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文檔簡介

微生物(microorganism)因太小,一般用肉眼看不清楚的生物。這些微小生物包括:無細胞結構微生物學(microbiology)研究肉眼難以看清的稱之為微生物的生命活動的科學,分離和培養這 微生物組學(microbicgenomics) 平皿(Petridish) 防止空氣中微生物的污染。其英文名稱是為紀念其發明者RichardPetri。 體、半固體、液體3種。無菌技術(aseptictechnique) 富集培養(enrientculture)利用不同微生物間生命活動特點的不同,制定特定的環境條件,二元培養物(two—componentculture)數值孔徑(numericalaperture) 負染色(negative 使背景顏色加深而樣品沒有的染色法 細菌細胞壁(ceUWaUofbacteris) (20—80rim)和化學組分簡單,一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸。革蘭氏細菌的細胞壁由外 聚糖單體由肽與聚糖兩部分構成,其中的肽由四肽尾和肽橋構成,聚糖則由N—乙酰葡糖胺和N—乙酰胞壁酸以β—1,4糖苷鍵相互間隔交聯而成,呈長鏈骨架狀。C+細菌的四肽尾一般由L—Ala、D—Glu、L—LysD—Ala45Gly;C—細菌的四肽尾L—Ala、D—Glu、m—DAPD—Ala 外膜(outermembrane) 類物質,由類脂A、多糖和O—特異側鏈3部分構成,是C—細菌致病物質內毒素的成分。外膜蛋白(outermembraneprotein)C—細菌細胞壁外膜上的多種蛋白質成分,如脂蛋白和 分。其多糖骨架由N—乙酰葡糖胺和N—乙酰塔羅糖胺糖醛酸β-1,3糖苷鍵交替連接而成,連在后一氨基糖上的肽尾由L—Glu、L—Ala和L—Lys3個L型氨基酸組成,肽橋則由L—Glu一個氨缺壁細菌(cellwalldeficientbacteria)指在自然長期進化過程中或在菌種的自發突變中L型細菌(1formofbacteria) 菌落。特點:沒有完整而堅韌的細胞壁,細胞呈多形態;有些能通過細菌濾器,故又稱“濾過型細菌”;對滲透敏感,在固體培養基上形成“油煎蛋”似的小菌落(直徑在0.1mm左右); 新生細胞壁合成后,所得到的僅有一層細胞膜包裹著的圓球狀細胞,一般由G+細菌形成。原生質球狀體(sphaerost)又稱原生質球,人為條件下,用溶菌酶去除G-細胞壁或用青霉素抑制G-細菌細胞質膜(cytosmicmembraneOfbacteria) 側、包圍著細胞質的一層柔軟、脆弱、富有彈性的半透性薄膜,厚約?~8nm,由磷脂(占20%-間體(mesosome)細菌細胞中的一種由細胞質膜內褶而形成的囊狀構造,其中充滿著層狀或管狀細菌的細胞質(cytosmofbacteria)細菌細胞質膜包圍的除核區以外的一切半透明膠狀、細菌的內含物(inclusionbodyofbacteria)細胞質內形狀較大的顆粒和泡囊狀構造,包括各種聚—β—羥丁酸(poly—βhydroxybutyrate,PHB)存在于某些細菌細胞質內的顆粒狀內含物,異染粒(metachromaticgranules)又稱迂回體或捩轉菌素,是無機偏磷酸鹽的聚合物,具有貯藏羧酶體(carboxysome)1,5—二磷CO2:固定中起著關鍵作用。核區(nuclearregion)又稱核,指原核生物所特有的無核膜結構、無固定形態的原始細胞DNA芽孢(endospore)某些細菌在其生長發育后期,在細胞內形成的一個圓形或橢圓形、厚壁、含水滲透調節皮層膨脹學說(osmoregulatoryexpandedcortextheory)解釋芽孢耐熱機制的一個較伴孢晶體(parasporalcrystal)蘇云金芽孢桿菌等少數芽孢桿菌在其形成芽孢的同時,會在芽孢 細菌鞭毛(flagellaofbacteria) 菌毛(fimbriae)一種長在細菌體表的纖細、中空、短直、數量較多的蛋白質附屬物,具有使菌性毛(pili,pili) 僅著生一至少數幾條性毛。多見于G—細菌的雄性菌株上,其主要功能是向雌性菌株傳遞遺傳物真核微生物(eukaryoticmicrooganisms)凡是細胞核具有核膜、細胞能進行有絲、細胞質中 管,其周圍則有9個微管二聯體圍繞一圈,故真核生物的鞭毛又稱“9+2”型鞭毛。 核小體(nucleosome)構成真核細胞染色質的基本單位。其結構為組蛋白八聚體,由H2A、H1,與連接DNA相結合,鎖住了核小體的,從而保持其結構穩定。核仁(nucleolus)細胞核中一個沒有膜包裹的圓形或橢圓形小體。每個核中有一至數,富含蛋白RNA,rRNA核基質(nuclearmatrix)舊稱核液。一種充滿于細胞核空間由蛋白纖維組成的網狀結構,具有支細胞器(organelle)細胞質內具有一定形態、構造和功能的微型器,自,一般有膜包裹,如內質細胞骨架(cytoskeleton)3內質網(endosmicreticulum)細胞質中一個與細胞基質相、但彼此相通的囊腔和細管系核糖體(ribosome)是一種無膜包裹的顆粒狀細胞器,具有合成蛋白質的功能。外層為蛋白質,高爾基體(Golgiapparatus)是一種由數個平行堆疊的扁平膜囊和大小不等的囊泡所組成的膜聚溶酶體(1ysosome)一種由單層膜包裹、內含多種酸性水解酶的囊泡狀細胞器,具有進行細胞內微體(microbody)一種由單層膜包裹、與溶酶體相似的球狀細胞器。真核微生物的微體主要含一 ATP合成酶復合體)以及4種脂蛋白復合物(呼吸鏈成分)。粒體的基質內含有TCA酶系、一套半自主的雙鏈環狀DNA以及70S核糖體。 器,只存在于藻類和綠色植物中。一般由葉綠體膜、類囊體和基質3部分構成。基質內含 進行半自主的雙鏈環狀DNA1)~及70S核糖體。主要元素或大量元素(macroelement) 微生物胞干重的9%以上由碳、氫、氧、氮、磷、硫鉀、鈣、鎂、鐵等少數幾種元素組成,將這些微生物生長需要量相對較大的元素稱為主要元素。微量元素(traceelement或microelement) 微物細胞需要量很小的元素,包括錳、鋅、銅、鈷、鎳、硒等。.碳源(sourceofcarbon) 氮源(sourceofnitrogen) 牛肉浸膏(beefextract) 酵母浸膏(yeastextract) 生長因子(growthfactor)微生物生長所必需且需要量很小,而微生物自身不能合成或合成量不足水活度值(water。activity,aw0.98 原養型(prototroph)與自然發生的同種其他一樣,具有相同營養需求的微生物培養基(culturemedium)由人工配制的、適合微生物生長、繁殖或產生代謝產物的營養基質。復合(天然)培養基(complexmedium)含有化學成分尚不完全清楚或化學成分不恒定的天然有機物的培養基,也稱非化學限定培養基(chemicallyundefinedmedium)。合成培養基(synthetic.medium)由化學成分完全了解的物質配制而成的培養基,也稱化學限定培養基(chemicallydefinedmedium)。完全培養基(completemedium):是能滿足一切營養缺陷型菌株營養要求的培養基,是天然或半合 半固體培養基(semisolidmedium)在液態培養基中加入凝固劑的量比固體培養基中的少而制成的半液體培養基(1iquid 基礎培養基(minimummedium)加富培養基(enrientmedium)在基礎培養基中加入某些特殊營養物質,用于培養營養要求比較鑒別培養基(differentialmedium) 選擇培養基(selectivemedium) 透過屏障(permeabilitybarrier) (外)進行的過程促進擴散(facilitateddiffusion) (passivetransport) 主動(activetransport) 初級主動(primaryactivetransport) 能化膜(energizedmembrane) 次級主動(secondaryactivetransport) 某種物質與質子通過同一載體以相反方向進行的次級主動 基團轉位(grouptranslocation) Na+,K+一ATP酶(Na+,K+一ATPase) 胞內Na+‘泵”出胞外,而將胞外K+‘泵”入胞內,也稱Na+,K+一泵。ATP結合盒式轉運蛋白(ATP—bindingcassettetransporters,ABCtransporters) 利用ATP能,簡稱ABC轉運蛋白。膜泡(membranevesicletransport) 合物通過ABc轉運蛋白進入細胞。分解代謝(catabolism)合成代謝(anabolism)是指利用小分子物質在細胞內合成復雜大分子物質,并消耗能量的過程。 乙醇發酵(alcoholicfermentation) Enterobacteriaceae)中經EMP途徑,或者某些細菌(如運動發酵假單胞菌)中經ED途徑降解成底物水平磷酸化(substrate—levelphosphorylation) 的生成,如EMP途徑中的甘油酸一1,3一二磷酸和磷酸烯醇式酸。這些高能化合物可以直接乳酸發酵(1acticacidfermentation) 在乳酸脫氫酶的作用下被NADH還原為乳酸,終產物只有一種乳酸,稱為同型乳酸發酵(1lomolacticfermentation);葡萄糖經PK、HK或HMP途徑降解為酸,代謝終產物除乳酸外,還有乙醇或乙酸,故稱異型乳酸發酵(heterolacticfermentation)。 程。以分子氧作為最終電子受體的稱為有氧呼吸(aerobicrespiration),以氧化型化合物作為最終電子受體的稱為無氧呼吸(anaerobicrespiration)。電子傳遞系統(electrontransportsystem) 受體,除了泛醌之外,電子載體在膜上的排列順序為還原電位最負到最正。一般電子傳遞系統的成及電子傳遞方向為:NAD(P)FPFesCoQ(Qcytb_Cytc_CytaCyta3。氧化磷酸化(oxidativephosphorylation) 在糖酵解和三過程中,形成的NAD(P)H和巴斯德效應(Pasteureffect) 又稱硝酸鹽呼吸(nitraterespiration),以硝酸或亞硝酸鹽為電子受體進行的無氧呼吸,此過程中硝酸鹽還成氣態產物NO、N2。同化型硝酸還原(assimilativenitratereduction) 異化型硝酸還原(dissimilartivenitratereduction) Stickland反應(Sticklandreaction) 每分子氨基酸產生1個ATP。 _、HS、S0、H和Fe 不產氧光合作用(anoxygenicphotosynthesis)又稱環式光合磷酸化,光合細菌所特有。光能驅ATP,還原力來產氧光合作用(oxygenicphotosynthesis)又稱非環式光合磷酸化,綠色植物、藻類和藍細菌所I(PsIa心Ⅱ(PsⅡH’,生成還原力;光反應中心Ⅱ(PsⅡ)由水的光解產生氧氣和電子,PsIATP。紫膜光合磷酸化(photophosphorylationbypurplemembrane) 用,將質子泵出紫膜外,從而形成紫膜內外的質子梯度差(質子動勢),驅使ATP的形成。代謝補償途徑(replenishmentpathway) 或代謝物回補順序(anapleroticsequence),是指能補初級代謝(primarymetabolism) 次級代謝(secondarymetabolism) 變構效應(allosterism)別構酶的活性可以被小分子激活劑或者抑制劑改變,激活劑或者抑制劑反饋抑制(feedbackinhibition) 每個代謝途徑都至少有一個限速酶(pacemakerenzyme),催酶合成阻遏(repressionofenzyme 變阻遏蛋白的構象,因此可以與子部位結合。這樣mRNA的合成終止,蛋白質合成不能發生。酶合成誘導(inductionofenzymesynthesis) 二(binaryfission) 分批培養(batchculture)是指微生物在封閉系統中進行的培養,培養過程中不對培養基進行更 二次生長(diauxicgrowth) 比生長速率(specificgrowthrate) 根據培養器內微生物的生長密度,并借光電控制培養液流速,以取得菌體濃度高,生長速連續培養(continuousculture)連續培養是指通過一定的方式使微生物能以恒定的比生長速率生補料分批培養(fed-batchculture):一種介于分批培養和連續培養之間的培養方式。它是在分平板計數或菌落計數(tecountorcolonycount) 菌落形成單位(colonyformingunit) 石炭酸系數或酚系數(phenolcoefficient)在一定溫度下將某種劑與試驗細菌10rain保防腐(antisepsis)采用某些化學或物理方法防止和抑制微生物生長的措施。防腐能防止食物腐防腐劑(antiseptic)用于防腐的化學制劑。防腐劑的毒性一般小于劑,以避免對動物或 十倍減少時間(decimalreductiontime,D) 特定溫度下殺死某一樣品中90%微生物或孢子 原微生物的方法稱為巴斯德法。較老的做法是63℃處理30rain;現在使用巴氏瞬間法 即72℃處理15s,然后迅速冷卻的方法。紫外輻射(UVradiation)波長為10—400nm(通常采用260nm)的高能輻射。紫外輻射有較強的致 抗藥性(drug) 致細胞病變效應(cytopathiceffect,CPE) 效價(title)稱滴度,以單位體積(mL)待測樣品液中所含的性單位的數目(1U/mL)。 劑量,其值以50%試驗單元出現反應的稀釋液的稀釋度的倒數的對數值表。中和作用(neutralization)特異性的抗體與毒粒作用,使其失去性、抑制的繁 的細胞外顆粒形式,亦是的性形式。Dulbacco等(1985),毒粒是一團能夠自主的遺傳物質(DNA或RNA),它們被蛋白質外殼包圍,有的還有一附加膜(包膜) (peplomer), 負鏈RNA(minusstrandRNA) 將從毒粒或的細胞中分離純化的核酸實驗性地導入 一步生長試驗(one—stepgrowthexperiment) 隱蔽期(eclipseperiod) 利用細胞的內吞功能進入細胞 mRNA,為利用逆轉錄酶進行DNA合成的模板。 干擾缺損(defectiveinterferinges) 條件缺損(coditionallydefectivees) 溫和噬菌體(temperatephage) 整合于細菌或以質粒形式存在的溫和噬菌體組溶源性細菌(1ysogeniecbacteria) 從內部融合(fusionfromwithin) 半數致死劑量(50%lethal 半數劑量(50%binfectivedose,IDso)使半數試驗宿主發生的劑量半數組織培養劑量(50%tissuecultureinfectivedose,TCIDso)使半數組織培養物發生包涵體(inclusionbody)細胞內出現的特異性染域。不同所形成的包涵體在細致病性(pathogenicity)特定的微生物種引起宿主疾病的潛在能力,或致病的狀態或特性,是病RNA(saliteRNA,satRNA) 必須依賴于輔助進行的小分子單鏈RNA片段,它被 一類低相對分子質量侵染性的RNA,它們沒有蛋白質外殼,亦無編碼功能,在細胞內利用宿主的依賴于DNA的RNA聚合酶Ⅱ進行,大多數類RNA都呈高度堿基配對區與 一種蛋白質侵染顆粒(proteinaceousinfectionusparticle,PrP),系引起哺蛋白PrP‘構型發生改變所產生的同分異構體。62.毒力(virulence) 組(genome)指存在于細胞或中的所有,由于現在發現許多非編碼序列且有重要的功蛋白質的結構、調控序列以及目前功能尚不清楚的DNA序列。擬核(nucliod)大腸桿菌的組為雙鏈環狀的DNA分子,在細胞中以緊密纏繞成的較致密的遺傳豐余(geneticredundancy)酵母組全序列測定完成以后,在其組上還發現了許多較DNA質粒(plsmid)細胞中除以外的一類遺傳因子,一種獨立于外,能進行自主的轉座因子(transposableelement)也是細胞中除以外的一類遺傳因子,位于或質粒DNA質粒的不親和性(patibility)如果將一種類型的質粒通過接合或其他方式(如轉化)導人某么這兩種質粒便是不親和的(patible),它們不能共存于同一細胞中。質粒的這種特性稱為不親和性(patibility)。 突變(genemutation) 堿基的缺失、插入或置換,而導致的遺傳變化稱為突變(genemutation),其發生變化的范圍很小,所以又稱點突變(pointmutation)或狹義的突變同義突變(same—sensemutation) 錯義突變(mis—sensemutation)是指堿基序列的改變引起了產物氨基酸的改變。有些錯義突變無義突變(nonsensemutation)是指某個堿基的改變,使代表某種氨基酸的子變為蛋白質合移碼突變(frameshiftmutation)由于DNA1~2表型(phenotype)是指可觀察或可檢測到的性狀或特征,是特定的型在一定環境條件下型(genotype)是指在遺傳物質中的信息,也就是它的DNA堿基順序。上述4種類型營養缺陷型(auxotroph)一種缺乏合成其生存所必須的營養物的突變型,只有從周圍環境或培養形態突變型(morphologicalmutant)是指造成形態改變的突變型,包括影響細胞和菌落形態、顏抗藥性突變型(resistantmutant)由于突變使菌株對某種或某幾種藥物,特別是抗生素,產3“r”表示。條件致死突變型(conditionallethalmutant) 發生突變是致死的(例如,為DNA所必需的),因而也就不可能得到這些的突變 是很低的,一般為10—6~10—l0。誘發突變(inducedmutation)并非是用誘變劑產生新的突變,而是通過人為的方法利用物理化學或Ames試驗:利用細菌營養缺陷型的回復突變來檢驗環境或者食品中是否存在化學劑的簡便有回復突變(reversemutation或backmutation) 切除修復(excisionrepair)又稱暗修復。是細胞內的主要修復系統,不依賴可見光,只通過酶DNADNAI重組修復(binationrepair)這是一種越過損傷而進行的修復。是通過后,經交DNASOSSOSrepair)DNA 胞的DNA或RNA通過載體的轉移到另一個細胞中。普遍性轉導(generalizedtransduction) 局限性轉導(specialized 遺傳轉化(genetictransformation) 是指同源或異源的游離DNA分子(質粒和DNA)被自 高頻重組菌株Hfr:該細胞的F質粒已從游離態轉變為整合態,當與F-菌株接合時,發生重組HFT:指在局限轉導中,若對雙重溶源菌進行誘導,就會產生含有一半左右的局限轉導噬中斷雜交(interruptedmating)技術 酵母菌的2μm質粒(2μmsmid) 是封閉環狀的雙鏈DNA分子,周長約21xm(6kb左右),是酵 抗阻遏和抗反饋突變型(repressionresistantand~edbackresistantmutants) 一個新細胞的技術。主要包括原生的、原生的融合、原 再生和融合子選擇等電融合技術(electrofusion)是一項有效促成原生融合的。融合過程首先是原生在子(operon)原核生物細胞中,功能相關的組成子結構,由區同一個或幾個結構,形成一個在結構上、功能上協同作用的整體,作為表達的協同單位,受同一調 DNAShuffling 1994年的Stemmer一個全新的人工分子進化技術,該技術能模擬基本原理:先將來源不同但功能相同的一組同源,用DNA核酸酶Ⅰ進行消化產生隨機小片段,2~3(經變形后可互為引物)PCR③克隆并選擇正突變體(D),并將正突變體的重組片段作新一輪的體外重組。DNAshuffing螺旋—轉角—螺旋(helix—turn—helixHTH)DNA,HTH DNA結合蛋白的另一種結構形式,它是一種含鋅離子的蛋白亞結構。其特點溝中與DNA相互作用,在蛋白質與DNA的結合作用中蛋白質上至少存在兩種這樣的“指”。 指,“亮氨酸拉扣”本身不與DNA作用,而是保持另外兩個。螺旋在正確的位置與DNA結合。 起始區的DNA區段,RNA聚合酶結合到這一區段后才開始轉錄。 mRNA分解代謝物阻遏(cataboliterepression) 鳥苷四磷酸(ppGpp)和鳥苷五磷酸(pppGpp)當細菌處于氨基酸饑餓的緊急狀態時,導致出現空載也會打開一些合成氨基酸的,以應付這種緊急情況。ppGpp和pppGpp不是只影響一個或幾個σ因子(sigmafactor)幫助RNA聚合酶酶識別起始區啟動子的蛋白質,具有起始轉作用。σ因子自身并無催化活性,在轉錄之前與酶結合熱激應答(heatshockresponse)生物體受熱激誘導所進行的一種轉錄和翻譯的調控。如大腸桿菌生長在較高的溫度下(如42-50℃),某些則迅速表達,誘導產生熱激蛋白,這種現象稱為大腸信號傳導(signaltransduction)通過信號途徑在細胞內或細胞間傳遞信息的過程。例如:細菌 接受甲基趨化性蛋白(methylacceptingchemotaxisproteins,簡稱 區,它是遺傳信息翻譯成多肽鏈起始于mRNA上的核糖體結合序列。 在RBS中。功能是與核糖體16SrRNA的3,端互補配對,使核糖體結合到mRNA上,以利翻譯的起 子的偏愛性,對應的tRNA豐富或稀少的子,分別稱為偏愛子(biasedcodons)或稀 反義RNA(antisenseRNA)具有調節表達功能的RNA。它具有與另一“靶”RNA或DNA互補達,調節作用主要在翻譯水平,也包括少數在轉錄或DNA前引物加工水平。 分泌蛋白質N末端一段由15—30個疏水氨基酸殘基組成的肽。分泌蛋信號識別顆粒(signalrecognationparticleSRP)由6RNA工程(geneengineering) 或重組DNA技術( 是指生物組各DNA片段的克隆總體。文庫中的每二個克息(即全部DNA序列)。一般適用于原核微生物的分離。CDNA文庫(cDNAlibrary) 含一種mRNA信息。一般適用于真核微生物的分離。 穿梭質粒載體(shuttlesmidvector) 附加體質粒(episomalsmid) 的起點以及一個作為酵母選擇標記的URA3(尿嘧啶核苷酸合成酶),這種質粒既可在質粒(replicatingsmid) 酵母穿梭質粒載體的一種,質粒含有來自細菌質粒pBR322的成酶1),能在大腸桿菌或酵母細胞中,重組質粒導入酵母細胞中可獲得中等拷貝數的質 酵母穿梭質粒載體的一種,質粒含有來自大腸桿菌質粒pBR322及來自酵母的URA3,它既可以作為酵母細胞的選擇標記,也可與酵母DNA進行同源重合到酵母上,成為DNA的一個片段。 于天然但能在宿主細胞中像正常一樣、分離和傳遞的DNA結構。列以及選擇標記(如TRPl和URA3等)構成的線狀DNA。是一類目前能容納最大外源DNA片段人工構建的載體。細菌人工(bacteriaartificialchromosome,BAC),是以F因子為基礎的載體,容納的插入片段可達300kb。由于是低拷貝質粒,克隆DNA較穩定,沒有酵母人工的嵌 或簡稱為限制性酶(restritionenzyme),是生態系統(ecosystem) 硫化作用:還原態無機硫化物如H2S,SFeS2等在微生物作用下進行氧化,最后生成硫酸及其鹽類的 物。耐酸微生物能在好酸條件下生長,而最適PH接近中性。 生長最適鹽濃度在0.2~0.25mol/L以上的微生 編碼難降解有機化合物降解酶的質粒 生物膜法(biofiltrationprocess) 生物修復(生物整治)(bioremediation)用生物學介導的方法,主要利用微生物、植物從特殊環境中(尤其是原位)除去或降解污染物從而消除污染、修復污染環境的工程化處理過程。有原位進化(evolution)是生物與其生存環境相互作用過程中,其遺傳系統隨時間發生一系列不可逆的系統發育(或系統發育學)(phylogeny.)指研究各種(類)生物間的親緣關系及它們進化的歷史。分類學(Taxonomy)物分類的科學,它主要涉及分類、命名和鑒定。系統學(systematics)在進化論指導下,通過分類學的基本工作來研究系統發生,推斷進化譜系表型特征(pheneticcharacterisUts)主要指形態學(包括結構)、生理生化學、生態學及行為習遺傳型特征(geneticcharacteristics)指反映及產物分子結構的特征印跡序列(signature 分子系統樹(molecularphylogenetictree) 鑒定(identification或determination) 分類單元(taxon,復數taxa) 模式菌株(typestrain) 核酸雜交(nucleicacidhybridization) 將來自兩種不同菌株的DNA分子加熱變性成單鏈,在核酸探針(nucleicacidprobe) 數值分類法(numericaltaxonomy) 培養物(culture)一定時間一定空間內人工培養的生物細胞群或生長物。例如:微生物的斜面培養物(pureculture)。 型(form或type) 子實體(fruitingbodies molecularchaperninATP病原微生物(pathogenicmicroorganism) 條件致病菌(opportunisticpathogen) 非特異性免疫(non—specificimmunity) 補體(complementsystem) 經典途徑(classicalpathway,CP) 由抗原抗體復合物結合于補體成分C1上,自C1到C9依次替代途徑(alternativepathway,AP) 凝集素途徑(1ectinpathway) 中性粒細胞(neutrophilicgranulocyte),又稱多形核白細胞(polymorphonuclearleucocyte,自然細胞(naturalkillercell,NK) 能直接靶細胞的非T非B淋巴細胞。 免疫應答(immune 免疫細胞對抗原分子的識別、活化、分化和效應過程特異性免疫(spesificimmunity) 摧毀、滅活相關抗原的防御能力,又稱獲得性免疫(acquiredimmunity)。免疫系統(immunesystem) 中樞免疫(centralimmuneorgan) 周圍免疫(peripheralimmuneorgan) lekocyte)參與免疫應答或與免疫應答有關的細胞,主要包括淋巴細胞、粒細胞和肥淋巴細胞(lymphocyte)廣泛存在于免疫組織,淋巴液和血液的一類免疫細胞,按照表面分子標TB細胞和第三類(非TB)淋巴細胞。抗原(antigen,Ag)能誘導機體產生體液抗體和細胞免疫應答,并能與抗體和致敏淋巴細胞在體免疫原性(immunogenicity)抗原在體內激活免疫系統,使其產生抗體和特異效應細胞的特性。免疫反應性(immunoreactivity)抗原能與相對應的免疫應答產物(抗體及致敏淋巴細胞)發生特免疫原(imunogen)具有免疫原性和反應原性的抗原,又稱完全抗原(completeantigen)。半抗原(hapten)只有反應原性而沒有免疫原性的抗原,又稱不完全抗原(pleteantigen 的化學,又稱表位epitope。 patibilitycomplex,MHC) MHCI類抗原和MHCⅡ類抗原以及一些其他分子。MHC抗原是機體的自身標志性分子,參與T細胞對抗原的識別及免疫應答中各類免疫細胞間的相互作用,也限制NK細胞不會誤傷自身組織,是機體白細胞分化抗原(clusterofdifferentiation,CD) 面分子,有的在不同階段出現或,有的持續終生。CDs具有各自不同的多種功能。 B淋巴細胞(Blymphocyte) 胸腺依賴性抗原(thymusdependentantigen,TDAg) 輔助的抗原。絕大多數天然抗原屬于TD抗原。胸腺非依賴性抗原(thymusindependent 抗體依賴性細胞介導的細胞毒作用(antibodydependentcell—mediated 靶細胞的,稱抗體的ADCC作用。B細胞抗原受體復合體(B—cellantigenreceptor BCRC由B細胞膜表面IgM和IgDT淋巴細胞(T T細胞抗原受體復合體(T—cellantigenreceptorcomplex,TCRC) 由T細胞膜表面特異性抗 由活化T細胞產生的特異或免疫炎癥抗原提呈細胞(Agpresentingcell,APC) 為抗原提呈細胞,又稱輔助細胞(accessorycell),主要包括樹突狀細胞、單核巨噬細胞和B細 MHC限制性(MHC 輔助性T細胞(helperTlymphocyte,TH) 分泌多種細胞因子促進免疫應答,對B細胞產生抗體及細胞毒T細胞的起輔助作用。細胞毒性T細胞(cytotoxicTlymphocyte,CTL) 自身免疫病(autoimmunedisease) 宿主抗移植物反應(hostversusgraft 移植物抗宿主反應(graftversushostreaction,GVHR) 獲得性免疫缺陷綜合征(acquireddeficiencysyndrome,AIDS) 腫瘤特異性抗原(tumorspecificantigen,TSA) 原,只有相對特異性。如胚胎性抗原,相關抗原等淋巴因子活化的細胞(Lymphokineactivatedkillercell,LAK) 的淋巴細胞與白細胞介素2(IL—2)共同培養時,可誘導出殺細胞活性,稱為淋巴因子活化的 單克隆抗體(monoclonalantibody) 由單個B細胞增殖所產生的抗體,其遺傳背景完全一致,因 沉淀反應(precipitationreaction) 免疫熒光技術(immunofluorescencetechnic) 酶聯免疫吸附測定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA) 人工免疫(artificialimmunization) 人工自動免疫(artificalactiveiummunization) 微生物工業(microbialindustry) 利用微生物或微生物的某些組分進行生產產品或 后處理(downstreamproeessing) 下游技術(downstreamofbioteehno'ogy) 固定化細胞發酵(fermentionofimmobilizedcell) 混合培養物發酵(mixedculturefermentation) 上分離純化的菌種,共用同種培養基發酵,可稱為限定混合培養物發酵(definedmixed 生物制品(biologicproducts)根據免疫學原理,大規模地采用微生物或其部分組成成分,進行二肽甜味素(aspartame)LL150微生物(microbialpesticide) 單細白(singlecellprotein,SCP) 菌、絲狀真菌、酵母、藻類中的許多種都可用來生產SCP,但主要還是用酵母生產飼料SCP。植物促生根際菌肥(ntgrowthpromotingrhizobacteria,PGPR) 貧礦石、尾礦石、礦渣或難采礦石中的所需金屬 微生物DNA(microbialDNAChip) L—多巴黑色素(L—Dopamelamin) L型:由英國李斯德研究的一種自發突變而形成的細胞壁是缺損的細菌,它的細胞膨大,對滲F'因子:當Hfr菌株內F因子不正常切割而脫離核組時,可重新形成游離的,但攜帶一小段染莢膜:capsuleS-R變異:SRBOD5:20℃下,1L污水所含的有機物(主要是有機碳源),在進行微生物氧化時,5日內消耗的分子氧的毫克數。BOD(biochemicaloxygendemand):即“生化需氧量”或“生化耗氧量”,又稱生物需氧量,指在1L中溶解氧毫克數(mg/L);一般標準測定條件:20℃、5BOD5(5COD(chemicaloxygendemand):即化學需氧量,是表示水體中有機物含量的一個簡便的間接指標,K2Cr2O7CODCrTOD(totaloxygendemand):即總需氧量,指污水中能被氧化的物質(主要是有機物)在高溫下燃DO(dissolvedoxygen):即溶解氧量,指溶于水體中的分子態氧,是評價水質優劣的重要指標SS(suspendsolid):即懸浮物含量,指污水中不溶性固態物質的含量TOC(totalorganiccarbon):即總有機碳含量,指水體內所含有的有機物中的全部有機碳的量的生活方式(可分可合,和比分好 成狂犬,進行預防接種;證實發酵是由微生物引起的;創立巴斯德法等。柯赫對病原細是遺傳學上的爭論問題,使得微生物這樣一種簡單而又具完整生命活動的小生物成了生物學研究15X30x)來進一步光學顯微鏡的分辨率受到光源波長及物鏡性能的限制,在使用最短波長的可見光(4.50nnl)0.18μm為0.25mm1000~1500①是物抗逆性和休眠的生物學機制的良好材料。②是細菌分類、鑒定的重要指標。③有利于提高菌種篩選效率。④有利于菌種的長期保藏。⑤為比較各種滅菌方 載玻片上,以實現固著鞭毛的作用。c0:進行自養生活,有有機物時利用有機物進行異養生活,ABB (microbiologicalassay)對樣品中維生素或氨基酸進行定量。試設計實驗利用某微生物 樣品維生素B他的含量進行分析。B12,但含有過量其他營養物質的培養基分裝于一系列試管,分別定量接入用以微生物生長量(如測定B12EMB培養基含有伊紅和美藍兩種作為指示劑,大腸桿菌可發酵乳糖產酸造成酸性環境時,這兩酶Ⅱc3IHPrⅡaⅡb與位于細胞膜上的疏水性酶Ⅱc相結合。酶Ⅱ將一個葡萄糖進入胞內,磷酸烯醇式酸(PEPIHPrPTsAABC與ABC轉運蛋白結合,借助于ATP水解釋放的能量,ABC轉運蛋白將被物質轉運進入胞內。B差在過程中,被物質與質子一起通過透過酶進入細胞。C被物質通過ABC轉運蛋白系統和通過透過酶進入細胞的區別在于能量來源不同,前者依靠ATP水解直接偶聯物質,后者依 2 NAD(P)FP(Fe·sCoQQcytb—Cytc—Cyta—cytaNO—、N0—、SO2—、SO一 2 底物水平磷酸化,發酵過程中往往伴隨著一些高能化合物的生成,如EMP途徑中的1,3一二磷酸三過程中,形成的NAD(P)H和FADH,通過電子傳遞系統將電子傳遞給電子受體(氧或其他氧化性化合物),同時偶聯ATP合成的生物過程。 化能自養微生物氧化無機物而獲得能量和還原力。能量的產生是通過電子傳遞鏈的氧化磷酸化形OHH+H 量的能量被利用。亞鐵的氧化僅在嗜酸性的氧化亞鐵硫桿菌(Thiobacillusferrooxidans)中 行了較為詳細的研究。在低pH環境中這種細菌能利用亞鐵氧化時放出的能量生長,在該菌的呼吸鏈中發現了一種含銅的鐵硫菌藍蛋白(rusticyanin),它與幾種cytc和一種cyta,氧化酶構成ATP。 PsI,ATP2NAD+生成2ATPATP。35—10)。 UDP(M—②MUDP“ParkUDPN天冬氨酸→(天冬氨酸激酶)→天冬氨酸磷酸→天冬氨酸半醛(→賴氨酸)→(高絲氨酸脫氫酶→高絲氨酸→蘇氨酸(甲硫氨酸5—13)。為了3 GT-t0((1g3000000—(1gl)×12.5/0.301≈269(min)≈4.5(h)答:最多能放4.5h封閉系統中微生物的生長經歷遲、對數期、穩定期和衰亡期等4個生長時期在遲中細胞體積增大,細胞內RNA、蛋白質含量增高,合成代謝活躍,細菌對外界不良條件零,進入穩定期。穩定期中活細菌數最高并保持穩定,細菌開始糖原等內含物,該期是發酵 時期,因此如果及時采取措施,補充營養物或去除代謝物或改善培養條件,可以延長穩定期以獲嗜冷菌生長的溫度范圍是0—20~C,最適生長溫度為15℃;嗜溫菌生長的溫度范圍是15—45℃,最適生長溫度為20~45℃;嗜熱菌生長的溫度范圍是45~80~C以上,最適生長溫度為 65℃;嗜熱菌生長的溫度范圍是80℃以上,最適生長溫度為80~113℃,低于55℃通常不會和脂肪酸,能在低溫下保持半流質狀態。當溫度高于20cC時,細胞膜被破壞,細胞內組分流出。表6— 抗菌藥物的作用機 作用機D

D—丙氨酸的位置與轉肽酶結合,并將酶滅活,肽鏈之

30SmRNA

30StRNA

50S

抑制蛋白質合成:與細菌核糖白體的50S亞單位相結合,抑制肽酰基轉移酶,影響核糖白體移位過程,妨礙肽鏈增長,抑制細菌利福平 抑制核酸合成:通過結合和抑制DNA依賴的RNA聚合酶阻斷RNA合抗 磺胺類藥謝

組成部分對氨基苯甲酸的結構類似物,因而磺胺能細菌葉酸的合成。磺胺對細胞無毒性,因為人缺乏從對氨基苯甲酸合成葉酸的結構簡單,獨特的繁殖方式,細胞內寄生,生命形式的二重性分類原則,包括形態、毒粒結構,組、、化學組成在內的毒粒性質,的抗原性質及生物學性質。命名規則:分類等級、“種”及種名,屬、科、亞科方法依據;的測定:物理顆粒計數,包括噬菌斑、蝕斑測定和終點法的性測定的鑒定:根據的生物學性質、理化性質、免疫學性質和分子生物學性質進行的鑒定1,吸附是表面蛋白與細菌受體的特異性結合,導致附著于細胞表面,這是啟炎的正鏈RNA直接進入細胞質,而其他大多數是以核酸蛋白復合物形式進入細與的酶,RNA或大分子合成所需要的其他細白等有關)和依賴于的(由組不完全的缺損引起,這類因一個或多個必需有缺損,喪失了能,無論它們允許還是非允許細胞,都不能完成。③受染細胞內有組持續存在,但并無毒顆粒產生而且受染細胞也不會破壞BC,噬菌體釋放對細胞的影響:細胞表面免疫學性質的改變,細胞膜失去穩①的致細胞病變效應:是產物的毒性作用所引起,或的必要步驟RNA)、對宿主細胞翻譯抑制(mRNA;大量mRNA競爭有限的核糖體或MRNA較細胞對核糖體有更高的親和力,從而抑制細細胞結構或蛋白;細白質合成被印制的次級效應);③對細胞結構的影響:對宿主細胞;:有核酸組,依賴輔助,特異性外殼殼體化朊:蛋白質侵染顆粒、無核酸,為亞急性海綿狀腦病的病原因子 、RNA、類和DI顆粒的性質比較見表7—3DI病類毒是是是否否是否否輔助外殼殼體是否是否是是是與輔助序列同源是否否RNA低低高高 制而仍然是由編碼的一種正常蛋白質(PrP)的兩種異構體PrPc(存在正常組織中)

因為微生物組小,便于測定和分析,可從中獲取經驗改進技術方法,從而大大加快了人類組計劃的進展。此外,微生物組包含著原核生物和真核生物,具有一定的代表性。第一個的自由生活的生物是流感桿菌,第一個的真核生物是釀酒酵母,第一個的自養生活的 修復作用。一般在紅光下操作,在中培養。在紫外線照射時,盛菌液的培養皿應置于磁力在細菌細胞中,均以環狀形式存在的DNA和質粒DNA,在質粒提取過程中發生了什么變由于DNA分子比質粒DNA分子大得多,在提取過程中易于斷裂成大小不同的分子片段,DNA一種的預期結果。設想有下列條件和材料可以利用:A合適的突變株和選擇培養基。BDNase(一種降解露DNA分子的酶)。C兩種濾板:一種能夠持留細菌和細菌,但不能持留游離的DNA分子;另一種濾板只能持留細菌。D一種可以插入濾板使其分隔成兩個空 間的玻璃容器(如U型UHfr~F—和F’xF—雜交得到的接合子都有性菌毛產生嗎?它們是否都能被M13噬菌體呢?HfrxFF—,無性菌毛產生;F+xF—得到的接合子有性菌毛產生,能被M13噬菌體,因為M13的侵染途徑是性菌毛。DNA數誘變劑具有性。Ames實驗利用一組組氨酸營養缺陷型的回復突變來檢驗各種不同環境和食his-突變朱后形成的回復突變雖然乳糖于是典型的負控誘導系統.在環境中如果有乳糖或類似物,就可誘導轉錄,但是果沒有CAPcAMP 正調因子與子相應部位的結合,乳糖子即使在有誘導物的存在下,也不能轉錄,所以它是受雙重控制的。 因為弱化作用是受氨酰—tRNARNAσ因子結合組成全酶后才進行工作的。不同的口因子協助RNA,σ70RNAmRNAtRNA任何一個時,由于沒有任何氨酰—tRNA與這些終子結合,所以不能將這些翻譯成氨基因。細胞中的mRNA分子數要比組的數小得多(通常大約僅有15%左右被表達)。由mRNA逆轉錄為cDNA,那么所構建的cDNA文庫的庫容量相應比文庫小。工程的基本過程:目的的獲得+重組載體的構建斗重組載體導人宿主細胞+陽性重組子的篩選+的和鑒定斗的控制表達。每一個環節都離不開微生物的參與。微生物世界④微生物是物質和能量的者,生態環境中的微生物著大量的物質和能量遺傳轉化是指同源或異源的游離DNA分子(質粒和DNA)被自然或人工感受態細胞攝取,并得DNA,這樣就可獲得高效高競爭能力的降解菌。上研究環境污染物對生物大分子(特別是DNA、RNA)的作用。⑤選育轉的優良動、植物品種減①采樣:受特定污染物污染區域的污泥,淤泥作為分離高效降解菌株的微生物源主要是因為:①16(18)SrRNA普遍存在于各類原核和真核生物中,在進化歷程能重要而穩定,16SrRNA的膜脂;tRNA的T或TCRNA①研究建立簡便快捷的型特征測定方法;②更廣泛地研究各分類單元之間表型特征的區別7EscherichiacoliDH5a(△proBpUC18。16SrRNA12ABC疹、、骨髓炎、心肌炎、腦膜炎及關節炎等。C產腸毒素,造成食物。究的材料。BG+致病菌)發酵用菌種。C疽病。D蘇云金芽孢桿菌:產伴胞晶體,作為生物可殺滅玉米螟蟲、菜青蟲、棉鈴蟲等農業害A乳酸桿菌:口腔、胃腸、的正常菌群;工業生產乳酸的菌種。B棒桿菌:生產谷氨酸和多種氨基酸的菌種;致病性菌株引起人、動、植物病害,如:白喉、馬鈴薯環腐病等。CVBl:的菌種。DpH,H24,5,還原硫酸鹽的古生菌。A嗜鹽古生菌的細胞具有吸鉀排鈉功能;B細胞壁由含高量酸性氨基酸的糖蛋白構成,其中由激發可轉換成順式狀態,可使胞內H’轉移至膜外,隨著菌視紫素分子松弛,無光時吸收細胞抗熱物質基礎:A2,3—二磷酸甘油酸。B2,3—二磷酸甘油A嗜熱:最適生長溫度在80℃以上,熱網菌能在110~C生長,熱葉菌的最高生長溫度為113℃。B嗜酸:熱原體在pH2條件下生長。C還原硫酸鹽、硫代硫酸鹽生成硫化物,如硫化氫。D嗜鹽:環境中鹽濃度大于1.5mol/,嗜鹽菌才能生長。(5)H:代謝:古生菌 以H:為電子供古生菌;熱原體兼性厭氧;超嗜熱古生菌多數厭氧。(7)S0的古生菌分布在數以裂殖進行無性繁殖;有的種可進行有性繁殖,產子囊和子囊孢子。D聚犀—羥基丁酸轉入擬南芥,產生可降解生物塑料PHB等。免疫為主,包括吞噬、補體溶菌、以及T細胞介導的細胞免疫CKNK敏或輔助細胞即可靶細胞,其機制與CTL相同。可受CK刺激而增強。③CTL有特異性抗原受T11TI種細胞包括巨噬細胞、中性粒細胞、NKADCCCKNKNKBADCCTCTL1,這將產生什么問題?APC第十五章微生物工業和產品菌種活化(斜面→搖瓶)→逐級放大培養(小試→中試→大試)→發酵(加消泡劑和前體)→“DNA將開辟生命科學研究和利用的新,將為推動社會經濟發展起到重大作用”,這學研究及應用中的具劃時代意義的新技術方法,將會發揮重大作用;同時,DNA也將在工、農、醫各行各業推廣應用,像20世紀微電子進入千家萬戶那樣,改變人類的經濟、文化和生酸酶,碳水化合物水解酶)將菌體的高分子物質水解成小分子物質可用于生物培養,食品工業及成本,酵母蛋白降解后,可得到必要的8種氨基酸,不但含量豐富,而且比例合理,營養比SOD.CC15%;把與 1)不具有細胞結構,具有一般化學大分子的特征。2)一種的毒粒內只含有一種核酸,DNA或者RNA。大部分沒有酶或酶系極不完全,不含催化能量代謝的酶,不能進行獨立的代謝作用無有有有慢快快快DNADNADNADNADNAN-乙酰壁酸中的乳酸基團相連。此外短肽間又有肽鍵或短肽鏈相連,形成了性、帶陰電荷,可能在調節酶的活性和吸附鎂離子中起作用。磷壁酸的主要生理功能(p41)Mg2+的合成酶提高活性;②貯藏磷元素;。狀單鏈DNA,花椰菜花葉的雙鏈DNA為閉合環狀。但RNA核酸都呈線狀。。:高效性/同一的不同讀碼框架(ORF);高度變異率:宿主細胞等影響/RNA缺:3-4答:腺的外形呈典型的二十面體,粗看像“球狀”,無包膜。它有12個角、20個面和30條OH;自由基是一種很強的氧化劑,它與大分子SOD(超氧化物歧化酶),所以根本無法使超氧物陰離子自由基(O2—)H2O2,因O2—就使自身受到毒害。NADPH,受體是固氮酶。受體,細胞含(超氧化物歧化酶)SODSODSOD凝集現象。沉淀反應是可溶性抗原與相應抗體在電解質存在的適當條件下相遇,經過一定時間出答:(1IgBFC結合細胞:IgFcFc(4)通過胎盤:IgG能通過胎盤到達的血流中,形成新生兒的自然免疫,對保護嬰兒抵御①生物固氮:大氣中4株大腸桿菌(Escherichiacoli)分別標為1、2、3、4,它們的型為a+b;1 2 3 4 5 OMMO6 OMMO7 LOOM8OLLO 請判斷各菌號的(直接填在表格中),并說明判斷的理由。(14分.答:E.coliF+(雄性)FF-(雌性)F ②256:2×5,2×6同 3×5,3×6,4×7也為同 7,2,3F-并寫出各自的反應式。(5特 核—+二—+1~10~有RNA二無二在含,酵母膏或膽甾醇等有DNA二無DNA(占細胞壁干重的百分比革蘭氏細(占細胞壁干重的百分比含量較高0一般無含量高0光光PCRDNA“Taq”用于多聚酶PH腸桿菌,因其強烈分解乳糖而產生大量的混合酸,菌體帶H+,故可染上酸性伊紅,又因伊紅與答:抗體的產生必須有三種細胞同時參與:(1)巨噬細胞:是處理和傳遞抗原的細胞,對抗原無特異性識別作用,以吞噬吞飲和吸附等方式攝取抗原的2T細胞在抗體形成過程中起著調(B功能。因此抗體的產生不僅是抗原與免疫細胞間互相的過程,而且還包括免疫細胞間的互相作用,例如免疫細胞的活化、增殖和分化過程。分別用夾層培養法和逐個檢出法,從野生型和營養缺陷型混合菌液中檢出營養缺陷型菌株(10比較這兩個平板上長出的菌落。如果發現一培養皿平板上的某一部位長有菌落,而在后一平板的相應部位卻不長,說明這就是一個營養缺陷型菌株4B-1,42.試比較酵母菌發酵、細菌“同型發酵”和細菌“異型發酵”主要不同點。(7分)答:酵母菌的發酵是由釀酒酵母等通過EMP途徑進行,1分子葡萄糖發酵后產生2分子乙醇、2CO22ATP。子乙醇、2CO21ATP。細菌“異型發酵是由腸膜明串珠菌等通過HMP途徑進行,1分子葡萄糖發酵產生1 子乳酸、1分子乙醇和1分子ATP。生長旺,繁殖快。如:大腸桿菌每晝夜可72次。又如:釀酒酵母單罐發酵時,每12小時即可10F-菌:不帶FHfr菌:當F質粒進入到受體菌后,將質粒DNA整合到受體菌上,此細菌為高頻重組菌DNAF‘質粒。2~3nm4.簡述普遍性轉導與局限性轉導的區別。(6)Bacillussubtilis(Ehrenberg) 屬 種 首次定名人現定名人現定名年Conynebacteriumpekinese屬 種 新 菌縮短方法:加大接種量;在培養基中加入發酵培養基的某些營養成分;采用最適種齡的健壯種子接種,對數后期);選用

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