標準解讀

《LY/T 2305-2014 油茶品種微衛星標記鑒別技術規程》是一項國家標準,旨在通過微衛星標記技術對油茶品種進行準確鑒別。該標準詳細規定了使用微衛星(Microsatellite, MS)或簡單序列重復(Simple Sequence Repeats, SSRs)作為分子標記來區分不同油茶種質資源的方法。它適用于科研機構、高等院校以及相關企業,在進行油茶遺傳多樣性分析、親緣關系鑒定等方面時提供技術支持。

標準中首先介紹了微衛星標記的基本概念及其在植物遺傳學研究中的應用價值,并指出了選擇合適的微衛星引物對于實現高效準確的品種鑒別的關鍵性。接著,文檔列出了從樣品采集到DNA提取、PCR擴增條件設定、電泳分離直至數據分析等一系列實驗操作的具體步驟與要求。例如,在DNA提取過程中推薦采用CTAB法;PCR反應體系則需要根據所選引物及其實驗室條件做適當調整等。

此外,《LY/T 2305-2014》還強調了質量控制的重要性,包括但不限于對照樣本設置、重復實驗驗證結果的一致性檢查等內容。為了保證數據的可靠性和可比性,標準建議在同一實驗室內部建立統一的操作流程,并定期參加外部能力驗證活動以持續改進技術水平。


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....

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  • 2014-08-21 頒布
  • 2014-12-01 實施
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LY/T 2305-2014油茶品種微衛星標記鑒別技術規程_第1頁
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文檔簡介

ICS6502020

B61..

中華人民共和國林業行業標準

LY/T2305—2014

油茶品種微衛星標記鑒別技術規程

TechnicalregulationsofCamelliavarietiesidentificationbySSRmarkers

2014-08-21發布2014-12-01實施

國家林業局發布

LY/T2305—2014

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由國家林業局提出

本標準由全國林木種子標準化技術委員會歸口

(SAC/TC115)。

本標準負責起草單位南京林業大學

:。

本標準參加起草單位湖北省林業科學研究院福建省林木種苗總站

:、。

本標準主要起草人尹佟明戴曉港陳贏男李淑嫻史潔張新葉陳偉

:、、、、、、。

LY/T2305—2014

油茶品種微衛星標記鑒別技術規程

1范圍

本標準規定了以油茶Camellia幼嫩組織葉片芽等為材料利用微衛星標記法對油茶品

(spp.)(、),

種進行分子鑒定的術語原理主要儀器和設備試劑與溶液操作程序和鑒定

、、、、。

本標準適用于附錄中所列油茶品種的鑒別

A。

2術語和定義

下列術語和定義適用于本文件

21

.

微衛星microsatellite

簡單重復序列

simplesequencerepeats;SSR

也稱基因組中由個個核苷酸組成的串聯重復序列

2~6DNA。

22

.

基因型頻率genotypefrequency

群體中某一位點特定基因型個體數占全部個體數的比率

3原理

微衛星廣泛分布于植物基因組的不同位置微衛星位點具有高度的遺傳多態性微衛星標記具有高

,,

度的物種特異性和良好的擴增重現性是用于植物品種遺傳鑒別的首選標記本標準采用高通量測序

,。

獲得了大量微衛星標記通過實驗檢測篩選了對高度多態性的微衛星標記用于油茶品種的遺傳鑒

,,10,

別在檢驗過程中我們可采用真實品種的模板做為標準品從待檢苗木中抽樣做為待檢樣品

。,DNA,。

利用微衛星引物進行擴增時若待檢樣品與標準品在任一引物擴增位點上基因型不同則可判定待檢樣

,,

品與標準品不是同一品種當不同引物擴增位點上基因型都相同時可根據標準品種在不同位點上的

。,

基因型頻率乘積計算出待檢樣品與標準品是同一品種的概率

,。

4主要儀器和設備

41擴增儀

.PCR。

42離心機

.12000r/min。

43微量可調移液器

.(2μL、10μL、100μL、1000μL)。

44數顯式穩壓穩流電泳儀電壓電流

.EPS-300(10V~300V,10mA~400mA)。

45全自動數碼凝膠圖像分析系統透射紫外波長透射紫外面積

.(:302nm,:20cm×20cm)。

46微量核酸蛋白檢測儀波長范圍波長精度檢測范圍

.

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