗原結合的強度不如多克隆抗體，故抗原抗體反應的親和力降低。（診斷試劑缺點）單克隆抗體只識別單一抗原表位，減少交叉反應，提高實驗方法的特異性。（診斷試劑提高）不完全抗體的含義：能與抗原牢固結合，但因分子量較小，不能起到由橋聯作用而形成的可見凝集現象，IgG類抗體常出現不完全反應。半抗原載體：蛋白質類，常用的有人血清清蛋白、牛血清清蛋白、血藍蛋白等多肽類聚合物，常用多聚賴氨酸大分子聚合物和某些顆粒，如聚乙烯毗咯烷酮、活性炭等熒光顯微鏡下，不同的抗核抗體呈現不同的熒光核型。抗DNA熒光核型呈現周邊型，對診斷SLE有重要價值。熒光偏振技術用熒光素標記小分子抗原。標記抗原和待測抗原共同競爭定量抗體，通過檢測偏振光的強度測定待測抗原的含量。熒光抗體染色技術中直接法較其他幾種方法特異性高，非特異性染色最低。雙向擴散試驗中沉淀線的形成是根據抗原抗體兩者比例所致，沉淀線靠近抗原孔，提示抗體含量大；反之，提示抗原含量多。（靠近多的，彎向小的。）沉淀反應：「免疫比濁法（抗原過量檢測系統）的基本原則是在反應體系中保持抗體過量。此時，待測抗原含量與濁度呈正相關。」聚乙二醇（PEG）能夠加快抗原抗體的結合，促進免疫復合物形成，縮短反應時間O免疫比濁測定過程中，當抗原過量時，形成的IC分子小，而且會發生再解離，使濁度反而下降，光散射亦減少，形成高劑量鉤狀效應。免疫透射比濁分析實驗要求溶液中存在的抗原抗體復合物分子應足夠大，分子太小則阻擋不了光線的通過。速率散射比濁法：即在抗原抗體反應達到最高峰時，測定其復合物形成的量,峰值的高低在抗體過量情況下與抗原的量成正比。速率散射比濁免疫分析是一種抗原-抗體結合反應的動態測定法，將各單位時間內抗原抗體形成復合物的速率及復合物顆粒產生的散射信號聯系在一起，即形成速率散射比濁分析。其優點是快速，靈敏度高，結果準確可靠。免疫比濁法測定密切相關的因素有：抗原抗體的比例、抗體的質量、抗原抗體反應的溶液、增濁劑的應用。（抗原的質量）初步制備抗原破碎組織細胞的方法有反復凍融法、超聲破碎法、自溶法、酶處理法、表面活性劑處理法。（微波破碎法）細胞融合為一隨機過程，融合后共有五種細胞存在，分別是脾-瘤融合細胞、脾細胞、脾-脾融合細胞、骨髓瘤細胞和瘤-瘤融合細胞。雜交瘤技術，巨噬細胞為常用的飼養細胞HAT為一種選擇性培養基，其中和為DNA復制的原料，“A”為葉酸拮抗劑，能阻斷細胞DNA合成主要途徑。分子量越大，融合率越高，但對細胞毒性也越大。一般選擇分子量為1000-2000o分離血清免疫復合物PEG所用的分子量6000,對蛋白質沉淀具有良好的選擇性。“克隆化”的目的是使每孔為單一細胞系分泌單一特異性抗體。因此，“有限稀釋法”接種的雜交瘤細胞數量是每孔1個。在同種異體移植時，決定組織相容性的同種抗原很多，其中起主要作用的是MHC的高度多態性。間接凝集試驗分為4類:正向間接凝集反應反向間接凝集反應間接凝集抑制反應：將標本與抗體試劑反應，然后加人致敏載體，若未出現凝集現象，說明待測標本中含有相應抗原，凝集反應被抑制，如乳膠法妊娠試驗。協同凝集反應：是一種反向間接凝集。采用金黃色葡萄球菌作為載體。該菌體細胞壁中含有A蛋白（SPA）,SPA能與特異性抗體TgG的Fc段結合。當其與IgG抗體連接時，就成為抗體致敏的顆粒載體，若與相應抗原接觸，即出現凝集現象。間接血凝試驗：是以紅細胞作為載體的間接凝集試驗。綿羊紅細胞容易獲得，醛化后容易保存和致敏，為最常用的固相載體。正向間接血凝試驗分：用紅細胞包被抗原檢測抗體的正向間接血凝試驗。正向（或反向）間接血凝抑制試驗：先將可溶性抗原（或抗體）與相應的抗體（或抗原）混合，然后再加入抗原（或抗體）致敏的紅細胞，則能抑制原先的血凝現象。抗人球蛋白試驗屬于一種特殊間接凝集試驗，用于檢測不完全抗體。其原理是通過抗人球蛋白（第二抗體）與待檢抗體結合，待檢抗體與紅細胞表面抗原結合，形成凝集現象。間接Coombs試驗用于檢測游離在血清中的不完全抗體。將受檢血清和具有待測不完全抗體相應抗原性的紅細胞結合，然后加入抗球蛋白抗體就可出現可見的紅細胞凝集。多用于檢測母體Rh（D）抗體，以便盡早發現和避免新生兒溶血癥的發生。直接凝集：反應中的抗原稱為凝集原，為顆粒性抗原，該試驗既能檢測抗原也能檢測抗體。為顆粒性抗原直接與相應抗體反應，比例合適時出現凝集。玻片凝集試驗為定性試驗方法試管凝集試驗為半定量試驗方法，常用試管凝集試驗有肥達試驗和外斐試驗。免疫電泳技術中采用的是可溶性抗原，故該技術屬于免疫反應中的沉淀反應。免疫電泳技術：直流電場下的凝膠內擴散；對流免疫電泳：雙擴與定向電泳；火箭免疫電泳：單擴與電泳；免疫電泳：雙擴與區帶電泳；免疫固定電泳：區帶電泳與沉淀反應單向擴散試驗：向瓊脂內混入抗體，待測抗原從局部向瓊脂內自由擴散，如抗原和相應抗體結合，則形成沉淀環。對流免疫電泳：可測出的蛋白質抗原的濃度可達Ug/ml。原理是雙向免疫擴散與電泳相結合的定向加速的免疫擴散技術。瓊脂凝膠的pH是8.4火箭免疫電泳：作為抗原定量只能測定Ug/ml以上的含量，如加人微量1251標記的標準抗原作放射自顯影，靈敏度可高達ng/mlo繪制標準曲線是以峰高為縱坐標，抗原濃度為橫坐標。待測抗原的量與沉淀峰高度呈正相關。瓊脂凝膠中的抗體不移動，樣品孔抗原向陽極泳動。含量可低達3ug/ml放射免疫分析：所使用的核素分兩類，一類發射丫射線，如1251,通常使用晶體閃爍體探測。另一類發射射線，如3H,使用液體閃爍體探測。免疫放射分析法：免疫放射分析核素標記在抗體分子上，體系中標記抗體過量，屬于非競爭反應。放射免疫分析法標記抗原，待測抗原是與過量（放免為限量）抗體結合。必備條件為：放射性核素標記的抗原、標準品、特異抗體、B與F分離、放射性測量儀器。熒光效率為熒光素基本特性，與其他因素無關。化學發光是吸收化學能使分子激發而發射的光熒光是吸收了光能使分子激發而發射的光辣根過氧化物酶（HRP）的常見底物為：鄰苯二胺（OPD）、四甲基聯苯胺（TMB）前者反應后顯橙黃色，后者為藍色堿性磷酸酶（AP）的底物為：對硝基苯磷酸酯（P-NPP）,反應后為黃色。可見光波長范圍：390-760納米紅光：波長范圍：760-622納米；橙光：波長范圍：622-597納米；黃光：波長范圍：597-577納米；綠光：波長范圍：577-492納米；青光：波長范圍：492-450納米；藍光：波長范圍：450-435納米；紫光：波長范圍：435-390納米.雙抗體夾心ELISA主要用于檢測大分子抗原，以確保待測抗原與固相抗體和酶結合物抗體反應。如CEA牛血清白蛋白是ELisa最常用的封閉物質。間接法主要用于檢測抗體，包括病原體抗體（HIV抗體）或自身抗體。不論哪一種抗體，它們均具有同種型抗原表位，這種表位具有種屬特異性，但種屬內是相同的。間接法的標記抗體在同一種屬內具有通用性。應用捕獲法可檢測IgM類抗體，其包被物質是抗IgM,用于捕獲血清中所有IgMoPEG沉淀法的特點：pH、離子強度等條件固定時，蛋白質分子量越大，用以沉淀的PEG濃度越小，分離血清免疫復合物一般采用PEG分子量6000oPEG沉淀血液中的免疫復合物，繼而用胰蛋白酶消化沉淀中的抗體蛋白，游離出抗原成分，用反向間接血凝試驗檢測HbsAg-CICo取活體組織，通過免疫熒光抗體染色，可直接對組織中免疫復合物定位。非特異性循環免疫復合物的檢驗技術中，普遍應用的是PEG沉淀法。目前化學發光酶免疫分析中常用的標記酶：HRP催化TMB呈藍色，加終止液后最大吸收波長為450nll1。HRP催化的發光劑為魯米素及其衍生物HRP催化0PD呈橙黃色，加終止液后最大吸收波長為492nmoHRP由糖蛋白和亞鐵血紅素組成，其酸的活性基團位于亞鐵血紅素部分。ALP催化的發光底物為AMPPD化學發光直接標記抗原或抗體物質口丫咤脂發光劑三聯毗咤釘和電子供體三丙胺在電極表面進行電化學和化學發光兩個過程。時間分辨熒光檢測儀器光源：脈沖伍燈(閃爍1000次/秒)。以具有獨特熒光特性的錮系元素及其螯合劑作為示蹤物，建立的一種新型的非放射性微量分析技術。故Eu最為常用。吸收濾片的作用是允許熒光通過，阻止紫外光通過，安裝在分色鏡與目鏡之間。激發濾片的作用是允許特定波長的激發光通過，安裝在光源與分色鏡之間。ELISA的常用固相膜：聚苯乙烯酶免印跡所用的固相膜：NC膜FITC為異硫氟基熒光素，黃綠色熒光，便于觀察，且標記容易，為最常用的熒光素。激發波長495nm,與抗體的氨基結合形成穩定化學鍵。發射波長530nmo時間分辨熒光免疫測定的標記物質為錮系元素。熒光酶免疫分析是以堿性磷酸酶為標記物，反應管作為固相載體，以4-甲基傘形酮磷酸鹽(4-MUP)為酶反應熒光基質。N-羥基丁二酰亞胺酯分子中的酯鍵在堿性溶液中迅速水解，C=0基團即可與蛋白質中的賴氨酸殘基形成肽鍵，使生物素標記在抗體分子上。親和素以結合1Ug生物素所需的量作為其活性單位。Img鏈霉親和素的最高活性可達18單位。ling親和素的最高活性單位約為13-15o

生物素分子有兩個環狀結構，其中咪哇酮環是結合生物素分子的主要部位。生物素分子有兩個環狀結構，其中睡吩環中含有戊酸側鏈，側鏈末端的竣基是與抗原、抗體或標記物結合的分子結構。為保證抗體分子的生物活性不受影響，每個抗體分子一般標記生物素的數目為3-5。標記反應時，生物素：IgG=2:1（mg/mg）o隨機運動（類似布朗運動）和定向運動，是中性粒細胞運動形式。小吞噬細胞即中性粒細胞。機體內吞噬細胞的吞噬活動大致劃分為趨化、吞噬和消化3個階段。檢測細胞內殺菌功能時，加美藍溶液作活體染色，如胞內白色念珠菌呈藍色，表示該菌已被殺死。硝基四氮陛藍（NBT）還原試驗用以檢測中性粒細胞的胞內殺菌能力。干擾素生物活性表現為抗病毒效應。以wish細胞為指示細胞，將細胞、