現在是1頁\一共有105頁\編輯于星期四蛋白質的生物合成：

將核酸中的核苷酸序列編碼的遺傳信息，通過遺傳密碼破譯的方式解讀為蛋白質分子中20種氨基酸的排列順序。

1.合成過程2.蛋白質分子的折疊與加工3.蛋白質分子的轉運與定位4.蛋白質分子合成的調控現在是2頁\一共有105頁\編輯于星期四一、蛋白質的合成過程

(內容為教材p76~95)現在是3頁\一共有105頁\編輯于星期四現在是4頁\一共有105頁\編輯于星期四tRNA運送氨基酸到對應的mRNA密碼子上rRNA和蛋白質提供了一個將特定的氨基酸聚合成肽鏈的裝置mRNA代表蛋白質的核苷酸序列現在是5頁\一共有105頁\編輯于星期四1．mRNA含有從DNA轉錄來的遺傳信息，是蛋白質合成的模板mRNA的結構組成一般包括：-5’非翻譯區(5’-untranslatedregion,5’-UTR)-開放閱讀框架(openreadingframe,ORF)-3’非翻譯區(3’-untranslatedregion,3’-UTR)現在是6頁\一共有105頁\編輯于星期四細菌mRNA為多順反子5’-UTR3’-UTRORF5’-UTR在起始密碼子前面ORFORF3’-UTR在終止密碼子后面真核生物mRNA為單順反子mRNA組成結構示意現在是7頁\一共有105頁\編輯于星期四(1)5’-UTR

——位于mRNA5’端起始密碼子之前的非翻譯區，即不表達蛋白質的核酸序列區；5’-UTR有翻譯起始信號

原核mRNA5’-UTR有嘌呤豐富的序列參與翻譯起始。

真核mRNA5’-UTR的長度差別很大。5’-UTR區與特異蛋白因子結合調控翻譯起始現在是8頁\一共有105頁\編輯于星期四SDSequence原核生物mRNA的起始密碼子AUG上游4-13個核苷酸以外有一段含嘌呤核苷酸較多的保守序列，它是mRNA和核糖體識別、結合的位點。SD序列與核糖體小亞基16SrRNA上一段富含嘧啶核苷酸的保守序列互補，核糖體借此判定mRNA的翻譯起始位點。KozakSequence真核生物起始密碼子常處于-CCACCAUGG-序列之中，這段保守序列的存在能增加翻譯起始的效率，這段序列稱為Kozak序列。現在是9頁\一共有105頁\編輯于星期四SDSequence現在是10頁\一共有105頁\編輯于星期四(2)3’-UTRmRNA的3’非翻譯區指位于終止密碼子之后的非編碼序列，它們在翻譯過程中同樣有著調控作用。現在是11頁\一共有105頁\編輯于星期四(3)開放閱讀框架閱讀框架(readingframe):mRNA中含有翻譯密碼的全部堿基序列開放閱讀框架(openreadingframe，ORF):由編碼氨基酸的三聯體密碼子組成的連續DNA序列，能翻譯成蛋白質，從AUG開始到終止密碼子結束。DNA序列通常包含一個ORF現在是12頁\一共有105頁\編輯于星期四遺傳密碼的發現：1954年前蘇聯-美國物理學家伽莫夫G.Gamow用數學的方法推斷3個堿基編碼一個氨基酸。——Nature文章1961年克里克第一個用T4噬菌體實驗證明了遺傳密碼中3個堿基編碼一個氨基酸。——增加或減少1個和2個堿基均會引起突變，無法產生正常功能的蛋白質，而加入或減少3個堿基時卻可以合成正常功能的蛋白質遺傳密碼從一個固定的起點開始,以非重疊的方式閱讀,編碼之間沒有分隔符。1961年尼倫伯格M.W.Nirenberg和馬太H.Matthaei利用無細胞系統進行體外合成破譯了第一個遺傳密碼。——與羅伯特·W·霍利及哈爾·葛賓·科拉納共同獲得1968年諾貝爾生理學或醫學獎。1969年科學家們破譯了全部的密碼。現在是13頁\一共有105頁\編輯于星期四這種體系是用大腸桿菌制備的。方法是在氧化鋁緩沖溶液中研磨大腸桿菌菌體，然后離心除去細胞壁和細胞膜碎片，留下來的液體部分即是無細胞體系。在這一體系中，保留了大腸桿菌原有的DNA、RNA、tRNA、核糖體、各種酶以及Mg2+等金屬離子。再經過一段時間保溫后，原有的DNA、RNA都降解掉，蛋白質的合成也就停止了。在這種情況下，如再向溶液中加入外源mRNA和混合的各種氨基酸并補充能量（如ATP），經過保溫后即有新的蛋白質合成。新合成蛋白質的氨基酸組成（種類和順序）應當對應于所加外源mRNA中核苷酸排列順序，也就是說對應于mRNA的密碼。尼倫伯格在試驗中加入的氨基酸一共20種，但輪流地將一種氨基酸用14C同位素標記。合成反應后，用三氯乙酸將蛋白質沉淀，并轉移至濾紙片上，測定紙片上放射性的有無或強度，即可知是哪一種氨基酸摻入蛋白質，它和加入的外源mRNA模板有怎樣的關系。現在是14頁\一共有105頁\編輯于星期四密碼子codon64個密碼子中，61個編碼氨基酸，3個導致翻譯終止3個終止密碼子，根據發現的歷史和發現者的姓名，又被命名為：UAA：赭石密碼子UAG：琥珀密碼子UGA：乳白石密碼子現在是15頁\一共有105頁\編輯于星期四密碼子的性質：（1）連續性（2）簡并性和擺動性多種密碼子編碼同一個氨基酸，區別僅在于密碼子的第三位堿基不同（3）通用性：線粒體密碼遺傳密碼具有通用性，僅在極個別物種中存在變化，這種特例往往與起始和終止有關細胞器，如線粒體和葉綠體中有自己的基因組，合成蛋白質是使用得密碼子也與通用密碼子有差別（4）偏愛性多數氨基酸有一個以上的密碼子，但這些密碼子使用頻率各不相同，稱為遺傳密碼的偏愛性現在是16頁\一共有105頁\編輯于星期四簡并性現在是17頁\一共有105頁\編輯于星期四在支原體、纖毛蟲等個別原核生物中存在的密碼子改變現在是18頁\一共有105頁\編輯于星期四大腸桿菌少用的密碼子密碼子編碼的氨基酸 AGA,AGG,CGA,CGG 精氨酸（Arg) TGT,TGC 半胱氨酸(Cys)GAG,GGG 甘氨酸(Gly) ATA 異亮氨酸(Ile) CTA,CTC 亮氨酸(Leu) CCC,CCT,CCA脯氨酸(Pro) TCA,AGT,TCG,TCC 絲氨酸(Ser) ACA 蘇氨酸(Thr) 現在是19頁\一共有105頁\編輯于星期四通過在不同的起始位點起始表達或在不同的終止位點終止表達，一條基因可以翻譯出不同的蛋白質*原核生物的多順反子序列通過使用不同的讀框，兩條基因可共享一段DNA序列*噬菌體的重疊基因現在是20頁\一共有105頁\編輯于星期四2．rRNA——蛋白質合成場所提供了mRNA與氨基酰-tRNA相互作用的空間，快速高效每個核糖體由大小兩個亞基組成。大小亞基均由多種蛋白質及多種rRNA組成。原核生物核糖體中相對分子質量較大的rRNA，是維系核糖體結構的骨架;大亞基上的rRNA具有肽基轉移酶活性；小亞基16SrRNA上有與S-D序列互補的序列；大亞基5SrRNA上有保守序列與tRNA中TψC環上序列互補。核糖體上有三個tRNA結合位點：A位點、P位點、E位點。現在是21頁\一共有105頁\編輯于星期四原核生物核糖體組成真核生物核糖體組成現在是22頁\一共有105頁\編輯于星期四核糖體的大小足以結合mRNA和tRNA現在是23頁\一共有105頁\編輯于星期四核糖體上的功能位點細菌核糖體的3個tRNA結合位點：A位：氨基酰tRNAP位：肽酰tRNAE位：空tRNA脫出位點現在是24頁\一共有105頁\編輯于星期四核糖體蛋白（RP）：Rpl大亞基核糖體蛋白，rps小亞基核糖體蛋白參與蛋白質合成：rRNA折疊，調整核糖體構象等核糖體外功能：參與調控基因轉錄翻譯，調控細胞增殖、凋亡、分化等RP表達異常會引發貧血、腫瘤等嚴重疾病核糖體核酸（rRNA）：構成翻譯進行的空間構象，定位并結合mRNA（p81圖4-1）肽基轉移酶，催化肽鍵形成現在是25頁\一共有105頁\編輯于星期四3．tRNA——氨基酸的轉運工具三級結構氨基酸反密碼子每個氨基酸都至少有一個tRNA，由特定的氨基酰-tRNA合成酶催化tRNA與氨基酸的結合攜帶特定氨基酸的tRNA通過反密碼子特異性地與mRNA密碼子配對現在是26頁\一共有105頁\編輯于星期四tRNA與氨基酸特異性結合：氨基酸結合位點反密碼子副密碼子：tRNA上一些特定區域，可幫助特異性識別氨基酸氨基酰-tRNA合成酶：識別tRNA和氨基酸，有校正功能現在是27頁\一共有105頁\編輯于星期四Aa-tRNAaa現在是28頁\一共有105頁\編輯于星期四*一個特殊的tRNA

——原核生物起始Met轉運氨基酸甲酰化*真核生物有單獨攜帶起始Met的tRNA，寫作tRNAiMet，區別于tRNAeMet；二者分別被起始和延長過程中的酶和蛋白因子所識別。現在是29頁\一共有105頁\編輯于星期四4．蛋白質合成過程蛋白質的合成還需要其他許多物質的參與，包括：蛋白質因子——IF，EF，RFATP，GTP無機離子20種氨基酸等現在是30頁\一共有105頁\編輯于星期四翻譯過程從開放閱讀框架的5‘-AUG開始向3’方向閱讀，按照mRNA上三聯體密碼子的順序指導蛋白質從N端向C端合成，直至終止密碼的出現。整個合成過程分為5個階段：氨基酸的活化——氨基酰tRNA的形成肽鏈合成的起始肽鏈的延長肽鏈合成的終止及釋放翻譯后蛋白質的折疊及加工現在是31頁\一共有105頁\編輯于星期四*氨基酸的活化AA+tRNA→氨酰-tRNA細胞中一般只有二十種氨酰-tRNA合成酶，不同tRNA與同一氨基酸的結合均由同一個酶催化。合成酶有很強的校對功能。黃色堿基為識別必需位點現在是32頁\一共有105頁\編輯于星期四原核生物肽鏈合成的起始現在是33頁\一共有105頁\編輯于星期四AA2原核生物多肽合成延伸過程示意圖現在是34頁\一共有105頁\編輯于星期四原核生物多肽合成終止現在是35頁\一共有105頁\編輯于星期四真核生物mRNA與小亞基的結合現在是36頁\一共有105頁\編輯于星期四真核生物翻譯的起始現在是37頁\一共有105頁\編輯于星期四現在是38頁\一共有105頁\編輯于星期四真核生物的釋放因子比原核生物的少，只有兩種，eRF-1和eRF-3，前者可以識別三種終止密碼，后者作用類似RF-3，促進eRF-1與核糖體的結合，激發終止反應。現在是39頁\一共有105頁\編輯于星期四5、蛋白質合成與藥物阻斷蛋白質合成的藥物抗生素抗生素作用點作用原理四環素原核核糖體小亞基抑制氨基酰-tRNA與小亞基結合鏈霉素原核核糖體小亞基改變構象引起讀碼錯誤氯霉素原核核糖體大亞基抑制肽基轉移酶紅霉素原核核糖體大亞基抑制轉位酶放線菌酮真核核糖體大亞基抑制肽基轉移酶嘌呤霉素真核、原核核糖體引起未成熟肽鏈脫落現在是40頁\一共有105頁\編輯于星期四干擾素：真核細胞感染病毒后分泌的一類具有抗病 毒作用的蛋白質，可抑制病毒繁殖分為α-（白細胞）型、β-（成纖維細胞）型和γ-（淋巴細胞）型作用機制：激活蛋白激酶活化核酸內切酶使mRNA降解毒素：細菌毒素、植物毒素現在是41頁\一共有105頁\編輯于星期四二、蛋白質合成后的折疊與加工合成后的折疊：形成特定的空間結構翻譯后的加工：使具有正確的生理學活性現在是42頁\一共有105頁\編輯于星期四1、合成后折疊多肽鏈在其被折疊成穩定的三維結構后就會變成功能性的蛋白質，不正確折疊的蛋白質會對細胞產生破壞性的影響，甚至對機體也會帶來大的不利作用，比較典型的例子就是阿爾茲海默癥或者帕金森病等神經變性病。為了預防折疊的失誤，細胞擁有一套完整的折疊助手“工廠”，這種折疊助手就是分子伴侶（molecularchaperones）。某些分子伴侶可以在蛋白合成期間幫助折疊蛋白質現在是43頁\一共有105頁\編輯于星期四分子伴侶(chaperone)胞內保守蛋白，能與其它構象不穩定（松弛構象）的蛋白質結合并使之穩定，通過與多肽結合來幫助被結合多肽在體內的折疊、組裝、轉運或降解，完成任務后又從多肽上釋放下來。分子伴侶是細胞內蛋白質折疊和組裝的重要調節者。一方面幫助新生的未折疊的蛋白質折疊獲得正確的構象，另一方面識別變性的蛋白質，幫助其復性或介導其降解。在蛋白質構象形成和轉運過程中，分子伴侶都起作用。核糖體結合性分子伴侶和非核糖體結合性分子伴侶現在是44頁\一共有105頁\編輯于星期四熱休克蛋白家族主要成員根據亞基分子量大小和氨基酸序列同源性的不同分類現在是45頁\一共有105頁\編輯于星期四主要幾種熱休克蛋白的功能現在是46頁\一共有105頁\編輯于星期四兩種主要類型的非核糖體結合性分子伴侶——Hsp70和Hsp60Hsp70能結合尚未離開核糖體的新生肽鏈或正在穿膜的肽鏈，防止這些肽鏈因疏水區外露而發生凝集，從而有利于肽鏈的正確折疊。Hsp60(GroEL)分子具有桶狀結構,能協助尚未完成折疊或已經發生錯誤折疊的多肽鏈成為正確折疊的活性分子。現在是47頁\一共有105頁\編輯于星期四HSP70是進化上最保守的蛋白質之一，結構主要由一個N端ATPase功能域和一個C端區域組成HSP70能夠以依賴于ATP的方式結合和釋放非天然構象多肽的疏水片段，并能通過遮蔽這些片段而穩定蛋白質的松弛構象和阻止聚集．作為分子伴侶參與所有細胞內蛋白質的從頭合成和定位、蛋白質的成熟和錯誤折疊蛋白質的降解及調節過程，因而能夠嚴重地影響生長在正常條件和應激條件下生存的細胞功能和代謝過程現在是48頁\一共有105頁\編輯于星期四現在是49頁\一共有105頁\編輯于星期四熱休克蛋白60（HSP60）也是一類進化上高度保守的蛋白質家族。生理狀態時協助多肽或蛋白質的正確轉位、折疊和裝配,，起“分子伴侶”的作用；在應激狀態下，HSP60過表達或異位表達,作為一種自身抗原被免疫系統識別，誘發機體的保護性免疫應答，也可作為一種信號分子，在信號轉導中發揮作用。HSP60在自身免疫性疾病、傳染病、動脈粥樣硬化及慢性感染的發病中均發揮重要的作用。現在是50頁\一共有105頁\編輯于星期四GroE系統是大腸桿菌的HSP60，由GroEL（Hsp60）及其它的輔助分子伴侶GroEs（Hsp10）組成。GroEL蛋白為兩層雙環的中空圓柱結構，每個環由7個亞基組成，每個亞基由3個結構域組成：頂端結構域是底物和其輔助分子伴侶GroES的結合位點；赤道結構域有微弱的ATP酶活性；鉸鏈結構域是和別的結構域相連的地方，并在頂端結構域和赤道結構域間傳遞構象變化。在GroEL蛋白的中央空腔中可結合多種非天然的多肽，一般來說，GroEL介導的蛋白質折疊需要GroES的協助。GroES是連在GroEL的末端。GroEL單獨也可以幫助某些底物折疊。現在是51頁\一共有105頁\編輯于星期四在新生蛋白質的正確折疊和組裝以及變性蛋白質的恢復過程中起重要作用在蛋白質跨膜轉移或蛋白質插入E.coli細胞質膜過程中起重要作用GroEL的功能現在是52頁\一共有105頁\編輯于星期四GroEL復合體結構現在是53頁\一共有105頁\編輯于星期四E.ColiGroEL幫助蛋白質折疊原理示意圖現在是54頁\一共有105頁\編輯于星期四與蛋白質折疊有關的其他折疊酶：蛋白質二硫鍵異構酶（PDI）PDI定位在內質網管腔內，含量豐富，催化蛋白質分子內巰基與二硫鍵之間的交換反應，從而催化蛋白質二硫鍵的形成、還原（斷裂）或重排（異構化）。

肽-脯氨酰順反異構酶（PPI）PPI廣泛分布于各種生物體及各種組織中，多數定位于胞漿，在細胞中催化肽基脯氨酰的順式與反式旋轉體的相互轉變。

現在是55頁\一共有105頁\編輯于星期四2、蛋白質合成后的加工（P97）一級結構的修飾肽鏈N端Met或fMet的切除特定氨基酸的共價修飾二硫鍵的形成多蛋白的加工前體蛋白的加工空間結構的修飾：亞基聚合、輔基連接現在是56頁\一共有105頁\編輯于星期四二硫鍵的形成和正確配對谷胱甘肽參與蛋白質二硫鍵的生成。內質網中存在二硫鍵異構酶（PDI），能催化二硫鍵的正確配對。現在是57頁\一共有105頁\編輯于星期四蛋白質前體的加工 切除N端的蛋氨酸或甲酰蛋氨酸殘基。切除非功能所需肽段同一蛋白質前體，經過不同的剪切或剪接方式，產生不同的活性蛋白質。現在是58頁\一共有105頁\編輯于星期四胰島素原的加工胰島素原經加工，切除不必要的肽段，形成胰島素translation現在是59頁\一共有105頁\編輯于星期四剪切——鴉片促黑皮質原(POMC)的加工translationNC信號肽PMOCKRKR103肽(？)ACTH-LT-MSH-MSHEndophin現在是60頁\一共有105頁\編輯于星期四剪接蛋白質前體可以通過多肽的剪輯，剪除某些氨基酸序列片斷，然后再以一定的順序結合起來，最終形成成熟的、有活性的蛋白質的現象。“內蛋白子”（某些蛋白質內發現的部分間隔順序，可自我催化蛋白質前體的剪接，切下的部分稱為游離內蛋白子，其意義類似于hnRNA中的內含子）的發現提示，僅根據DNA序列來推算蛋白質序列，還存在一定風險。現在是61頁\一共有105頁\編輯于星期四輔基連接——蛋白質的糖基化(1)許多分泌蛋白質和膜蛋白含有1至多個寡糖鏈。胞質溶漿內蛋白不含寡糖鏈。(2)糖蛋白表面的糖鏈有兩種類型：N連接寡糖鏈和O連接寡糖鏈。N連接寡糖通過N-乙酰葡萄糖胺連接于天冬酰胺殘基側鏈的酰胺基上；O連接寡糖通過N-乙酰半乳糖胺與蛋白質的絲氨酸或蘇氨酸的羥基連接。(3)糖基化是在內質網和高爾基體中完成的。N連接寡糖和O連接寡糖的生物合成途徑不同。現在是62頁\一共有105頁\編輯于星期四糖基化蛋白的N-連接和O-連接方式現在是63頁\一共有105頁\編輯于星期四三、蛋白質的轉運/定位現在是64頁\一共有105頁\編輯于星期四細胞中蛋白質的合成發生在兩個場所：

絕大部分由細胞質中的核糖體合成；極少部分由細胞器(葉綠體和線粒體)中的核糖體合成(保留在細胞器內)合成后的蛋白質有三個去向：留在細胞質中，運到特定的細胞器內；分泌到細胞外現在是65頁\一共有105頁\編輯于星期四游離核糖體上合成的蛋白質釋放于細胞質，一部分就留在細胞質中，另一部分需要轉運到細胞核、線粒體、葉綠體等。膜結合核糖體上合成的蛋白質主要是膜蛋白、分泌蛋白以及存在于溶酶體、內質網和高爾基體腔內的酶等。現在是66頁\一共有105頁\編輯于星期四這就意味著合成后的蛋白質必須經過運輸才能夠得到準確的定位：蛋白質通過膜上的特殊結構進行跨膜轉運現在是67頁\一共有105頁\編輯于星期四分泌蛋白游離核糖體膜結合核糖體翻譯后轉運翻譯時轉運蛋白質完全翻譯完成后從核糖體上脫落，擴散至合適的定位點蛋白質便進行翻譯合成邊與運輸元件結合蛋白質由特殊途徑定位細胞質蛋白線粒體信號核信號高爾基體滯留信號內質網滯留信號現在是68頁\一共有105頁\編輯于星期四無論是蛋白質邊翻譯邊進入內質網，還是蛋白質翻譯后再擴散至特定的細胞部位，蛋白質都要利用N端的一段特殊序列引導進膜，這段引導序列在成熟蛋白質中已被切除兩個與蛋白質運送有關的理論：

信號肽假設——翻譯時轉運導肽假設——翻譯后轉運現在是69頁\一共有105頁\編輯于星期四1．信號肽假說——針對分泌蛋白當編碼分泌蛋白的mRNA與胞漿中游離核糖體結合后，蛋白質的合成立即開始。首先合成的是蛋白質N-端的信號肽序列。胞漿中信號識別顆粒(SRP)識別、結合信號肽，并進入核糖體A位點，使肽鏈延伸反應暫時停止。核糖體-mRNA-信號肽-SRP復合體與內質網膜表面的SRP受體結合。現在是70頁\一共有105頁\編輯于星期四SRP釋放核糖體A位點，多肽鏈的合成立即恢復。SRP從其受體上釋放下來，完成SRP循環。在內質網膜表面的核糖體受體蛋白和蛋白轉運因子協同作用下，信號肽及新生肽鏈穿過跨膜通道。內質網腔內側面的信號肽酶切除并進一步水解信號肽。現在是71頁\一共有105頁\編輯于星期四

信號肽(SignalPeptide)位于分泌性蛋白質N端的長約16-30個氨基酸殘基的序列。信號肽的N端是帶正電荷的氨基酸殘基（堿性氨基酸）構成，隨后是6-12個疏水性氨基酸連續排列的疏水肽段。疏水肽段能形成一段α螺旋，在信號肽序列之后的一段氨基酸殘基也能形成一段α螺旋，兩段α螺旋會形成一個易嵌入細胞膜的發夾結構。現在是72頁\一共有105頁\編輯于星期四信號肽結構模式現在是73頁\一共有105頁\編輯于星期四

信號識別顆粒

(SignalRecognitionParticle,SRP)：由一個7SRNA(305個堿基)和6個蛋白質分子組成的狹長核糖核蛋白復合物，SRP能識別并結合信號肽，形成SRP-新生肽-核糖體復合物，借助內質網膜上的SRP受體，將SRP-新生肽-核糖體復合物帶到內質網膜的外表面。SRP與新生肽-核糖體結合后能抑制肽鏈的延伸，SRP與SRP受體的結合恢復了肽鏈的延伸作用。現在是74頁\一共有105頁\編輯于星期四SRP的各種功能都與其特殊的蛋白質有關，7SRNA為SRP提供結構框架，保證蛋白質的組裝結合信號識別受體結合肽鏈延伸終止現在是75頁\一共有105頁\編輯于星期四SRP受體：膜上的二聚體蛋白，可能識別SRP中的7SRNA，又稱停靠蛋白現在是76頁\一共有105頁\編輯于星期四信號肽和信號識別顆粒現在是77頁\一共有105頁\編輯于星期四信號序列啟動入膜過程內質網膜內質網腔信號肽部分被信號肽酶切除現在是78頁\一共有105頁\編輯于星期四信號肽酶(signalpeptidase)由5個蛋白質組成的復合物，能將蛋白質的信號肽切割下來。信號肽酶定位于內質網膜的腔面，說明信號肽在被切除前必須穿越內質網膜內質網膜表面存在核糖體受體蛋白，該蛋白與蛋白轉運因子相連，形成跨膜通道現在是79頁\一共有105頁\編輯于星期四蛋白質穿越內質網膜信號肽酶現在是80頁\一共有105頁\編輯于星期四現在是81頁\一共有105頁\編輯于星期四共翻譯：蛋白質的跨膜過程是在翻譯過程中完成的，即邊翻譯邊跨膜，故稱為共翻譯*SRP循環：從SRP受體上釋放下來的SRP可以循環使用，與下一個信號肽結合，重復跨膜過程。現在是82頁\一共有105頁\編輯于星期四2、導肽假說由導肽牽引的蛋白質是屬于合成后再分選和運輸的，不同于信號肽引導的邊翻譯邊運輸(共翻譯)過程。導肽，又稱轉運肽(transitpeptide)或導向序列(targetingsequence)，它是游離核糖體上合成的蛋白質的N-端信號。

現在是83頁\一共有105頁\編輯于星期四導肽長度大約20～80個氨基酸，通常帶正電荷的堿性氨基酸(特別是精氨酸和賴氨酸)含量較為豐富,這些氨基酸對于蛋白質的定位具有重要作用。不同的導肽之間沒有同源性，說明導肽的序列與識別的特異性有關，而與二級或高級結構無太大關系。現在是84頁\一共有105頁\編輯于星期四不同部位的線粒體蛋白質前體具有不同類型的導肽序列。導肽序列中的每一肽段含有各自的導向信息。如導向基質的肽段、基質蛋白酶切割位點、導向膜間空間肽段、停止轉運和外膜定位肽段等。跨膜運輸前，蛋白質由分子伴侶結合，保持其未折疊狀態，或防止其錯誤折疊。現在是85頁\一共有105頁\編輯于星期四幾種線粒體蛋白質導肽的特征現在是86頁\一共有105頁\編輯于星期四導肽牽引蛋白質跨越線粒體膜轉運過程現在是87頁\一共有105頁\編輯于星期四跨膜時不折疊，保持柔性構象未折疊蛋白質結合分子伴侶3、分子伴侶參與蛋白質的跨膜運輸現在是88頁\一共有105頁\編輯于星期四分子伴侶參與蛋白質的跨膜運輸現在是89頁\一共有105頁\編輯于星期四4、蛋白質的正向運輸和逆向運輸正向運輸：從內質網向高爾基體方向移動逆向運輸：內質網中的蛋白質進入高爾基體后，通過特殊的信號又返回內質網現在是90頁\一共有105頁\編輯于星期四5、蛋白質的定位分泌蛋白(secretoryprotein)輸送至細胞外細胞質膜蛋白(plasmamembraneprotein)的定位內質網膜蛋白(endoplasmicreticul