實驗動物學識記要點：1、 實驗動物(laboratoryanimal)是指經(jīng)人工飼育，對其攜帶微生物實行控制，遺傳背景明確或者來源清楚的用于科學研究、教學、生產(chǎn)、檢定以及其他科學實驗的動物。2、 實驗動物必須具備三個特點：a、從遺傳控制角度實驗動物必須是來源清楚、人工培育、遺傳背景明確的動物。b、從微生物控制角度所有實驗動物攜帶的微生物、寄生蟲都是在人工嚴格控制之下的。c、從應用角度培育所有實驗動物的最終目的都是用于科學實驗。3、 從某種意義上說，實驗動物是經(jīng)人類用現(xiàn)代科技手段創(chuàng)造的用于為人類科學實驗服務的，并具有新的生物學特性的動物物種。實驗動物是為研究的需要而培育的。確定是否是實驗動物，要經(jīng)過一系列檢測，如微生物和遺傳基因等，經(jīng)檢驗監(jiān)測后專家認定才能稱其為實驗動物，并逐步標準化。4、 實驗用動物：泛指一切用于實驗的動物。5、 實驗動物和實驗用動物的區(qū)別：A、 實驗用動物是指所有用于動物實驗的動物，其中包括實驗動物；B、 標準化的實驗動物所做的實驗研究具有較好的可重復性，而其他動物做實驗研究是差異較大，不易認可。C、 許多動物有很好的可利用的生物學特性，需要進行實驗動物化。6、 實驗動物學：(laboratoryanimalscienee)是研究實驗動物和動物試驗的科學。它涉及到兩方面的問題：a、實驗動物：實驗動物(laboratoryanimal)是以實驗動物本身為研究對象，專門研究它的生物學特性，遺傳育種，保種，培育新的品種品系，疾病控制，營養(yǎng)需要等方面的問題，以達到提供標準化的實驗動物的目的。b、動物試驗：動物試驗:(animalexperiment)是以實驗動物為材料，采用各種方法在實驗動物身上做試驗，研究動物在實驗過程中的反應、表現(xiàn)及發(fā)生、發(fā)展規(guī)律和有關技術問題。也就是實驗動物的應用問題。7、 實驗動物學的基本內(nèi)容：1、實驗動物遺傳育種學2、實驗動物微生物與寄生蟲學3、實驗動物環(huán)境生態(tài)學4、實驗動物營養(yǎng)學5、實驗動物醫(yī)學6、比較醫(yī)學7、 動物試驗，包括實驗動物的選擇、動物實驗的基本技術和方法、人類疾病模型、免疫缺陷性動物、實驗動物胚胎工程、轉(zhuǎn)基因動物(模式動物)、動物質(zhì)量檢測控制8、 實驗動物標準化：實驗動物生產(chǎn)條件標準化；實驗動物質(zhì)量標準化，包括微生物學質(zhì)量及遺傳學質(zhì)量的標準化；動物實驗應用條件標準化。9、 實驗動物標準化的四大控制：1、實驗動物遺傳質(zhì)量控制2、實驗動物微生物和寄生蟲質(zhì)量控制3、實驗動物營養(yǎng)質(zhì)量控制4、實驗動物環(huán)境質(zhì)量控制10、 實驗動物的福利和動物保護運動呈現(xiàn)全球化趨勢，發(fā)達國家有關實驗動物的法律和法規(guī)逐步完善，普遍開展了以替代(replacement)：是指使用低等級動物代替高等級動物，或不使用活的脊椎動物進行實驗，而采用其它方法達到與動物實驗相同的目的。減少(reduction)：是指如果某一研究方案中必須使用實驗動物，同時又沒有可行的替代方法，則應把使用動物的數(shù)量降低到實現(xiàn)科研目的最需的最小量。優(yōu)化(refinement)：是指通過改善動物設施、飼養(yǎng)管理和實驗條件，精選實驗動物、技術路線和實驗手段，優(yōu)化實驗操作技術，盡量減少實驗過程對動物機體的損傷，減輕動物遭受的痛苦和應激反應，使動物實驗得出科學的結(jié)果。為核心的“3R”運動。11、實驗動物微生物等級的設定(后兩版)：小鼠清潔級SPF級無菌級大鼠清潔級SPF級無菌級地鼠普通級清潔級SPF級無菌級豚鼠普通級清潔級SPF級無菌級家兔普通級清潔級SPF級無菌級犬普通級SPF級猴普通級SPF級12、實驗動物管理實行許可證制度從事實驗動物保種、繁育、生產(chǎn)、供應、運輸、商業(yè)性經(jīng)營以及實驗動物相關產(chǎn)品生產(chǎn)、供應的單位和個人，應當按照國家規(guī)定取得省科學技術行政部門頒發(fā)的《實驗動物生產(chǎn)許可證》。使用實驗動物及相關產(chǎn)品進行科研、檢定、檢驗和以實驗動物為原料或者載體生產(chǎn)產(chǎn)品等活動的單位和個人，應當按照國家規(guī)定取得省科學技術行政部門頒發(fā)的《實驗動物使用許可證》。13、申報科研課題、鑒定科研成果、進行檢定檢驗和以實驗動物為原料或載體生產(chǎn)產(chǎn)品，應當把應用合格實驗動物和使用相應等級的動物實驗環(huán)境作為基本條件。14、 動物福利(animalwelfare)指為了保證動物在健康舒適的狀態(tài)下生存，而人為給動物提供的相應物質(zhì)條件和采用的行為方式，以保證動物處于生理和心理愉快的感受狀態(tài)。15、 實驗動物是具有明確遺傳背景并受嚴格遺傳控制的。屬于遺傳限定性動物。根據(jù)其遺傳特點的不同，將實驗動物分為不同的類別。同源突變近交系

近交系同源導入近交系

相同基因類型 分離近交系重組近交系雜交F1代不同基因類型封閉群(遠交群)16、 在動物分類學中，“種”(spcies)是動物分類的基本單位。同種動物能夠共同生活、交配并繁衍后代；異種動物之間存在種間隔離。品種是人們根據(jù)不同需要對動物進行改良、選擇，即定向培育，并具有某種特定外形和生物學特性的動物群體。實驗動物學分類的基本單位是品種(stock)、品系(strain)的概念。在同一物種中不同的品種品系不存在種間隔離的天然屏障。17、 實驗動物品種品系應具備的四個條件：a、相似的外貌特征；b、獨特的生物學特性；c、穩(wěn)定的遺傳性能；d、具有共同的遺傳來源和一定的遺傳結(jié)構(gòu)。18、 近交(selfinginbreeding)指任何血緣關系相近的個體間進行的交配，屬于基因型分離交配。在近交過程中，動物群體基因不斷地分離、純合，進而使動物群體的基因純合達到穩(wěn)定。近交系數(shù)(inbreedingcoefficient)是指群體中某個體通過遺傳攜帶兩個同源等位基因(同一基因的拷貝)的概率。因此，近交的遺傳效應就是減少雜合性，增加純合性，使每個個體都有一致的遺傳組成。19、 近交衰退(inbredinflationoffluctution)是近交過程中動物群體由于基因分離與純合將發(fā)生一系列不利于個體或群體發(fā)育的變化和現(xiàn)象稱為近交衰退。20、 近交衰退的表現(xiàn)：(1)由于有害隱性基因的純合，可能暴露出一些遺傳缺陷或某種疾病較高的發(fā)生率，這些特殊的生物學特征，在醫(yī)學領域非常重要。(2)出現(xiàn)如產(chǎn)仔數(shù)下降，母性不良等影響繁育的現(xiàn)象。(3)個體發(fā)育不如雜合子動物，對環(huán)境的適應性差，使得近交系動物在飼育上存在一定的難度。21、 一個近交系動物與非本品系的動物雜交引起的遺傳改變稱為遺傳污染。常由于人為因素造成。一旦發(fā)生遺傳污染，對于近交系來說將是影響巨大的，可能徹底改變其遺傳組成。22、 經(jīng)連續(xù)20代(或以上)的全同胞交配(或者親代與子代交配)培育而成，且品系內(nèi)所有個體都可追溯到起源于20代或以后代數(shù)的一對共同祖先的遺傳群體稱為近交系(InbredStrain)。近交系動物遺傳上的穩(wěn)定性歸因于遺傳純合程度高，不容易發(fā)生雜合基因分離，不受近交、選擇和遺傳漂變的影響。23、 近交系具有以下八個特征：①純合性(homozygosity)近交系動物經(jīng)20代以上近交后任何一個基因位點上純合子的概率高達98.6%，在它們的基因中沒有暗藏的隱性基因。品系內(nèi)個體相互交配不會出現(xiàn)性狀分離，因而也能繁殖出完全一致的純合子后代。②同基因性(isogenicity)指一個近交品系中任意兩個個體之間在遺傳上是同源的，品系內(nèi)所有動物個體都可追溯到一對共同祖先，同一品系內(nèi)基因型完全一致。③均一性(uniformity)由于近交系動物的基因型一致，同一品系內(nèi)的表型也是一致的，即任何可遺傳的生物學特征完全一致。④長期遺傳的穩(wěn)定性(Iongtermgeneticstability)近交系動物在遺傳上具有高度的穩(wěn)定性，雖然殘留雜合基因或突變會導致個體遺傳變異，但這種機率非常低。人為選擇不會改變品系動物的基因型。通過嚴格的遺傳控制，近交系動物各品系的遺傳特征可穩(wěn)定的世代相傳。5、可分辯性(identification)每個近交系都有各自特有的遺傳組成和生物學特性。通過遺傳檢測(生化位點法、皮膚移植法、毛色基因法和下頜骨測量法)，就可將混合在一起的兩個貌似近似的近交系分辨開來。6、個體性(individuality)每一個品系從物種的整個基因庫中只能獲得極少部分基因，這些基因的組合構(gòu)成了品系的遺傳組成。各個品系具有各自獨特的表型特征。這些遺傳和表型的獨特性使各個近交品系之間的差異相當大。 7、分布的廣泛性(internationaldistribution)8、背景資料的完整性(backgrounddata)24、 近交系動物的應用：在生理學、藥理學、毒理學、微生物學、免疫學、腫瘤學、遺傳學、實驗動物行為學等學科，使用近交系動物所作論文比例增加很快。近交系動物的使用極大地提高了科學實驗的正確性和重復性。①近交系動物的個體具有相同的遺傳組成和遺傳特性，對實驗反應極為一致，可以消除雜合遺傳因素對實驗結(jié)果的影響，因此在實驗中，只需使用少量的動物，即可得到非常規(guī)律的實驗結(jié)果。②近交系動物個體之間組織相容性抗原一致，異體移植不產(chǎn)生排斥反應，是組織細胞和腫瘤移植實驗中最為理想的材料。③近交系動物在近交中，隱性基因純合性狀得到暴露，產(chǎn)生明顯的生物學特點，如先天畸形、先天性糖尿病、高血壓、高腫瘤發(fā)病率、對某些因子敏感和耐受等，這些特點是醫(yī)學領域研究的理想材料。④多個近交系同時使用不僅可分析不同遺傳組成對某項實驗的不同反應與影響，還可觀察實驗結(jié)果是否具有普遍意義。25、 亞系(Substrain)：近交系亞系的分化是指一個近交系內(nèi)各個分支的動物之間，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)或十分可能存在遺傳差異。26、發(fā)生亞系分化的三種情況：1、在兄妹交配代數(shù)達40代以前形成的分支(即分支發(fā)生于F20到F40之間)；2、一個分支與其他分支分開繁殖超過100代；3、已發(fā)現(xiàn)一個分支與其他分支存在遺傳差異。27、 近交系實驗動物在國際上一般按以下原則進行命名：(1)一個或幾個英文大寫字母表示。如A、AKR、DBA(2)大寫英文字母加阿拉伯數(shù)字如C57BL、C3H近交代數(shù)是在品系符號后加括號寫上F及代數(shù)表示，如C3H(F130)表示C3H品系實驗動物連續(xù)近交繁殖130代。(4)亞系的命名是在品系名稱后加斜線號(/)，再加上數(shù)字或培育者與培育單位名稱縮寫。(5)某些技術上的處理，則應該用小寫英文字母作為相應的符號加以注明。(6)如果要說明攜帶或沒有攜帶某種垂直感染的病毒，在必要情況下可予以指明，在品系名稱后加連字號，再加大寫病毒符號，再加“+”或“-”符號。28、 雜交一代動物(F1代)是由兩個不同近交系動物之間雜交所獲得的第一代動物。雜交F1代動物不是一個品系或品種，因為它帶有許多雜合位點，進一步交配繁殖雜交二代(F2代)就會出現(xiàn)遺傳分離和基因重組，個體間的一致性也就隨之消失，不具有育種功能，不能自群繁殖成與雜交F1代相同基因型的動物。如果要生產(chǎn)雜種一代動物，只能維持兩個親本近交系的存在。作為親本近交品系的選擇主要取決于實驗研究對雜種一代遺傳組成的要求。在這個前提下，可以選擇遺傳上差異較大的品系進行雜交，以提高雜交優(yōu)勢的程度。由于雜交優(yōu)勢，雜交一代動物具有較強的生命力。雜交一代的遺傳組成均等地來自兩個親本品系，即：每個位點上的兩個等位基因分別來自母系和父系。如果親本品系之間某位點上的基因相同，則雜交一代在這個位點上就為純合基因；相反，如果不相同，則為雜合基因。盡管雜交一代攜帶有許多雜合位點，但其個體在遺傳上和表型上是高度一致的。29、 雜交一代的特征與應用：(1)遺傳和表型上的一致性雖然它的基因不是純合子，但基因是整齊一致的，表型一致，遺傳性穩(wěn)定，就某些生物學特征而言，雜種一代比近交系動物具有更高的一致性，不容易受環(huán)境因素變化的影響，廣泛地適用于營養(yǎng)、藥物、病原和激素的生物評估。(2)雜交優(yōu)勢雜交一代具有較強的生命力，對疾病的抵抗力強，壽命較長，繁殖旺盛，克服了品系的近交繁殖所引起的各種近交衰退現(xiàn)象。容易飼養(yǎng)，適合于攜帶保存某些有害基因，長時間慢性致死實驗，也可作為代乳動物以及卵、胚胎和卵巢移植的受體。(3)對各種實驗結(jié)果重復性好。(4)同時具有兩個親本品系的特點。雜交一代的遺傳物質(zhì)均等地來源于兩個親本近交系，可接受兩個親本品系的細胞、組織、器官和腫瘤移植。適用于免疫學和發(fā)育生物學等領域的研究。(5)國際上分布廣。(6)作為某些疾病研究的模型。(7)細胞動力學研究。30、 在一個無限大的隨機交配群體中，如果沒有突變，選擇和遷移等因素的作用，則每代的基因頻率和基因型頻率保持不變。群體一旦具有世代恒定不變基因頻率和基因型頻率，就稱為Hardy-weinberg(哈迪-溫伯格)平衡群體。31、 把基因頻率認為是描述群體遺傳組成的基本參數(shù)。基因頻率是一個位點上各個等位基因所占的比例。通常用百分率或小數(shù)來表示。32、 影響平衡的因素：隨機遺傳漂移(2)近親交配(3)遷移(4)突變(5)選擇

33、 封閉群動物(closedcolony)以非近親交配方式進行繁殖生產(chǎn)的實驗動物種群，在不從外部引入新個體的條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上，稱為一個封閉群，或叫遠交群。34、 封閉群動物特征及應用：1、封閉群動物的遺傳組成具有很高的雜合性，因此在遺傳學上可作為選擇實驗的基礎群體，用于對某些性狀遺傳力的研究。2、封閉群可攜帶大量的隱性有害突變基因，可用于估計群體對自發(fā)和誘發(fā)突變的遺傳負荷能力。所攜帶的突變基因通常導致動物在某些方面的異常，從而可成為生理學、胎胚學和醫(yī)學研究的模型。3、封閉群具有類似于人類群體遺傳異質(zhì)性的遺傳組成，因此在人類遺傳研究、藥物篩選和毒性試驗等方面起著不可替代的作用。4、封閉群避免了近交，從而避免了近交衰退的現(xiàn)象。繁殖力和生活力都較強，表現(xiàn)為每胎產(chǎn)仔多，胎間隔短，仔鼠死亡率低、生長快、成熟早，對疾病抵抗力強，壽命長、生產(chǎn)成本低等優(yōu)點。因而廣泛應用于預試驗、學生教學等實驗中。常用方法形態(tài)學生物化學免疫學35、 實驗動物遺傳監(jiān)測的目的常用方法形態(tài)學生物化學免疫學毛色基因測試法生化標記檢測法免疫標記檢測法皮膚移植法混合淋巴細胞培養(yǎng)法腫瘤移植法血清反應法等細胞遺傳學染色體帶型(C帶G帶)數(shù)量遺傳學下頜骨測定法生物學特性監(jiān)測法36、 動物性狀的表現(xiàn)決定于多種因素，主要是遺傳因素和環(huán)境因素的綜合結(jié)果。遺傳基因是決定生物性狀的物質(zhì)基礎，但在個體發(fā)育中，基因作用的表現(xiàn)離不開環(huán)境的影響。一個性狀的正常表現(xiàn)不僅需要完善的一組基因，而且需要正常的環(huán)境。37、 實驗動物的環(huán)境是指圍繞實驗動物客觀事物的總和，主要包括外環(huán)境和內(nèi)環(huán)境兩大部分。外環(huán)境主要是實驗動物飼育和實驗場所外的周圍環(huán)境。內(nèi)環(huán)境主要是指實驗動物飼育和實驗場所內(nèi)的環(huán)境。38、 實驗動物環(huán)境因素可分為五個方面：(1)氣候因素：溫度、濕度、氣流、風速等。理化因素：氧、二氧化碳、粉塵、臭味、噪音、照度、殺蟲劑、消毒劑、有害化學物質(zhì)等。居住因素：房屋、飼養(yǎng)籠具、墊料、給食器、供水器等。營養(yǎng)因素：飼料、水、蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)、維生素等。生物因素：動物飼養(yǎng)密度、微生物、與人和其它動物的關系。39、 溫度對實驗動物的影響：環(huán)境溫度可影響動物的生殖機能。環(huán)境溫度可影響動物機體的抵抗力。環(huán)境溫度可影響動物的臟器重量。環(huán)境溫度可影響動物的新陳代謝。環(huán)境溫度可影響動物的實驗反應性。暴露在高溫或低溫環(huán)境下的動物，對其神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)以及各種酶活性的亢進或抑制等均有影響。40、 實驗動物設施(laboratoryanimalfacility,LAF)是進行實驗動物飼養(yǎng)、保種維持、生產(chǎn)、實驗研究、試驗等設施的總稱。包括實驗動物繁育、生產(chǎn)設施和動物實驗設施。41、 實驗動物設施根據(jù)對飼養(yǎng)動物的微生物控制程度和空氣凈化程度分為隔離環(huán)境、屏障環(huán)境和開放環(huán)境三類。隔離環(huán)境(islationsystem)是以隔離器及其他附屬裝置所組成的飼養(yǎng)系統(tǒng)。該設施采用無菌隔離裝置以保存無菌或外來無污染動物。屏障環(huán)境(barriersystem)是標準動物飼養(yǎng)室和動物試驗室用的最多的一種環(huán)境設施系統(tǒng)。是用來飼養(yǎng)清潔級、SPF級動物和做清潔級和SPF級動物各種試驗的主要設施。普通環(huán)境(opensystem)是飼養(yǎng)普通動物的設施。這類設施也要能適合實驗動物居住的基本要求。它并非不需要進行嚴格的環(huán)境控制和積極的微生物控制，只是不似屏障系統(tǒng)那樣嚴格，變動范圍較大，且不能控制傳染因子。普通環(huán)境設施只適用于飼養(yǎng)教學等用途的普通級實驗動物。一些大動物的科學研究目前仍可在普通設施中進行。42、 實驗動物的營養(yǎng)和飼料直接影響動物的生長發(fā)育、繁殖以及對疾病的抵抗力。只有良好的營養(yǎng)才能使動物保持良好的健康狀態(tài)，只有健康狀況良好的實驗動物才能保證實驗結(jié)果的可靠性。各種動物的食性不同，對飼料的要求也不同；同種動物不同品系對營養(yǎng)的需求也不同。同一品種動物，在不同生長期對營養(yǎng)的需求也不同。幼年、妊娠、哺乳期的動物地營養(yǎng)的需要量高，而成年期、老年期需要量低。所以實驗動物的營養(yǎng)供給要根據(jù)需要，日糧要合理配制。43、 實驗動物需要的主要營養(yǎng)成分：1、蛋白質(zhì)；2、脂肪；3、碳水化合物：4、無機鹽；5、維生素。44、 實驗動物營養(yǎng)需要是指為滿足動物維持正常生長和繁殖所需各種養(yǎng)分的基本需要。指每天每只動物對能量(energy)、蛋白質(zhì)(protein)、礦物質(zhì)(mineral)和維生素(vitamin)等的需要量。由兩部分組成，即維持動物正常體溫、呼吸、心跳、基礎代謝等各項基本生命活動及滿足動物隨意活動的需要，即維持需要(maintenancerequirement)；供動物的生長、妊娠、泌乳、產(chǎn)肉、產(chǎn)蛋等生產(chǎn)活動的需要，即生產(chǎn)需要(productionrequirement)o45、 飼料是實驗動物飼養(yǎng)的物質(zhì)基礎，約占整個生產(chǎn)費用的70％左右。因此，了解飼料的類型和營養(yǎng)特點，合理利用飼料資源，對實驗動物的飼養(yǎng)具有重要意義。飼料是指一切可供動物采食，對動物無毒無害的物質(zhì)。按飼料的營養(yǎng)特性分為粗飼料、青綠飼料、青貯飼料、能量飼料、蛋白飼料、礦物質(zhì)飼料、維生素飼料和添加劑八大類。46、 配合飼料的分類：1、按營養(yǎng)成分分：全價配合飼料：全日糧配合飼料。含有的各種營養(yǎng)物質(zhì)和能量均衡全面，能夠滿足動物的各種營養(yǎng)需要，不需添加任何成分就可以直接飼喂，并能獲得最大的經(jīng)濟效益。②混合飼料；③濃縮飼料；④添加劑預混料；⑤代乳飼料；2、按照飼料的物理性狀分：①粉狀飼料；②顆粒飼料；③膨化飼料；④液體飼料；47、 飼料的消毒方法：(1)干熱消毒法(2)高溫高壓滅菌法(3)藥物熏蒸滅菌法(4)射線照射滅菌法48、 營養(yǎng)因素對動物實驗結(jié)果的影響對動物采食量的影響 實驗動物是為能而食，其采食量以達到對能量的需求量為標準。實驗動物飼料的原料組成影響飼料的能量濃度，因此，必然影響動物的采食量，而動物采食量的多少又對某些實驗的結(jié)果產(chǎn)生影響。在給藥時，要考慮到飼料的情況和動物的采食量，以保證動物能夠攝人所需的藥量，達到實驗目的。2．對動物生長發(fā)育的影響 動物的生長情況與飼料中所含營養(yǎng)素是否全面，是否充足與平衡，有毒有害成分的多少，適口性如何，甚至與飼料的軟硬程度等有著直接的關系。動物的生長情況，包括體重增長情況、體型和組織器官的發(fā)育等，能夠很直觀地反映出飼料質(zhì)量的好壞。3．對動物生理生化指標的影響飼料中的營養(yǎng)素經(jīng)過動物的消化、吸收對動物的生理狀態(tài)產(chǎn)生影響。當飼料中的某種營養(yǎng)素含量發(fā)生改變時，必然導致動物血液、某些臟器及組織中該種營養(yǎng)素含量的改變，并對與之相關的生理生化指標造成影響。4．對動物免疫功能的影響動物的營養(yǎng)狀況的好壞影響動物的健康狀況，也必然會對其免疫系統(tǒng)和機能產(chǎn)生影響。5．對動物疾病的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸的影響 某些營養(yǎng)因素與癌、心血管病等非傳染性疾病關系密切，營養(yǎng)對這些方面的研究有著直接的影響。6．對動物麻醉反應的影響 據(jù)報道，采食全價營養(yǎng)顆粒料的家兔在麻藥注射后約10min,絕大部分反射雖遭到不同程度的抑制，但眼球活動，瞳孔的大小與麻醉前無顯著變化，且手術后復蘇快。而采食營養(yǎng)失衡飼料的家兔，在麻藥注射后10min左右，絕大多數(shù)都處于深度的抑制狀態(tài)。7．飼料中其它因素的影響 抗營養(yǎng)因子、毒素或農(nóng)藥殘留、重金屬污染等均可造成對研究結(jié)果產(chǎn)生直接、間接的影響。49、 人類疾病的動物模型(AnimalModelofHumanDiseases)是指醫(yī)學研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物實驗對象和相關材料。50、 動物模型的作用：動物模型在實驗中有雙重作用，它既是研究的對象，又是研究的手段，在闡明人類疾病的機理、預防及治療等一系列的研究中起重要作用。研究人類疾病的病因病機、發(fā)展規(guī)律。檢驗比較各種治療方法的療效。探求新的治療手段，研制開發(fā)新藥。研究藥物體內(nèi)過程及作用機理，指導安全用藥。51、 人類疾病動物模型的優(yōu)越性及其特點：避免在人體上直接實驗所造成危險臨床上平時不易見的疾病可以隨時復制可提供發(fā)病率低、潛伏期長和病程長的疾病材料增加方法學和實驗材料的可比性樣品易得，實驗方法簡化有助于了解疾病的本質(zhì)52、 動物模型的特點：①與人類疾病的相似性：這一特點是模型具有實用價值的基礎，也就是說，判定動物模型使用價值的大小，要依據(jù)動物所表現(xiàn)的病態(tài)與人的病理變化相比較的結(jié)果。兩者越相似，則研究結(jié)果越可信。普遍適用性：骨質(zhì)疏松癥動物模型研究該病病因、病機、組織形態(tài)結(jié)構(gòu)、生化指標、骨生物力學特征等內(nèi)容，又能篩選新藥、驗證藥物療效。典型性：在建立模型時，可人為地控制一些條件，突出地表現(xiàn)出疾病的主要矛盾加以研究。可重復性和可靠性：動物模型一經(jīng)建立，其他學者即能根據(jù)文獻報道的方法復制出來，有利于眾多學者同時研究一種疾病；而且可以在大量動物身上同時進行，保證所得結(jié)果相對可靠。特殊性：當科研中需要進行特殊項目尤其滿足對機體有害因素的研究時，只有動物模型才能擔當此任。可發(fā)展性：一種疾病的動物模型不是一成不變的，隨著人們對疾病認識的深入和實驗技術的更新，造模的思路和辦法也會不斷變化，逐漸走向完善。不足之處：1、簡單化：雖然單因素造模具有便于因果分析等優(yōu)點，但疾病發(fā)牛發(fā)展受多種因素的影響，這些綜合因素不可能在動物身上完復制出來，更何況有些因素如不嗜好、心理變化等無法在動物身上體現(xiàn)。2、不確定性：日前一種病病往往有多種造模方法并存，但不同的造模方法反映不同的病理機制。3、指標的模糊性。各種模型選擇的指標不盡相同，有些差別很大。但疾病表現(xiàn)有一定共性，指標的不特異性會導致4、對疾病表現(xiàn)、藥物作用等機理認識的多種多樣。5、物種差異：動物與人種屬不同，生物學特征存在許多差異，對藥物反應也不同。53、人類疾病動物模型設計原則及分類設計原則：1.相似性2.重復性3.可靠性4.適用性5.可控性6.易行性和經(jīng)濟性分類：按產(chǎn)生原因分類：自發(fā)性動物模型、誘發(fā)性物模型、生物醫(yī)學動物模型、抗型動物模型。按系統(tǒng)范圍分類：疾病的基本病理過程動物模型、各系統(tǒng)疾病動物模型。按模型對象分類：整體動物、離體器官和組織、細胞株和數(shù)學模型疾病模型。按中醫(yī)藥體系分類：陰虛、陽虛、氣虛、血虛、脾虛和腎虛動物模型、厥脫證動物模型等。54、 自發(fā)性動物模型(SpontaneousAnimalModels)是指實驗動物未經(jīng)任何有意識的人工處置，在自然情況下所發(fā)生的疾病。包括突變系的遺傳疾病和近交系的腫瘤疾病模型。免疫缺陷性動物疾病模型：裸鼠、CBA/A小鼠、SCID小鼠自發(fā)腫瘤疾病動物模型：幾乎所有人類腫瘤都可在動物中找到遺傳性高血壓大鼠疾病模型：SHR大鼠自發(fā)糖尿病動物模型：KK小鼠、BBWistar大鼠、NIH肥胖大鼠癲癇動物模型：55、 誘發(fā)性動物模型(DerivationalAnimalModels)又稱為實驗性動物模型(ExperimentalAnimalModels)：指通過物理、化學、生物、復合及生物技術因素作用于動物復制疾病模型。致病因素作用于動物，造成動物組織、器官或全身一定的損害，出現(xiàn)某些類似人類疾病時的功能、代謝或形態(tài)結(jié)構(gòu)方面的病變，或使動物患相應的傳染病，即人為地誘發(fā)動物產(chǎn)生類似人類疾病模型。56、誘發(fā)性疾病動物模型特點：誘發(fā)性疾病動物模型制作方法比較簡單、實驗條件易控制、復制的模型符合研究目的。具有能在短時間內(nèi)復制出大量疾病模型，因而為近代醫(yī)學研究所常用，特別適用于藥物篩選研究工作。但誘發(fā)模型和自然產(chǎn)生的疾病模型在某些方面畢竟存在一定差異。而且，有些疾病動物模型不能用人工的方法誘發(fā)成功。必須指出：以上兩種動物模型各有其優(yōu)缺點。事實上很多疾病可用不同方式獲得。例如已知有不少自發(fā)性腫瘤模型，也可用各種致癌劑誘發(fā)產(chǎn)生腫瘤模型。值得注意的是它們在發(fā)病機理和疾病內(nèi)在特征方面存在著各自的特點。如自發(fā)性腫瘤和誘發(fā)性腫瘤對藥物的敏感性有明顯區(qū)別。此外，大部分自發(fā)性動物模型是通過人為定向培育而成的，畢竟不同于人類自然發(fā)病情況，因此，自發(fā)和誘發(fā)模型所具有的優(yōu)缺點只是相對的。對使用者來說，最重要的是所選擇的模型究竟能否達到研究目的。57、病原的感染性：感染性疾病特性之一是疾病因明確的病原引起，包括病毒、細菌和寄生蟲等生物體感染機體，導致疾病發(fā)生。因此，動物模型的研究，關鍵點是病原對動物的致病性問題，也就是說，動物能不能被病原感染、復制、模擬出全部或部分疾病特征的問題。58、感染的機制：一般來講，病原進化伴隨著宿主或動物同時進化，因此，形成了相互依存、共處、排斥等關系，這種關系表現(xiàn)為共生關系、機體損傷（疾病）、病原不能存活等情況。病原依據(jù)種類和生物學特性不同，分為體外寄生感染，器官、組織內(nèi)感染（包括血液）和細胞內(nèi)感染幾種形式，因此，感染的機制明顯不同，對感染動物宿主特異性選擇要求也不同。59、特異性受體：一般依寄生蟲、細菌和病毒的順序特異性增強趨勢，特別是病毒性病原，其感染往往通過特異性受體進入細胞，而受體的進化在不同動物體內(nèi)變化程度有時并不隨動物種類近似而接近，因此，給動物模型的制備帶來了不確定性和復雜性，這也是目前有些病原沒有理想的動物模型的原因之一。60、動物的感染性（敏感性）：由于各種動物遺傳構(gòu)成和生物學特性既有相似的一面又有不同的一面，也使得遺傳距離大的動物作為感染病模型成為了可能。因而，感染性動物模型研究，特別是新發(fā)感染性疾病病原，面臨的第一個問題是動物的感染性的問題，往往通過大量不同種類動物的測試、篩選，才能研制出較為理想的模型。61、感染性疾病動物模型：是以導致感染性疾病的病原感染動物，或人工導入病原遺傳物質(zhì)，使動物發(fā)生和人類相同疾病、類似疾病、部分疾病改變或機體對病原產(chǎn)生反應，為疾病系統(tǒng)研究、比較醫(yī)學研究以及抗病原藥物和疫苗等研制、篩選和評價提供的模式動物。62、病原性動物模型包括三個要素：確切的病原、明確的動物和充分的實驗室指標。63、除了動物模型制備的一般原則外，病原性動物模型的制備、建立重點要求以下原則：1.動物選擇原則：即從動物的種類、遺傳分類、生物學特性和對感染性疾病的病原的敏感性等方面選擇動物。由于感染性疾病病原非常復雜，有些實驗動物感染性不強或不能被感染，或新發(fā)感染性疾病病原情況不明時，可供模型制備的動物可擴大到實驗用動物（經(jīng)濟動物和野生動物）。在病原敏感性相同或接近情況下，動物選擇的優(yōu)先順序應該是首選實驗動物、其次為經(jīng)濟動物、野生動物。病原選擇原則：從感染性疾病病原標準株、代表株、強勢病原、活化狀態(tài)等方面選擇病原。由于病原是活性生命體，尤其病毒性病原體，非常容易失活，模型制備使用的病原應該處于活化狀態(tài)最好的病原。導致相同感染性疾病的病原在不同地區(qū)存在差異，致病性也會不同，因此，應該選擇生物學特性明確的經(jīng)鑒定的標準株進行模型感染研究，以確保得到的疾病模型保持最高真實性。疾病再現(xiàn)最大化原則：制備的感染性疾病動物模型能最大程度的擬似疾病臨床表現(xiàn)、疾病過程、病理生理學變化、免疫學反應等疾病特征。這種最大化原則可以是全部完整的擬似，也可以是部分體現(xiàn)。標準化、規(guī)范化原則：模型制備涉及的動物、病原、實驗控制、操作程序、標本處理、數(shù)據(jù)采集、檢測指標和結(jié)果分析應該到達統(tǒng)一、規(guī)范和標準化要求，可實現(xiàn)模型重復性好，檢測指標穩(wěn)定，利于客觀、公正和真實的應用。標準化強調(diào)制備模型中的各種技術、劑量和檢測標準應該固定使用，利于模型的穩(wěn)定重現(xiàn)，因此和病原試驗性研究、探索性研究不同。生物安全原則：在病原性動物模型制備過程中，避免經(jīng)病源污染、動物接觸、污物擴散、樣本采集、意外事件等任何途徑導致實驗室對人員和環(huán)境的生物危害發(fā)生，嚴格按照國家關于病原微生物相關規(guī)定進行。病原微生物的實驗室活動必須按照病原危害等級和防護要求進行。64、感染性疾病動物模型制備的技術和操作規(guī)范動物規(guī)范化2.病原規(guī)范化3.傳染病疾病過程研究規(guī)范化4.傳播途徑研究規(guī)范化5.病原感染劑量研究規(guī)范化6.動物模型的臨床研究規(guī)范化7.感染性疾病病原學研究規(guī)范化8.感染性疾病免疫學研究規(guī)范化9.感染性疾病病理生理學研究規(guī)范化10.藥物、疫苗研究規(guī)范化65、感染性疾病動模型制備的一般方法：選用標準化感染性病原，確定一定劑量，經(jīng)不同途徑感染候選動物，觀察特征性臨床表現(xiàn)，檢測特異性病原學指標、病理生理性指標和免疫學指標以及其他輔助性指標，評價、明確模型類型，綜合評價模型的應用程度、范圍和比較醫(yī)學用途等。66、感染性疾病動物模型：（一）、禽流感動物模型（二）、艾滋病動物模型（三）、結(jié)核病動物模型（四）、肝炎（甲、乙、丙型）動物模型（五）、皰疹病毒感染動物模型（六）、巨細胞病毒感染動物模型（七）、輪狀病毒感染動物模型（八）、漢坦病毒感染動物模型、登革熱病毒感染動物模型(十)、狂犬病動物模型67、免疫缺陷動物(immunodeficientanimal)是指由于先天性遺傳突變或用人工方法造成一種或多種免疫系統(tǒng)組成成分缺陷的動物。裸大鼠主要特征：a、純合子裸大鼠(rnu/rnu)具有與裸小鼠基本相似的特征，無胸腺，缺乏功能性T淋巴細胞，B細胞功能基本正常，NK細胞活力增強。b、裸大鼠并不像裸小鼠一樣完全無毛，而是體毛稀少，頭部、四肢及尾根往往多毛。新生仔鼠中純合體與雜合體的鑒別主要以觸須的多少為據(jù)。C、發(fā)育遲緩,體重為正常大鼠的70%，2-6周齡皮膚上有棕色鱗片狀物，隨后變得光滑。D、 繁殖能力差，乳腺發(fā)育缺損，繁殖方法與裸小鼠相同。E、 裸大鼠較裸小鼠對多種傳染病更敏感，易患呼吸道疾病。潰瘍性氣管支氣管炎及化膿性支氣管肺炎。可能與仙臺病毒有關。F、 比裸小鼠更強壯、壽命更長。應用：1、 主要用于人體腫瘤移植研究，裸大鼠同樣能接受人類正常組織和腫瘤的異種移植(人結(jié)腸癌)，大多能自發(fā)消退。2、 因其體型大，用一只裸大鼠可為常規(guī)血液學和血清生物化學分析實驗提供足夠的血樣，也可為各種研究提供足夠的瘤組織，3、 易于進行外科手術，為各部位腫瘤移植和腫瘤供血研究提供方便68、69、自發(fā)性腫瘤模型(animalmodelsofspontaneoustumor)實驗動物未經(jīng)任何有意識的人工處置，在自然情況下所發(fā)生的腫瘤。特點：自發(fā)性腫瘤發(fā)生的類型和發(fā)病率均隨實驗動物的品種、品系等不同而不同。也與動物的健康狀況、飼育環(huán)境及營養(yǎng)等因素有關定向培育，以近交系小鼠最為常用，高發(fā)病率的動物模型作為研究對象，低發(fā)病率動物模型作對照。優(yōu)點—與人類腫瘤更相似。再現(xiàn)了腫瘤發(fā)生率和腫瘤發(fā)生、發(fā)展的全過程，便于統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)致癌原因。缺點—腫瘤發(fā)生從時間上參差不齊，較難在短時間內(nèi)獲得大量病程相似的腫瘤學材料，腫瘤生長速度慢，實驗周期長，耗費大，較少用于藥效學研究。70、誘發(fā)性腫瘤模型(animalmodelsofinducedtumor)使用致癌因素(化學、物理和生物等)，在實驗條件下誘發(fā)動物發(fā)生腫瘤的動物模型。應用于腫瘤病因?qū)W、遺傳學、生物學特性以及實驗性治療等方面。大鼠是誘癌模型中最常用的動物。誘發(fā)腫瘤模型特點：制作方法簡單，較易人為控制，容易操作；癌變率高，惡性程度相對也高，基本模擬癌變發(fā)生過程，腫瘤組織易建立腫瘤細胞系和移植性腫瘤模型；發(fā)病機制和疾病的內(nèi)在特征與自然產(chǎn)生的腫瘤模型有所不同。不足：誘發(fā)癌的過程長，個體的潛伏期差異很大，不易獲取病程或瘤塊大小較均一的動物。時間長，成功率不能達到100%。腫瘤細胞形態(tài)特征變化大，且可誘發(fā)多部位腫瘤。環(huán)境保護的日益重視，限制其應用。不適合作抗癌藥物篩選模型。適合做病因?qū)W研究。71、移植性腫瘤模型(animalmodelsoftransplantationtumor)移植性腫瘤動物模型是指將動物或人體腫瘤移植到同種或異種動物連續(xù)傳代而培養(yǎng)出的模型。腫瘤移植于健康動物，相當于活體組織培養(yǎng)，可長期保留瘤種，供實驗所用。目前臨床抗腫瘤藥物篩選的動物模型。優(yōu)點：一群動物同時接種同樣量的瘤細胞，生長速度比較一致，個體差異較小，接種成活率近100%，對宿主的影響類似，易于客觀判斷療效，可連續(xù)傳代，試驗周期較短，試驗條件易于控制等。常見移植模型：人肝癌、胰腺癌原位移植動物；人胃癌、肺癌裸鼠原位移植；可移植性小鼠原位膀胱癌。移植模型的特點：1）腫瘤最初大多是誘發(fā)或自發(fā)性腫瘤，經(jīng)不斷移植而形成特定的動物模型。2）通常是接種一定數(shù)量的腫瘤細胞，使一群動物在幾乎相同的時間內(nèi)患同樣的腫瘤，其成功率接近100％。3）腫瘤形態(tài)、生長率、死亡時間等非常相近。4） 生長較迅速，倍增時間短，對抗癌藥物的敏感性較高。5）由于生長速度遠比癌腫病人的發(fā)展速度快，且轉(zhuǎn)移率較低，因此，作為篩選模型有它固有的不足。移植三大要素：實驗動物的選擇：品種、年齡、性別；移植瘤的選擇：成功率、生長速度；移植部位和途徑原位移植：原發(fā)部位組織器官，肺癌、胃癌肝癌、腸癌、乳腺癌等異位移植：常用部位皮下（頸背部，腋下），肌肉、腎包膜、腦內(nèi)、腹水瘤72、 轉(zhuǎn)基因動物腫瘤模型Tumormodels：通過指重組DNA技術將外源腫瘤基因或相關基因?qū)雱游锶旧w基因組，使之穩(wěn)定表達并能遺傳給后代的一類腫瘤動物模型。方法：顯微注射法、精子載體法、電轉(zhuǎn)移、胚胎干細胞移植法、反轉(zhuǎn)錄病毒感染法、人工酵母染色體法等。轉(zhuǎn)基因動物腫瘤模型以小鼠為主：遺傳背景明確、微生物控制標準、實驗周期短、轉(zhuǎn)基因技術成熟。73、 轉(zhuǎn)基因動物（Transgenicanimals）是通過實驗手段將新的遺傳物質(zhì)導入動物胚胎細胞中，并能穩(wěn)定遺傳，由此獲得的動物。整合到動物染色體基因組的外源基因被稱作轉(zhuǎn)基因（transgene）。基本原理：將改建后的目的基因或基因組片段用顯微注射等方法注入實驗動物的受精卵（fertilizedeggs）或著床前胚胎細胞，然后將此受精卵再植入受體動物的輸卵管或子宮中，使其發(fā)育成攜帶有外源基因的轉(zhuǎn)基因動物（嵌合體動物）。74、 轉(zhuǎn)基因小鼠的建立受精卵雄原核注射方法（顯微注射法）：其他方法：胚胎干細胞（ES細胞）法：小鼠體細胞克隆法：逆轉(zhuǎn)錄病毒載體介導法：精子載體導入法：用顯微注射法制備轉(zhuǎn)基因小鼠有兩個主要的技術環(huán)節(jié)：轉(zhuǎn)基因構(gòu)件和受精卵雄原核的顯微注射技術。1、設計轉(zhuǎn)基因構(gòu)件想要獲得一個轉(zhuǎn)基因小鼠，首先要構(gòu)建一個轉(zhuǎn)基因構(gòu)件，一個完整的轉(zhuǎn)基因構(gòu)件包括目的基因、啟動子、加強子和標記基因或報告基因。在轉(zhuǎn)基因構(gòu)件設計上還要考慮原核載體序列的影響。2、動物操作：采取受精卵(僅介紹常用的誘發(fā)排卵法)向受精卵雄原核注入DNA溶液胚胎轉(zhuǎn)移導入基因的鑒定此方法的優(yōu)點：⑴外源基因在宿主染色體上的整合率較高；⑵導入外源基因時無需載體；⑶60%-80%的轉(zhuǎn)基因小鼠子代中，外源基因分布在所有的組織和細胞中；⑷導入的外源基因可長達50kb。缺點：⑴外源基因的整合是隨機的，整合率不能控制；⑵有些動物的原核看不清楚，如豬、山羊等，需經(jīng)特殊處理才能有效導入；⑶需要較精密的儀器，費用昂貴。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體法:逆轉(zhuǎn)錄病毒的CDNA具有能整合到宿主細胞染色體內(nèi)的特點,以逆轉(zhuǎn)錄病毒為載體，通過轉(zhuǎn)染的方式實現(xiàn)外源基因的轉(zhuǎn)移。這種方法簡單，不需要顯微操作儀。但逆轉(zhuǎn)錄病毒的構(gòu)件較復雜，容納外源基因的量有限，獲得的第一代動物均為嵌合體動物，而且病毒載體序列可能干擾目的基因的表達。在培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因禽類時應用較多。胚胎干細胞導入法：胚胎干細胞也稱ES細胞(Embryostemcell),是從著床前囊胚內(nèi)細胞團中分離到的具有多潛能性和體外增殖特點的細胞。由于ES細胞可分化發(fā)育成不同的組織細胞，產(chǎn)生不同的功能作用，故廣泛用于胚胎發(fā)育和胚胎工程方面的研究。如于培養(yǎng)基中加入不同的分化因子，定向誘導可分化發(fā)育成心肌細胞、免疫細胞、神經(jīng)細胞等。精子載體法：將外源DNA與精子一起孵育，精子可捕獲外源DNA，并通過受精過程將外源DNA導入受精卵的方法。此方法在小鼠身上尚未獲得成功，仍處在完善和發(fā)展階段。75、基因敲出技術：是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術基因敲除(knock-out)又稱基因打靶，指應用一段與胚胎干細胞染色體上的一段序列具有高度同源性的滅活外源DNA，通過同源重組取代原有目的基因，使靶基因在動物個體中的活性完全消除，來觀察靶基因失活、不表達的情況下會對動物個體產(chǎn)生哪些影響。基本原理：滅活基因電穿札艷徹謝t體外ES細胞同源現(xiàn)蘭葺基因定點滅活的細胞品階射小鼠囊胚肝胎移播假孕鼠子宮內(nèi)嵌善體小鼠選擇培育基因剔除小鼠技術路線：應用DNA同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段基因同源重組條件性基因敲出誘導性基因敲出隨機插入突變進行基因敲出RNAi引起的基因沉默76、 轉(zhuǎn)基因動物，尤其是小鼠，已經(jīng)廣泛應用于建造人類各種疾病模型轉(zhuǎn)基因小鼠模型的制作，應用DNA受精卵雄核顯微注射的方法；基因敲出技術是第二種最普遍使用的方法，使用同源染色體重組的胚胎干細胞法。77、 基因工程動物模型的局限性基因工程小鼠作為模型來研究許多人類代謝性疾病以及復雜病因的疾病，已經(jīng)成為研究的熱點；但在某些情況下，基因工程小鼠僅復制出人類疾病的部分癥狀，或復制的癥狀比人類更嚴重，或根本沒有臨床表現(xiàn)。78、 動物實驗之前，必須對實驗動物進行隨機分組和編號標記（一） .隨機分組：按照完全隨機化設計類型進行隨機分組常用隨機數(shù)字表進行隨機分組（二） 實驗動物分組后，為了區(qū)分、觀察并記錄每個個體的反應情況，必須給每只動物進行編號標記。1.體表顏料著色法：大小鼠2.個體耳號標記法3.個體斷趾標記法4.籠子編號法：不在動物身上做標記而把裝動物的籠子進行編號，也叫替代法5.烙印法：大中性動物6.號牌法：耳朵或頸項部：大中性動物79、 動物安樂死方法頸椎脫臼法：小鼠、大鼠放血法：心臟放血或大血管放血，導致急性大出血休克死亡，兔、貓、犬。大小鼠斷頭或摘眼球放血。過量麻醉致死法：快速過量注射非揮發(fā)性麻醉劑（25-30倍）或吸入過量揮發(fā)性麻醉劑，使中樞神經(jīng)過度抑制而死亡，豚鼠和家兔。CO2處死法：吸入大量的C02氣體中毒死亡。中小型動物。80、 給藥途徑與方法：在動物實驗過程中，應根據(jù)不同的實驗目的、動物種類、藥物類型來決定動物的給藥途徑與方法。動物的給藥方法主要分為注射法和投入法兩種，不同方法按給藥途徑又分為很多具體類型。注射法：皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、腦膜下注射、腦內(nèi)注射、胸腔內(nèi)注射、腰椎內(nèi)注射、靜脈注射、關節(jié)腔注射和心內(nèi)注射。投入法：口服法，灌胃，鼻腔內(nèi)，灌腸、氣管插入81、 麻醉（anesthesia）：用藥物或其他方法使動物整體或局部暫時失去感覺，以達到無痛的目的進行手術治療或?qū)嶒炋幚怼ｆ?zhèn)靜、催眠、鎮(zhèn)痛、肌松、抑制有害刺激反應等目的：消除實驗過程中動物的疼痛和緊張感覺，使動物保持安靜，保障實驗動物的安全，使動物在實驗過程中服從操作，確保實驗順利進行。鎮(zhèn)痛(acesodyne)：緩解或消除疼痛，是麻醉的組成部分。局部麻醉劑普魯卡因(procaine)：浸潤麻醉，無刺激性，毒性小，見效快，0.5%-1%,1-3min產(chǎn)生麻醉，維持30-45min利多卡因(lidocaine)：大動物神經(jīng)干阻滯麻醉，組織穿透性好，見效快，1%-2%，效力和穿透力比普魯卡因強2倍，維持時間長，0.25%-05%也可作局部浸潤麻醉。丁卡因(tetracaine)：與普魯卡因相似，穿透粘膜，作用迅速，1-3min發(fā)生作用，持續(xù)60-90min全身麻醉劑揮發(fā)性麻醉劑：乙醚、安氟醚、三氟乙烷，異氟烷非揮發(fā)性麻醉劑：戊巴比妥鈉、苯巴比妥鈉、硫噴妥鈉等巴比妥類的衍生物，氯胺酮，烏拉坦，水合氯醛中藥麻醉劑：洋金花和氫溴酸東莨菪堿(少用)麻醉注意事項麻醉前禁食：8—12h，防止嘔吐，可飲水配置的藥物濃度：適中，犬3%-6%戊巴比妥鈉0.5-1ml/kg，不可過高，以免麻醉過急；但也不能過低，以減少注入溶液的體積麻醉劑用量：參照標準，考慮個體對藥物的耐受性(4)注意控制靜脈注射速度：緩慢推注2/3劑量后，同時觀察肌肉緊張性、角膜反射和對皮膚夾捏的反應，當這些活動明顯減弱或消失時，立即停止注射。(5)動物在麻醉期體溫容易下降，要采取保溫措施；在寒冷季節(jié)做慢性實驗時，麻醉劑在注射前應加熱至動物體溫水平(6)控制麻醉深度:動物實驗麻醉深度適82、 動物實驗是根據(jù)研究目的，恰當?shù)剡x用標準的符合實驗要求的合格實驗動物，根據(jù)科學的合理的設計方案，在相應的環(huán)境設施中進行各種科學實驗并觀察、記錄動物的反應過程或反應結(jié)果。以探討或檢驗生命科學中未知因素的專門活動。包含內(nèi)容：動物實驗的設計與準備、動物實驗基本操作技術、動物實驗后的管理技術以及影響動物實驗效果的因素。動物實驗分類：按機體水平分：整體實驗和離體實驗。亞細胞、細胞、組織、器官、整體動物和無損傷動物時間：急性、亞急性、慢性或更長直至整個生命期。動物實驗方法：生理學、病理生理學、藥理學、(病理)解剖學、組織學、微生物學、免疫學等。動物實驗的特點將不便施加于人體的有害因素在動物身上進行研究(如高溫、冷凍、缺氧、放射、毒氣、致癌物質(zhì)、烈性傳染病等)。可最大限度地獲取反映實驗效應的樣本和資料，進行分層次的研究。可嚴格控制實驗條件和影響因素，進行多學科、多指標綜合研究。可進行反復觀察研究。83、 實驗動物質(zhì)量標準化實驗動物質(zhì)量標準化與遺傳、微生物和寄生蟲、環(huán)境、營養(yǎng)等影響動物生長發(fā)育的因素關系密切。具有實驗動物生產(chǎn)許可證單位購買相應等級的合格實驗動物。遺傳背景明確，具有已知菌叢和模型性狀顯著且穩(wěn)定的實驗動物。84、動物實驗設計的要素受試對象（subject）：實驗動物，品種（系），年齡、性別、體重，樣本含量（數(shù)量）。處理因素（treament）：主要進行考察的條件，對非實驗因素進行控制，處理因素應標準化。實驗效應（effect）：受試因素作用于受試對象所起的作用。主觀指標和