革蘭染色法 細菌的特殊染色法_第1頁
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革蘭染色法細菌的特殊染色法第1頁，共13頁，2023年，2月20日，星期四實驗目的掌握細菌革蘭染色的原理與方法掌握細菌芽孢染色的基本原理與方法熟悉普通光學顯微鏡的油鏡使用與保養

第2頁，共13頁，2023年，2月20日，星期四實驗原理革蘭染色法的簡介革蘭染色法是細菌學中最廣泛使用的一種鑒別染色法。由丹麥醫師ChristianGram創立。方法是先將細菌用結晶紫染色，加媒染劑（增加染料和細胞的親和力）后，用脫色劑（乙醇和丙酮）脫色，再用復染劑染色。第3頁，共13頁，2023年，2月20日，星期四實驗原理革蘭染色法的原理一般認為革蘭陽性菌的細胞壁較厚，肽聚糖含量高，且交聯度大，脂類含量少，經95%乙醇脫色時，肽聚糖層的孔徑變小，通透性降低，與細胞結合的結晶紫與碘的復合物不容易被脫掉，因此細胞仍保留初染時的顏色。而革蘭陰性菌的細胞壁較薄，脂類含量較高，肽聚糖含量較低，乙醇脫色時溶解外層類脂質，增加了細胞壁的通透性，使初染的結晶紫和碘的復合物易于滲出，細胞被脫色，經復染之后，又染上了復染的顏色。第4頁，共13頁，2023年，2月20日，星期四實驗原理芽孢染色法的原理芽孢具有厚而致密的壁，折光性強，通透性低，不易著色，用一般染色法只能使菌體著色而芽孢不著色。芽孢染色法都基于同一個原則，即除了使用著色力強的染料外，還需要加熱或延長染色時間等，促進標本著色。然后使菌體脫色而芽孢上的染料仍然保留。經復染之后，菌體和芽孢呈不同的顏色。第5頁，共13頁，2023年，2月20日，星期四實驗材料-菌株金黃色葡萄球菌（209P）18-20h斜面大腸桿菌18-20h斜面枯草芽孢桿菌20-24h斜面第6頁，共13頁，2023年，2月20日，星期四實驗材料-試劑蒸餾水結晶紫盧戈碘液95%乙醇番紅花紅孔雀綠第7頁，共13頁，2023年，2月20日，星期四實驗步驟革蘭染色法涂片干燥固定初染（結晶紫1分鐘）水洗媒染（碘液1分鐘內換2-3次）水洗脫色（95%乙醇20-30秒）水洗復染（番紅花紅5分鐘）水洗吸水紙吸干鏡檢第8頁，共13頁，2023年，2月20日，星期四實驗步驟芽孢染色法涂片干燥固定初染（孔雀綠20分鐘）水洗復染（番紅花紅5分鐘）水洗吸水紙吸干鏡檢第9頁，共13頁，2023年，2月20日，星期四實驗結果第10頁，共13頁，2023年，2月20日，星期四實驗結果第11頁，共13頁，2023年，2月20日，星期四其它項目預習酵母菌和霉菌的形態觀察第12頁，共13頁，2023年，2月20日，星期四討論革

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