標準解讀

GB/T 19563-2004 是一項中華人民共和國國家標準，全稱為《大豆種子品種鑒定實驗方法 簡單重復序列間區法》。該標準于2004年發布，旨在為大豆種子的品種鑒定提供一套科學、統一的方法，以確保種子質量控制和新品種保護工作的準確性與規范性。

標準適用范圍

本標準適用于大豆（Glycine max (L.) Merr.）種子及其實物樣品的品種真實性鑒定。通過應用簡單重復序列間區（Simple Sequence Repeats, SSR）分子標記技術，對大豆品種進行遺傳身份驗證，幫助區分不同品種間的遺傳差異，從而實現對大豆種子品種的精確識別。

技術原理

SSR是一種基于DNA水平的分子標記技術，它利用存在于基因組中的簡單重復核苷酸序列（如CA、AG等）作為標記點。這些重復序列在不同品種間存在長度多態性，即重復次數的差異，可通過PCR擴增并電泳分離，比較條帶圖譜來鑒別品種間的遺傳差異。

實驗流程

  1. 樣本采集與保存：按照標準要求采集大豆種子或植株樣本，確保樣本的代表性與完整性。
  2. DNA提取：從樣本中提取高質量的總DNA，為后續的PCR反應提供模板。
  3. 選擇引物：根據已知的大豆SSR位點信息，選擇具有高多態性的SSR引物對。
  4. PCR擴增：使用選定的引物對DNA模板進行聚合酶鏈式反應（PCR），擴增包含SSR序列的目標片段。
  5. 電泳分析：將PCR產物通過凝膠電泳分離，依據片段大小的不同形成特定的條帶圖譜。
  6. 數據記錄與分析：記錄電泳圖譜，比較不同樣品間的條帶差異，利用專業的生物信息學軟件進行數據分析，以確定品種間的遺傳相似度和差異。

標準意義

該標準的實施有助于提高大豆種子質量監控水平，防止品種混淆和假冒，保護種植者與育種者的權益。同時，也為大豆遺傳資源的管理和新品種的注冊、保護提供了科學依據和技術支持，促進了大豆品種改良和遺傳多樣性研究的發展。

注意事項

  • 實驗過程中需嚴格遵守操作規程，確保實驗結果的準確性和可重復性。
  • 選擇的SSR引物應具有良好的特異性和多態性，以提高鑒定的分辨率。
  • 數據分析時，綜合考慮多個SSR位點的結果，以提高鑒定的準確性。


如需獲取更多詳盡信息，請直接參考下方經官方授權發布的權威標準文檔。

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  • 廢止
  • 已被廢除、停止使用，并不再更新
  • 2004-06-22 頒布
  • 2004-12-01 實施
?正版授權
GB/T 19563-2004大豆種子品種鑒定實驗方法簡單重復序列間區法_第1頁
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GB/T 19563-2004大豆種子品種鑒定實驗方法簡單重復序列間區法_第3頁
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ICS65.020.01B21中華人民共和國國家標準GB/T19563—2004大豆種子品種鑒定實驗方法簡單重復序列間區法Experimentalidentifieationmethodforvarietyofsoybeanseed-ISSR2004-06-22發布2004-12-01實施中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布中國國家標準化管理委員會

GB/T19563一2004前本標準的附錄A為規范性附錄。本標準由國家質量監督檢驗檢疫總局提出本標準起草單位：國家農業標準化監測與研究中心（黑龍江)黑龍江省質量技術監督局.本標準主要起草人：王慶貴、徐品、姜雯、李光宇、石紹業、郝兆軍。

GB/T19563—2004目前.我國農作物種子的鑒定多采用種植鑒定、快速測定法(苯酚染色法、大豆種皮愈創木酚染色法、高梁種子氫氧化鉀-漂白粉測定法、燕麥種子熒光測定法、小麥種子氫氧化鉀測定法)、聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定大麥、小麥種子純度等。這些方法所需的檢驗周期較長.雖然電泳法所需時間短，但不具備分子水平鑒定的諸多優點。隨著分子生物學的發展，特別是20世紀90年代以來.分子生物學的相關技術已被廣泛應用.其檢測對象為DNA大分子——生物的遺傳基礎。以DNA為檢測對象,具有許多其他檢測水平所不具備的優點：首先.可供探測DNA標記的數量是無限的.這是同工酶技術所無法比擬的；其二.DNA分析技術不像其他技術那樣隨組織或發育階段而異，植物體任何部位、任何時期提供的DNA均可用于分析，其檢測結果都是一樣的:第三.DNA分析不受環境影響,其變異只源干等位基因DNA序列的變異.這和穩定性便于揭示品種間的遺傳變異，從而排除了環境變異所造成的表型變異?；谏鲜鰞烖c,DNA分析技術是農、林、牧、漁等品種鑒定的先進方法

GB/T19563-2004大豆種子品種鑒定實驗方法簡單重復序列間區法1范圍本標準規定了大豆種子品種鑒定的實驗方法。本標準適用于利用簡單重復序列間區（ISSR)法對大豆種子品種鑒定的實驗過程2術語、定義和縮略語2.1術語和定義下列術語和定義適用于本標準2.1.1聚合酶鏈式反應polymerasechainreaction少至一個拷貝的特定堿基順序的DNA片斷在體外花費幾個小時即可擴增出數百萬個分子的酶催化反應，即DNA合成反應2.1.2簡單重復序列間區inter-simplesequencerepeat是在PCR技術基礎上發展起來的一種分子標記和檢測方法·根據某個簡單重復序列（微衛星位點）設計出一系列特異引物，通過PCR反應擴增微衛星位點間隔的堿基順序,以檢測其擴增片段長度的多態性。2.1.3微衛星DNAmmicrosatelliteDNA是一類由幾個核苷酸(一般為1個～5個）為重復單位的長達幾十至幾百個核音酸的串聯重復慶列。2.1.4核谷酸nuclcotide是構成核酸的基本單元，由三部分組成：五碳糖、磷酸和環狀的含氮堿基2.1.5引物primer一條互補結合在模板DNA鏈上的短的單鏈,提供3-OH末端作為DNA合成的起點，延伸合成模板DNA的互補鏈。2.1.6引物擴增多態性primeramplifiedpolymorphism-對引物在兩個或兩個以上不同材料基因組DNA之間擴增，得到數目不同或長度不同的DNA片斷。2.2縮略語下列縮略語適用于本標準ISSR簡單重復序列間區（Inter-SimpleSequence

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