（一）選擇題A型題判定基因結(jié)構(gòu)異常最直接的方法是PCR法核酸分子雜交DNA序列測(cè)定RFLP分析SSCP分析不符合基因診斷特點(diǎn)的是特異性強(qiáng)靈敏度高易于做出早期診斷樣品獲取便利檢測(cè)對(duì)象僅為自體基因遺傳病基因診斷的最重要的前提是了解患者的家族史疾病表型與基因型關(guān)系已被闡明了解相關(guān)基因的染色體定位了解相關(guān)的基因克隆和功能分析等知識(shí)進(jìn)行個(gè)體的基因分型若要采用Southern或Northern印跡方法分析某特定基因及其表達(dá)產(chǎn)物，需要制備固定在支持物上的組織或細(xì)胞收集組織或細(xì)胞樣品，然后從中提取總DNA或RNA利用PCR技術(shù)直接從標(biāo)本中擴(kuò)增出待分析的片段收集組織或細(xì)胞樣品，然后從中提取蛋白質(zhì)收集培養(yǎng)細(xì)胞的上清液目前基因診斷常用的分子雜交技術(shù)不包括哪一項(xiàng)Southern印跡Western印跡Northern印跡DNA芯片技術(shù)等位基因特異性寡核苷酸分子雜交SNP的實(shí)質(zhì)是堿基缺失堿基插入堿基替換移碼突變轉(zhuǎn)錄異常DNA指紋的遺傳學(xué)基礎(chǔ)是連鎖不平衡DNA的多態(tài)性串聯(lián)重復(fù)序列MHC的限制性MHC的多樣性在對(duì)臨床病例進(jìn)行基因診斷時(shí)，若遇到不能檢測(cè)出已知類型突變的情況，如果表型明確指向某種疾病，適用下列哪一類篩查技術(shù)PCR法ASO分子雜交反向點(diǎn)雜交變性高效液相色譜（DHPLC）STR拷貝異常的診斷生殖細(xì)胞若發(fā)生基因結(jié)構(gòu)突變可引起哪種疾病腫瘤高血壓糖尿病遺傳病傳染病PCR技術(shù)容易出現(xiàn)假陰性結(jié)果假陽性結(jié)果靈敏度不高適用不廣操作繁冗目前檢測(cè)血清中乙肝病毒最敏感的方法是斑點(diǎn)雜交試驗(yàn)等位基因特異性寡核苷酸分子雜交Southern印跡PCR法E.Northern印跡核酸分子雜交的原理是磷酸化甲基化抗原抗體結(jié)合配體受體結(jié)合堿基互補(bǔ)配對(duì)目前法醫(yī)學(xué)中主要應(yīng)用的基因診斷方法是基于Southern印跡的操作FISH檢測(cè)基于PCR的DNA指紋技術(shù)SSCP分析變性高效液相色譜分析B型題確定被檢核酸在組織或細(xì)胞中的定位同時(shí)對(duì)樣品中多種類核酸進(jìn)行檢測(cè)和分析檢測(cè)組織樣品中的RNA種類和含量檢測(cè)細(xì)胞基因拷貝數(shù)的變化或者mRNA含量的變化基因組DNA分析Southern印跡法主要用于Northern印跡法主要用于斑點(diǎn)印跡雜交主要用于組織原位雜交主要用于18.DNA芯片技術(shù)可以X型題基因診斷的常用技術(shù)主要有PCR—RFLPSouthern印跡RNAiASO分子雜交DHPLC被稱為基因診斷間接方法的是下列哪幾種RFLP連鎖分析基于STR的微衛(wèi)星分析基于SNP的單倍型分析Southern印跡法PCR法對(duì)基因連鎖分析描述正確的是可能發(fā)生基因重組B?檢測(cè)方法更為簡單可靠結(jié)果更為直接和準(zhǔn)確D家系成員可能不夠完整遺傳標(biāo)志雜合性所帶信息量有限目前用于基因診斷的遺傳標(biāo)志主要包括下列哪些形式的DNA變異單核苷酸變異短串聯(lián)重復(fù)序列限制性片段長度多態(tài)性點(diǎn)突變單核苷酸多態(tài)性關(guān)于STR,下列說法不正確的有STR大多位于基因組非編碼區(qū)最常見的是三核苷酸重復(fù)同卵雙生子的STR不同是繼RFLP之后第二代DNA遺傳標(biāo)志重復(fù)順序最多的是（CA）n、（GT）n基因診斷主要涉及哪些方面的技術(shù)準(zhǔn)確獲得足夠量樣品的技術(shù)轉(zhuǎn)基因技術(shù)基因敲除技術(shù)對(duì)樣品進(jìn)行結(jié)構(gòu)或含量分析的技術(shù)基因沉默技術(shù)符合RFLP技術(shù)的選項(xiàng)有目前主要用于多基因遺傳病的基因診斷需進(jìn)行足夠數(shù)量的家系成員分析重組的發(fā)生不影響診斷的準(zhǔn)確性被利用的限制性位點(diǎn)雜合率較高，可以提供基因連鎖的有用信息得名于核酸外切酶消化DNA分子產(chǎn)生不同長度的片段符合DNA芯片技術(shù)的有哪些選項(xiàng)實(shí)質(zhì)是一種基于RDB的技術(shù)高效、高通量且操作易于自動(dòng)化一次集成數(shù)量巨大的基因探針代表基因診斷的發(fā)展趨勢(shì)假陽性率比較高以核酸分子雜交為基礎(chǔ)的基因診斷方法有DNA芯片Northern印跡基因序列測(cè)定等位基因特異寡核苷酸探針雜交法PCR法結(jié)構(gòu)基因突變主要包括哪些基因重排基因擴(kuò)增點(diǎn)突變基因缺失基因表達(dá)異常符合SSCP（單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析）的選項(xiàng)有其靈敏度隨著檢測(cè)序列的增長而增大檢測(cè)對(duì)象長度以不超過300nt核苷酸為宜其檢測(cè)準(zhǔn)確率高于直接的核酸序列測(cè)定檢測(cè)對(duì)象可以是DNA分子檢測(cè)對(duì)象可以是RNA分子mRNA的相對(duì)定量分析方法主要包括紫外分光光度法點(diǎn)雜交狹線雜交RT—PCR法Northern印跡法名詞解釋基因診斷(genediagnosis)連鎖分析(linkageanalysis)限制性片段長度多態(tài)性(restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP)單核苷酸多態(tài)性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)5.核酸分子雜交(nucleicacidmolecularhybridization)連鎖不平衡(linkagedisequilibrium)聚合酶鏈反應(yīng)(polymerasechainreaction,PCR)擴(kuò)增片段長度多態(tài)性(amplifiedfragmentlengthpolymorphism,AFLP)短串聯(lián)重復(fù)序列(shorttandemrepeat,STR)反向點(diǎn)雜交(reversedotblot,RDB)產(chǎn)前基因診斷(prenataldiagnosis)植入前遺傳診斷(preimplantationgeneticdiagnosis,PGD)簡答題請(qǐng)簡述基因診斷的基本流程。簡述基因診斷的一般內(nèi)容。請(qǐng)簡述用于連鎖分析的遺傳標(biāo)志需具備的特點(diǎn).請(qǐng)簡述遺傳分析中用于直接診斷的代表性技術(shù)有哪些。試述內(nèi)源基因結(jié)構(gòu)突變的主要類型以及內(nèi)源基因結(jié)構(gòu)突變所致的疾病。（四）論述題試述基因診斷的特點(diǎn)及基本技術(shù)。試述PCR技術(shù)的原理、步驟及其應(yīng)用。試述基因診斷在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用.參考答案與提示（一）選擇題題號(hào)答案考察的知識(shí)點(diǎn)題號(hào)答案考察的知識(shí)點(diǎn)1C基因結(jié)構(gòu)的特異性分析2E基因診斷的特點(diǎn)3B基因診斷的前提4B獲得待測(cè)樣品的技術(shù)原理5B核酸分子雜交技術(shù)6CSNP（單核苷酸多態(tài)性）7BDNA指紋8D變性高效液相色譜分析9D內(nèi)源基因結(jié)構(gòu)突變10BPCR技術(shù)11D感染性疾病的基因診斷12E核酸分子雜交的原理13C法醫(yī)學(xué)基因診斷方法14ESouthern印跡法15CNorthern印跡法16D斑點(diǎn)印跡雜交17A組織原位雜交18BDNA芯片19ABDE基因診斷的常用技術(shù)20ABC間接診斷方法21ADE基因連鎖分析22ABCE基因診斷的遺傳標(biāo)志23BCSTR24AD基因表達(dá)產(chǎn)物定性定量分析25BDRFLP26ABCDDNA芯片27ABD基因診斷方法28ABCD內(nèi)源基因的結(jié)構(gòu)突變29BDE單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析30BCDEmRNA相對(duì)定量名詞解釋用分子生物學(xué)技術(shù)針對(duì)DNA和/或mRNA進(jìn)行定性、定量分析，通過分析這些遺傳信息分子的序列，從而在分子水平上確定疾病的病因，具高度特異性.利用與致病基因相連的某些基因，作為遺傳標(biāo)志，通過鑒定遺傳標(biāo)志的存在而判斷個(gè)體是否帶有致病基因。本法無需更多了解致病基因結(jié)構(gòu)及其分子機(jī)制,屬于間接診斷。指DNA序列上發(fā)生某個(gè)變異(如單堿基置換、少數(shù)堿基缺失或插入)后獲得或丟失了某一限制性識(shí)別位點(diǎn)，使DNA限制性酶解片段的長度發(fā)生變化，在人群中形成兩種或兩種以上的限制性類型，可以用作遺傳標(biāo)志。指基因組內(nèi)特定核苷酸位置上存在兩種不同的堿基，其中最少的一種在群體中的頻率不小于1%。SNP是一種最常見的可遺傳變異，是第三代遺傳標(biāo)志物。利用堿基互補(bǔ)配對(duì)，以已知的核酸片段作為探針，檢測(cè)樣本中是否存在及有多少與其互補(bǔ)的核酸序列，這是基因診斷最基本的方法,又稱為核酸分子探針技術(shù)。在人群中，某一RFLP或者主要存在于具有某一疾病基因的染色體上;或者主要存在于正常染色體上，這種非隨機(jī)的遺傳現(xiàn)象稱為連鎖不平衡.一種在體外利用酶促反應(yīng)獲得特異序列的基因組DNA片段或cDNA的專門技術(shù).根據(jù)樣品來源不同分為基因組PCR和反轉(zhuǎn)錄PCR兩類。PCR擴(kuò)增致病基因內(nèi)部或兩側(cè)與其緊密連鎖的特定STR，電泳檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物長度的多態(tài)性，從而快速作出診斷。指一種2-4bp的核心序列重復(fù)排列，又稱為微衛(wèi)星(microsatellite)。在人類基因組中分布廣泛，最常見的是二核苷酸重復(fù)，其次是三、四核苷酸重復(fù)。是改進(jìn)的等位基因特異性寡核苷酸(ASO)分子雜交技術(shù)。將針對(duì)各種突變和正常序列的ASO探針固定在雜交膜上，而將原來在ASO雜交體系中固定在膜上的PCR產(chǎn)物改為液相進(jìn)行雜交，從而能夠同時(shí)檢測(cè)多種突變。通過對(duì)胎兒羊水、絨毛或臍帶血等來源的DNA進(jìn)行基因型分析或染色體核型分析，達(dá)到診斷患病胎兒的目的，主要診斷對(duì)象是人類染色體病和單基因遺傳病.指對(duì)配子或移入宮腔之前的胚胎進(jìn)行快速的遺傳分析,篩選出健康配子或胚胎，以避免異常妊娠的一項(xiàng)技術(shù)。簡答題基因診斷的基本流程包括樣品的核酸抽提。目的序列的擴(kuò)增.核酸分子雜交。信號(hào)檢測(cè).基因診斷的一般內(nèi)容包括檢測(cè)個(gè)體的基因序列的特征。基因突變分析。測(cè)定基因的拷貝數(shù)。基因表達(dá)產(chǎn)物分析.檢測(cè)是否存在外源基因等。用于連鎖分析的遺傳標(biāo)志，需要具備三個(gè)特點(diǎn)不同個(gè)體之間存在高度的多態(tài)性。需要獲得足夠數(shù)量的家系成員樣本，以區(qū)分和確定遺傳標(biāo)志與致病基因之間的連鎖關(guān)系。遺傳標(biāo)志與致病基因相連鎖，而且兩者之間的距離越小越好，以盡量排除減數(shù)分裂中遺傳標(biāo)志與致病基因之間出現(xiàn)重組或交換而誤診.用于遺傳分析的代表性直接診斷技術(shù)主要有基因缺失或插入的診斷Southern印跡法PCR法點(diǎn)突變的診斷等位基因特異性寡核苷酸分子雜交反向點(diǎn)雜交變性高效液相色譜STR拷貝異常的診斷。5.內(nèi)源基因結(jié)構(gòu)突變包括點(diǎn)突變、缺失或插入突變、染色體易位、基因重排、基因擴(kuò)增等.突變?nèi)舭l(fā)生在生殖細(xì)胞，可引起各種遺傳性疾病；若發(fā)生在他細(xì)胞，可導(dǎo)致腫瘤、心血管疾病等。論述題基因診斷的特點(diǎn)為特異性高;靈敏度高；穩(wěn)定性高；診斷范圍廣，適用性強(qiáng)；臨床應(yīng)用前景好。常用技術(shù)包括核酸分子雜交技術(shù)，其方法主要有斑點(diǎn)印跡'Southern印跡、Northern印跡、原位雜交、等位基因特異寡核苷酸探針雜交；限制性內(nèi)切酶酶譜分析法；DNA限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)分析;PCR技術(shù)；DNA芯片；基因測(cè)序。2.PCR技術(shù)實(shí)際上是在模板DNA，引物和4種脫氧核糖核苷三磷酸存在的條件下依賴于耐熱DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)。其原理主要有幾個(gè)方面DNA合成需要引物，兩條互補(bǔ)鏈上都需要引物；DNA的復(fù)性與變性的原理；PCR技術(shù)的特異性取決于引物和模板DNA結(jié)合的特異性.耐高溫的DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和運(yùn)用。PCR全過程包括三個(gè)基本步驟，即雙鏈DNA模板加熱變性成單鏈(變性)；在低溫下引物與單鏈DNA互補(bǔ)配對(duì)(退火)；在適宜溫度下TaqDNA聚合酶催化引物3’8H端加入脫氧核苷酸(延伸).這三個(gè)基本步驟構(gòu)成的循環(huán)重復(fù)進(jìn)行，可以使特異性DNA的擴(kuò)增率達(dá)到數(shù)百萬倍。PCR技術(shù)的應(yīng)用分子生物學(xué)領(lǐng)域基因克隆；DNA序列測(cè)定；突變分析；基因重組；基因定量；鑒定轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列；轉(zhuǎn)座子插入位點(diǎn)的確定;檢測(cè)基因的修飾；臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域病原體診斷；遺傳病的基因診斷；器官移植；腫瘤診斷；法醫(yī)學(xué)；動(dòng)植物學(xué)的研究；其他領(lǐng)域如組織和群體生物學(xué)、古生物學(xué)等。