本文格式為Word版，下載可任意編輯——移液槍使用規(guī)范

Eppendorf移液器使用寶典移液器的規(guī)范操作和日常保養(yǎng)

移液器使用寶典

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公司簡介Eppendorf移液器的歷史Eppendorf移液器的工作原理和分類移液器的操作使用-移液器規(guī)范操作步驟-錯誤的操作方式-移液器日常使用小貼士

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移液器的清潔和消毒-移液器內(nèi)外部清潔方法-移液器的消毒滅菌處理-移液器上DNA污染的去除

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試驗(yàn)室內(nèi)移液器的自行快速檢測移液器的專業(yè)校準(zhǔn)-專業(yè)校準(zhǔn)的基本條件-不同量程范圍的移液器的校準(zhǔn)方法-移液器校準(zhǔn)的操作過程-PICASO專業(yè)校準(zhǔn)軟件

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移液器的自行拆卸和組裝

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一、公司簡介

Eppendorf公司始創(chuàng)于1945年，總部位于德國漢堡，是全球領(lǐng)先的生物技術(shù)公司，主要從事生命科學(xué)領(lǐng)域儀器和耗材的開發(fā)、制造和經(jīng)營業(yè)務(wù)。公司在2023年的銷售總額達(dá)3.14億歐元，全球范圍內(nèi)擁有員工1,800多名。1962年，隨著第一個(gè)eppendorf管的誕生，擁有全球第一支活塞式移液器專利的Eppendorf公司以其創(chuàng)新的技術(shù)和卓越的品質(zhì)，成為試驗(yàn)室儀器標(biāo)準(zhǔn)的代名詞。Eppendorf長期與《Nature》，《Science》雜志合作，分別設(shè)立歐洲青年科學(xué)家成就獎和全球神經(jīng)生物學(xué)獎，旨在為生命科學(xué)領(lǐng)域挖掘和培養(yǎng)更多的人才。2023年作為全球發(fā)展的重點(diǎn)市場，Eppendorf在中國上海注冊成立艾本德中國有限公司。公司秉承“質(zhì)量，創(chuàng)新和服務(wù)〞的宗旨，為中國客戶提供符合國際

標(biāo)準(zhǔn)、高品質(zhì)和人性化的產(chǎn)品，并提供一系列優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。

符合體外診斷（IVD）98/79/EC歐盟標(biāo)準(zhǔn)

符合IVD（InVitroDiagnostic）標(biāo)準(zhǔn)的Eppendorf移液產(chǎn)品有：

●Research移液器●Reference移液器●Multipetteplus分液器

●

epTIPS吸頭和Combitips

plus

分液頭

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移液器使用寶典

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二、Eppendorf移液器的歷史

1958年，Eppendorf公司發(fā)明白世界上第一支微量加樣器，并于1961年成功申請氣體活塞式移液器專利。歷時(shí)近半個(gè)世紀(jì)的發(fā)展，Eppendorf公司的創(chuàng)新設(shè)計(jì)和高精度配件，使其移液器產(chǎn)品能夠滿足不同客戶的需求，并符合國際相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。

1961年，全球第一個(gè)氣體活塞式移液器專利1974年，可調(diào)式移液器上市

1995年，專為科研領(lǐng)域研發(fā)的Research系列移液器上市

PhysioCare概念移液器研發(fā)過程中的PhysioCare概念移液器關(guān)注移液時(shí)人體工程學(xué)研究人全身的便利舒適

三、移液器的工作原理和分類

移液器的工作原理是活塞通過彈簧的伸縮運(yùn)動來實(shí)現(xiàn)吸液和放液。在活塞推動下，排出部分空氣，利用大氣壓吸入液體，再由活塞推動空氣排出液體。使用移液器時(shí)，協(xié)同彈簧的伸縮性特點(diǎn)來操作，可以很好地控制移液的速度和力度。

氣墊式（內(nèi)置）活塞移液器

Research手動多道移液器

手動單道移液器Researchpro電動單道移液器

手動單道移液器Researchpro電動多道移液器

外置式活塞移液器

MultipetteMultipette電動連續(xù)分液器

Varipette連續(xù)移液器

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移液器使用寶典

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四、移液器的操作使用

移液器規(guī)范操作步驟

第一步設(shè)定移液體積

●Reference移液器調(diào)理體積時(shí)需要按黑色鎖鍵

住黑色鎖鍵再旋轉(zhuǎn)刻度，否則會損壞

內(nèi)部齒輪

●從大體積調(diào)理至小體積時(shí)，為正常調(diào)從大到小的調(diào)理

從小到大的調(diào)理

節(jié)方法，逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)刻度即可，從小體積調(diào)理至大體積時(shí)，可先順時(shí)針調(diào)至超過設(shè)定體積的刻度，再回調(diào)至設(shè)定體積，可保證最正確的確切度。（見

圖1）

圖1

其次步裝配移液器吸頭

●對于單道移液器，將移液器端垂直插入吸頭，左右微微轉(zhuǎn)動，上緊即可；

特別提醒

用移液器反復(fù)撞擊吸頭來上緊的方法是十分不可取的，長期這樣操作，會導(dǎo)致移液器中的零部件因猛烈撞擊而松散，甚至?xí)?dǎo)致調(diào)理刻度的旋鈕卡住。（見圖2）圖2

●多道移液器裝配吸頭時(shí)，將移液器的第一道對準(zhǔn)第一個(gè)吸頭，傾斜插入，前后稍許搖動上緊，吸頭插入后略超過O型

環(huán)即可。（見圖3）

圖3

第三步吸液和放液

●垂直吸液

●吸頭尖端需浸入液面3mm以下●慢吸慢放，控制好彈簧的伸縮速度●放液時(shí)吸頭尖端靠在容器內(nèi)壁

圖4：正向吸液

特別提醒

5mL

和10mL的移液器要協(xié)同濾芯使用，吸液時(shí)，吸頭需浸入液面以下5mm，慢吸液體，達(dá)到預(yù)定體積后，在液面下停頓3秒，再離開液面。

移液小技巧

●預(yù)潤濕吸液

粘稠液體可以通過吸頭預(yù)潤濕的方式來達(dá)到確切移液，先吸入樣液，打出，吸頭內(nèi)壁會吸附一層液體，使表面吸附達(dá)到飽和，然后再吸入樣液，最終打出液體的體積會很確切。

●正向吸液與反向吸液

正向吸液是指正常的吸液方式（見圖4），操作時(shí)吸液可將按鈕按到第一檔吸液，釋放按鈕。放液時(shí)先按下第一檔，打出大部分液體，再按下其次檔，將余液排出。反向吸液（見圖5）是指吸液時(shí)將按鈕直接按到其次檔再釋放，這樣會多吸入一些液體，打出液體時(shí)只要按到第一檔即可。多吸入的液體可以補(bǔ)償吸頭內(nèi)部的表面吸附，反向吸液一般與預(yù)潤濕吸液方式結(jié)

合使用，適用于粘稠液體和易揮發(fā)液體。

圖5：反向吸液

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錯誤的操作方式

左右輕轉(zhuǎn)旋轉(zhuǎn)上緊吸頭

影響氣密性用大量程的移液器移取小體積的液體移液體積需保證在移液器所提供的量程范圍之內(nèi)才符合不確鑿度和不確切度的要求

吸取具有強(qiáng)揮發(fā)性的液體

假使一定要移取強(qiáng)揮發(fā)性的液體，應(yīng)當(dāng)在移液終止后立刻拆開移液器，讓蒸汽揮發(fā)

同時(shí)，建議使用外置活塞式移液器，如Multipetteplus吸液速度和放液速度過快

慢吸慢放

移液器日常使用小貼士

●

移液器長時(shí)間不用時(shí)建議將刻度調(diào)至最大量程，讓彈簧恢復(fù)原形，延長移液

器的使用壽命。

●移取的液體假使易產(chǎn)生氣泡，如表面活性劑（內(nèi)置氣體活塞式移液器在移取

這類液體時(shí)產(chǎn)生氣泡，屬正常現(xiàn)象），請使用外置活塞式移液器移液。

●多道移液器與吸頭銜接處的O型圈可定期用附贈的硅油輕拭保養(yǎng)。●假使需要從長頸瓶中移液，可將移液器外層套筒取下，在內(nèi)桿上直接裝配吸

頭使用，或者使用特別的長頸吸頭（只適用于1-10ml移液器）來操作。

改進(jìn)的

原先的●移液器外層套筒對應(yīng)的套筒小鉤上特別吸頭彈出桿吸頭彈出桿

加工了一個(gè)環(huán)形凹槽，外層套筒只需要

“咔噠〞一聲嵌入槽內(nèi)，即可避免外層特別加工的環(huán)形凹槽

套筒在彈下吸頭時(shí)與吸頭同時(shí)脫落。

外層套筒

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寶

用使器液移09

移液器使用寶典

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五、移液器的自行拆卸和組裝

Eppendorf移液器的內(nèi)部結(jié)構(gòu)簡單，用戶在購買后可以自行拆卸和組裝，進(jìn)行日常的保養(yǎng)和維護(hù)。內(nèi)部的零配件，可單道移液器專用改錐

長期使用，不需要定期更換。

︵隨移液器附贈︶

多道移液器專用改錐

Research移液器的拆卸方法

圖一

按下脫卸吸頭的按鈕，用力拔出最外層套筒

圖三

輕夾彈簧固定帽，并取

下，注意活塞彈性釋放時(shí)會彈出

Research

移液器的組裝方法

●將彈簧套入活塞，注意彈簧為錐形，

內(nèi)徑大的一端朝下

●將套好彈簧的活塞插入內(nèi)部套筒中●將彈簧固定帽壓住彈簧并扣緊

●再將裝配好的部件旋入上部手柄中，以手感旋緊即可●最終裝上外層套筒，對準(zhǔn)套筒小鉤，扣入壓緊

特別提醒

●Reference移液器的拆卸和組裝與Research移液器類似，外套筒不需拔下，只需旋轉(zhuǎn)

擰下即可。

●多道移液器不建議用戶自行拆卸，假使需要拆卸清洗，請聯(lián)系Eppendorf公司。

六、移液器的清潔和消毒

移液器內(nèi)外部清潔方法

●移液器外殼的清潔，可使用肥皂液、洗潔精或60％

的異丙醇來擦洗，然后用雙蒸水淋洗，晾干即可

●移液器內(nèi)部的清洗，需要先將移液器下半部分拆

卸開來（具體方法見移液器的自行拆卸和組裝章節(jié)），拆卸下來的5個(gè)部件（見上頁圖四）可以用上述溶液來清潔，雙蒸水沖洗清白，晾干，然后在活塞表面用棉簽涂上一層薄薄的硅酮油脂（隨移液器附贈）

特別提醒

移液器內(nèi)部的密封圈在內(nèi)套筒內(nèi)部，不需要拆卸，而且是免維護(hù)式的，無需定期更換。

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移液器使用寶典

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移液器的消毒滅菌處理

●常規(guī)的高溫高壓滅菌處理

件，121℃，1bar，20

特別提醒

●Reference移液器可進(jìn)行整支滅菌，滅菌時(shí)需將下半部分旋松，部件放松，包裝好以后，再送入滅菌鍋內(nèi)。

●Research移液器只有下半部分可以滅

菌，在滅菌時(shí)將下半部分拆下，包裝好后，送入滅菌鍋。

●10ml移液器配套使用的濾芯也可以進(jìn)行

高溫高壓滅菌，但只能滅菌一次，反復(fù)滅

●UV紫外線照射滅菌Eppendorf移液器是采用了抗紫外線的高質(zhì)量材料制作的，整支移液器和其

零部件可暴露于紫外線照射下，進(jìn)行表面消毒。

移液器上DNA污染的去除

清洗液，10保存液的配制：處理方法：

30.6gNaCl●10保存液稀釋成1倍緩沖液，將39.2gGlycineResearch或Reference移液器下523mL

H2O

半部分拆卸下來的內(nèi)外套筒，在加1NHCl至1000mL

95℃下浸泡30分鐘●用蒸餾水將套筒沖洗清白●在60℃下烘干處理，或完全晾干●在活塞表面涂上硅油并將部件組裝

七、試驗(yàn)室內(nèi)移液器的自行快速檢測

移液器在使用過程中，假使懷疑其確切度，可根據(jù)以下提醒自行檢測：

●移液器是否有漏氣的問題？

1.自行檢測：

目視法檢測：將吸取液體后的移液器垂直靜置15秒，觀測是否有液滴緩慢的流出。若有流出，說明有漏氣現(xiàn)象。

壓力泵檢測：使用專用的壓力泵，檢測壓力狀況，判斷是否漏氣。2.可能的原因：-吸頭是否匹配？

——使用原裝匹配的吸頭-裝配吸頭時(shí)有無上緊？

——注意裝配吸頭的方法（詳見P6）-移液器內(nèi)部氣密性不好？

——與Eppendorf公司維修工程師聯(lián)系

●液體、移液器、吸頭以及環(huán)境的溫度差異是否會影響移液器的確鑿度？

移取液體的溫度與吸頭和移液器的溫度不一致的狀況下，液體溫度高于吸頭的，移取的液體體積會偏大，液體溫度低于吸頭的，移取的液體體積會

偏小。

●液體樣品的密度和水是否有十明顯顯的區(qū)別？

Eppendorf移液器出廠前的校準(zhǔn)是用水作為標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行測試的，假使所操作的液體與水的比重有很大差異，所給出的不確切度和不確鑿度就不能滿

足，從而產(chǎn)生誤差。

●吸液速度太快，是否會導(dǎo)致移液體積不確鑿？

吸液速度太快會產(chǎn)生反沖和氣泡，導(dǎo)致移液體積不確鑿。

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移液器使用寶典

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八、移液器的專業(yè)校準(zhǔn)

每支Eppendorf移液器均貼上銀色的CAL封標(biāo)，說明在出廠之前已對各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行校準(zhǔn)。

移液器使用過程中必需定期校準(zhǔn)，由于移液器發(fā)生的偏差（零點(diǎn)偏移）對不同的體積移液會產(chǎn)生很大影響。如移液器發(fā)生1l的偏差，假使移液體積是100l，誤差就在1％，但假使移液體積是

Research移液器CAL封標(biāo)位置

10l，誤差就會大到10％。

專業(yè)的移液器校準(zhǔn)對外部環(huán)境、工作條件以及校準(zhǔn)工具都有嚴(yán)格和高縝密度的要求。假使您的移液器需要校準(zhǔn)，請您聯(lián)系Eppendorf公司的校準(zhǔn)工程師。

專業(yè)校準(zhǔn)的基本條件

操作空間：獨(dú)立的操作間，有溫度和濕度顯示

溫度控制：恒溫15－30℃（0.5℃）濕度控制：60－90％

工作臺面：防震、防塵，無陽光直射，遠(yuǎn)離熱源稱量設(shè)備：0.00001g

縝密分析天平（小數(shù)點(diǎn)后五位）

每年由廠家定期校準(zhǔn)

防蒸發(fā)裝置：Eppendorf

專用濕度阱

稱量介質(zhì)：雙蒸水，每4小時(shí)更換一次，批次更換周期不大于2周

不同量程范圍的移液器的校準(zhǔn)方法

1l應(yīng)用分光光度計(jì)檢測≥1l用縝密分析天平測定重量

1-10l

從預(yù)裝蒸餾水的稱量管中取出一定量蒸餾水，進(jìn)行扣除計(jì)算的方法稱量

10l用預(yù)潤的吸頭將蒸餾水參與稱量管中的方式稱重

多道移液器用預(yù)潤的吸頭參與稱量管中的方式稱重，每一通道都要進(jìn)行校準(zhǔn)（根據(jù)水在20℃時(shí)的密度0.99