新顯微鏡的結構和使用第一頁，共三十五頁，2022年，8月28日實驗目的1．熟悉顯微鏡的結構和主要功能。2．掌握低倍鏡和高倍鏡的使用方法。3．了解顯微鏡的維護方法。第二頁，共三十五頁，2022年，8月28日顯微鏡的分類一、光學顯微鏡；二、電子顯微鏡。第三頁，共三十五頁，2022年，8月28日顯微鏡的分類(一)普通光學顯微鏡(二)倒置顯微鏡(三)暗視野顯微鏡一、光學顯微鏡:(四)熒光顯微鏡(五)相差顯微鏡(六)共焦點激光掃描顯微鏡(七)電視顯微鏡第四頁，共三十五頁，2022年，8月28日顯微鏡的分類(一)透射電子顯微鏡(transmissionelectronmicroscope，TEM)

二、電子顯微鏡

(二)掃描電子顯微鏡

(scanningelectronmicroscope,SEM)

(三)掃描隧道電子顯微鏡

（scanningtunnelingmicroscope,STM）

第五頁，共三十五頁，2022年，8月28日實驗內容在生物學和醫學教學、科研及臨床工作中使用的普通光學顯微鏡有直立式和傾斜式兩種類型,其結構可分為機械、照明和光學三部分。第六頁，共三十五頁，2022年，8月28日實驗內容

一、機械部分結

二、照明部分構

三、光學部分第七頁，共三十五頁，2022年，8月28日第八頁，共三十五頁，2022年，8月28日機械部分（一）鏡座：鏡座是顯微鏡的基座，用以支持和穩定鏡體。（二）鏡柱：鏡柱是與鏡座和鏡臂相連的垂直結構。（三）調焦器：調焦器位于鏡柱上，呈同心圓式排列,有大小兩種螺旋。調焦器的功能是調節焦距，大螺旋為粗調焦器,可使鏡臺較快速度地升降,適于低倍鏡對焦；小螺旋為細調焦器,可使鏡臺緩慢升降,用作較精細的調節，適于高倍鏡和油鏡的調焦

第九頁，共三十五頁，2022年，8月28日機械部分（四）鏡臂：鏡臂位于鏡柱上方，略呈弓形,便于握提的結構。直立式顯微鏡在鏡臂和鏡柱之間有一可動關節稱為傾斜關節,使用時可適當傾斜,但傾斜角度不應超過45°,以免顯微鏡翻倒。第十頁，共三十五頁，2022年，8月28日機械部分（五）鏡筒：鏡筒是位于鏡臂上方的圓筒,上端裝有目鏡,下端連接物鏡轉換器。分單筒式和雙筒式兩種。（六）物鏡轉換器：物鏡轉換器(旋轉盤)裝在鏡筒的下方,呈圓盤狀,下面有3～4個物鏡孔,可安裝不同放大倍數的物鏡。換用物鏡時,可轉動旋轉盤,注意一定要將旋轉盤邊緣上的缺刻和基座上的“T”形卡相扣合,使物鏡與光軸合軸,否則無法觀察標本。第十一頁，共三十五頁，2022年，8月28日機械部分（七）鏡臺(載物臺)：是位于鏡臂前方的方形或圓形平臺,用以放置玻片標本。鏡臺中央有一通光孔,兩側有一對壓片夾,用以固定玻片標本。有的顯微鏡裝有推片器,既可固定標本,又可前后左右移動,推片器上有縱橫游標尺,可利用游標尺上的刻度作為標記,以便尋找物像。第十二頁，共三十五頁，2022年，8月28日照明部分顯微鏡的照明裝置由光源、反光鏡、集光器和光圈等部分組成。第十三頁，共三十五頁，2022年，8月28日照明部分（一）光源:顯微鏡有不帶光源和帶光源的兩類。前者利用自然光源或人工光源照明；后者為電光源照明,電光源燈一般裝在鏡座里或鏡座后的燈殼中,可以使用鏡座側面的電壓調節器,調節光源強度。第十四頁，共三十五頁，2022年，8月28日照明部分（二）反光鏡:反光鏡(mirror)裝在鏡座上,位于鏡柱的前方,可向各個方向轉動,把光線反射入聚光鏡。反光鏡的一面是平面鏡，另一面是凹面鏡。平面鏡只有反光作用,一般用于較強光線和固定光源。凹面鏡既有反光作用，也有聚光作用,適用于較弱光和散射光。有時在使用平面鏡時,視野內會出現窗外景物或窗框等,可下降聚光鏡或使用凹面鏡以消除之。第十五頁，共三十五頁，2022年，8月28日照明部分（三）集光器:集光器(condenser)又名聚光器,位于鏡臺通光孔下方,由一組透鏡組成,可使反光鏡反射來的光線集中于標本上。在鏡柱的左側面有一集光器升降螺旋,可使集光器升降。集光器上升時光線增強,下降時光線減弱。第十六頁，共三十五頁，2022年，8月28日照明部分（四）光圈:光圈(diaphragm)又叫虹彩光圈或光闌,位于集光器下方,由許多金屬薄片組成。側面有一光闌小柄,撥動小柄可使光圈擴大或縮小,以調節進光量。第十七頁，共三十五頁，2022年，8月28日光學部分光學部分分為：目鏡(ocular)

、物鏡(objective)。

第十八頁，共三十五頁，2022年，8月28日光學部分（一）目鏡(ocular):為短筒狀，插入鏡筒的上端。目鏡上面刻有10×或15×等符號,表示其放大倍數。有的目鏡筒內有一指針,用以指明視野中觀察物像的部位,以利示范和提問。第十九頁，共三十五頁，2022年，8月28日光學部分（二）物鏡(objective):裝在物鏡轉換器下方,依放大倍數不同分為：低倍鏡、高倍鏡和油鏡。低倍鏡短細,鏡孔直徑最大,放大倍數一般為10×；高倍鏡較長,鏡孔直徑較小,放大倍數為40×、45×或60×；油鏡最長，但鏡孔直徑最小,放大倍數為100×。第二十頁，共三十五頁，2022年，8月28日光學部分通常在物鏡上刻有相應的標記，如在10倍的物鏡上刻有：10/0.25和160/0.17。10為物鏡放大倍數；0.25為鏡口率(或N.A.)*；160為鏡筒長度，0.17為蓋玻片厚度,二者的單位均為毫米。鏡口率又稱數值孔徑(numerialaperture,簡寫為N.A.)，可以反映物鏡分辨力的大小,數字越大,表示分辨力越高,一般1O×物鏡的N.A.為0.25；4O×物鏡的N.A.為0.65,100×物鏡的N.A.為1.25等。顯微鏡的總放大倍數等于目鏡和物鏡放大倍數的乘積。如:目鏡10×、物鏡100×,其放大倍數為1O×100=1000倍。第二十一頁，共三十五頁，2022年，8月28日顯微鏡的使用

在使用顯微鏡時，應右手握鏡臂,左手托鏡座,從鏡盒中取出顯微鏡，輕放在自己座位左前方的實驗臺上,距離實驗臺邊緣5～6cm處為宜。直立式顯微鏡可使用傾斜關節,讓鏡筒略向自己傾斜(但不能超過45°),以便觀察。第二十二頁，共三十五頁，2022年，8月28日一、低倍鏡的使用包括對光、放片、調焦。第二十三頁，共三十五頁，2022年，8月28日一、低倍鏡的使用（一）對光先轉動粗調焦器,使鏡筒略升高,再旋轉物鏡轉換器,使低倍鏡對準通光孔(可聽到輕微的碰撞聲)。然后打開光圈,上升集光器,雙眼睜開,用左眼對準目鏡觀察,反復轉動反光鏡,直到視野內光線明亮均勻為止。第二十四頁，共三十五頁，2022年，8月28日一、低倍鏡的使用（二）放片取一張玻片標本,認清標本的正反面,將正面朝上,用壓片夾或推片器固定。然后調節玻片,將要觀察的標本對準通光孔的中央。第二十五頁，共三十五頁，2022年，8月28日一、低倍鏡的使用（三）調焦先從側面注視低倍鏡,轉動粗調焦器,使低倍鏡距玻片標本約0.5cm。然后用左眼觀察視野,向相反的方向緩慢轉動粗調焦器,使低倍鏡慢慢上升,當視野中出現物像時,再用細調焦器調節,直到物像清晰為止。如果在調節焦距時,物鏡與標本之間的距離已超過工作距離(指顯微鏡物像調節清晰時,物鏡最下面透鏡的表面與蓋玻片上表面的距離)仍未見到物像,則應該嚴格按上述步驟重新操作。如果物像不在視野中央,可前后左右移動標本,注意玻片移動的方向與物像移動的方向相反。如果光線太強或太弱,可慢慢地縮小或擴大光圈；也可下降或上升集光器,找到最合適的光亮度。你會發現最強的光線不一定是最合適的。第二十六頁，共三十五頁，2022年，8月28日二、高倍鏡的使用（一）在低倍鏡下找到物像后,將要放大觀察的部分移至視野正中央,并調節清晰。（二）從側面注視,移走低倍鏡轉換高倍鏡。（三）從目鏡中觀察,可見視野中有不太清晰的物像,此時慢慢地轉動細調焦器,即可見到清晰的物像。注意使用高倍鏡時,不要隨意轉動粗調焦器,以免鏡筒下降幅度大而損壞標本或鏡頭。第二十七頁，共三十五頁，2022年，8月28日二、高倍鏡的使用如果按上述操作看不到物像,應該檢查可能的原因：①目的物不在視野中,是否由于低倍鏡下沒有將其移至視野正中；②低倍鏡的焦距是否調好,玻片標本是否放反；③物鏡是否松動或有污物等。第二十八頁，共三十五頁，2022年，8月28日三、油鏡的使用（一）一定要在高倍鏡下,將擬用油鏡觀察的目的物移至視野正中央。（二）光圈開大,集光器上升到最高位置。（三）旋轉物鏡轉換器,使高倍鏡轉開,眼睛注視側面,在欲觀察玻片標本的部位上滴一滴香柏油，轉換油鏡，使油鏡頭與香柏油接觸。第二十九頁，共三十五頁，2022年，8月28日三、油鏡的使用（四）從目鏡觀察,同時慢慢上下轉動細調焦器,直至出現清晰的物像。油鏡用完后,必須把鏡頭和標本片上的香柏油擦干凈。先用拭鏡紙蘸少許擦鏡油將香柏油擦去后,再用干凈拭鏡紙擦凈。無蓋片的標本不能擦,以免損壞標本。臨時制片因有水分,不宜用油鏡觀察。第三十頁，共三十五頁，2022年，8月28日標本的觀察與操作練習取家兔肌肉、肝臟、脾臟及腎組織切片,按照上述顯微鏡的正確使用方法,反復練習低倍鏡和高倍鏡的使用,以便較熟練地掌握顯微鏡的正確使用方法,為以后的實驗打好基礎。第三十一頁，共三十五頁，2022年，8月28日使用顯微鏡的注意事項1．取放顯微鏡時,一定要一手握鏡臂,一手托鏡座,切勿單手斜提,以免碰壞顯微鏡或造成零部件脫落。2．顯微鏡不可放置在實驗臺邊緣,以防碰翻落地。3．使用前要檢查,如發現缺損,或使用時損壞,應立即報告指導教師。第三十二頁，共三十五頁，2022年，8月28日使用顯微鏡的注意事項4．放置玻片標本時,應將有蓋片的一面向上,否則使用高倍鏡和油鏡時，將找不到物像,同時又易損壞玻片標本和鏡頭；臨時制片要加蓋片,由于含有水分,易于流動,鏡臺須平放。觀察永久玻片標本時,傾斜關節不得超過45°，若因事需離開座位,必須將傾斜關節復原。5．不得隨意取出目鏡或拆卸零部件,以防灰塵落入或丟失損壞等。第三十三頁，共三十五頁，2022年，8月28日使用顯微鏡的注意事項6．使用顯微鏡時,應該養成正規操作