大腸菌群的檢驗大腸菌群的存在早在19世紀末就有人用檢查大腸桿菌的辦法來確定水中有無傷寒沙門氏菌。水受到沙門氏菌的污染，有時水中該菌的數量很少，不易直接檢查出來。若水中檢出一定數量的大腸桿菌，則說明水已被糞便污染正常糞便中的細菌種類很多，但符合理想指標菌條件和特性的細菌主要有3類群，即大腸桿菌、糞鏈球菌和產氣莢膜梭菌。在糞便中大腸桿菌數量最多，每克糞便中可達30億個。大腸桿菌容易引發的疾?。耗c道外感染多為內源性感染，以泌尿系感染為主，如尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎。也可引起腹膜炎、膽囊炎、闌尾炎等。嬰兒、年老體弱、慢性消耗性疾病、大面積燒傷患者，大腸桿菌可侵入血流，引起敗血癥。早產兒，尤其是生后30天內的新生兒，易患大腸桿菌性腦膜炎。急性腹瀉某些血清型大腸桿菌能引起人類腹瀉。其中腸產毒性大腸桿菌會引起嬰幼兒和旅游者腹瀉，出現輕度水瀉，也可呈嚴重的霍亂樣癥狀。腹瀉常為自限性，一般2～3天即愈，營養不良者可達數周，也可反復發作。腸致病性大腸桿菌是嬰兒腹瀉的主要病原菌，有高度傳染性，嚴重者可致死。細菌侵入腸道后，主要在十二指腸、空腸和回腸上段大量繁殖。此外，腸出血性大腸桿菌會引起散發性或暴發性出血性結腸炎，可產生志賀氏毒素樣細胞毒素。檢樣稀釋乳糖膽鹽發酵劑培養（36+1℃），（24+2）h產氣伊紅美籃瓊脂平板培養（36+1）℃，（24+2）h乳糖膽鹽發酵管培養（36+1℃）（24+2）h不產氣大腸菌群陰性報告革蘭氏染色大腸菌群的檢驗程序革蘭氏陰性無芽孢桿菌革蘭氏陽性大腸菌群陰性報告產氣不產氣大腸菌群陽性報告大腸菌群陰性報告測定大腸菌群檢驗常用器材

測定大腸菌群多用培養基和器材主要有單料乳糖膽鹽，伊紅美藍瓊脂（EMB），EC肉湯，磷酸鹽緩沖溶液，生理鹽水，革蘭氏染色液，恒溫培養箱，恒溫水浴鍋，天平，顯微鏡，均質器或乳體，溫度計，滅菌平皿（直徑90mm），試管，廣口瓶或三角瓶，吸管，載玻片，接種針，玻璃珠，酒精燈，試管架。一.檢樣稀釋取樣及稀釋方法與菌落總數檢驗方法相同，做成均勻稀釋液。同一稀釋度在菌落總數測定的同時接種于乳糖膽鹽復發酵管。1)以無菌操作取檢樣25mL（g），放于225mL滅菌生理鹽水的滅菌玻璃瓶內（瓶內預置適量的玻璃珠）或滅菌乳缽內，經充分振搖或研磨制成1：10的均勻稀釋液。固體取樣在加入稀釋液后，最好置滅菌均質器中以8000~1000r＼min的速度處理1min，制成1：10的均勻稀釋液。2用以滅菌吸管吸取1：10稀釋液1mL，沿管壁徐徐注入含有3mL滅菌生理鹽水的試管內，振搖試管混合均勻，制成1：100的稀釋液。檢驗方法另取1mL滅菌試管，按上項操作順序，做10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋液1次即換用1支10mL吸管。二.乳糖發酵試驗1）根據食品衛生標準要求或對檢樣污染程度的估計，選擇3個稀釋度，每個稀釋度接種3管乳糖膽鹽發酵管。接種量在1mL以上者用雙料乳糖膽鹽發酵管，1mL及以下者用單聊乳糖膽鹽發酵管。每一稀釋度接種3管。置（36+1.36-1）℃恒溫箱內，培養（24+2.24-2）h，如所有發酵管都不產氣，則可報告為大腸菌群陰性。經上述所說，如有產氣者，將產氣的發酵管分別轉種在伊紅美藍瓊脂（EM瓊脂）平板上劃線分離，然后置（36+136-1）℃恒溫箱內，培養18~24h后取出，觀察菌落形態，并做革蘭氏染色和證實試驗。大腸桿菌菌落證實試驗挑取可疑大腸菌落1~2個進行革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陰性無芽孢桿菌時，挑取該菌落的另一部分，接種乳糖復發酵管。置（36+1.36-1）℃恒溫箱內，培養22~26H，觀察產氣情況。凡乳糖管產酸產氣，證實有大腸菌群存在，即可報告為大腸菌群陽性。大腸菌群可疑菌落的特點（1）深紫黑色，具有金屬光澤的菌落。（2）紫黑色，不帶或略帶金屬光澤的菌落，（3）淡紫黑色，中心色澤深的菌落。注意事項：

1：如果平板上典型菌落甚少或均不夠典型，則應多挑菌落做證實實驗，以免出現假陽性。2：在檢驗中應選用伊紅美藍平板為分離培養基，在該平板上，大腸菌落大多呈紫黑色，有金屬光澤或無金屬光澤。3