實(shí)驗(yàn)十一乙酸乙酯、苯、甲苯和環(huán)己烷混合物的分離和測定

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?）熟悉氣相色譜的操作原理，。（2）學(xué)習(xí)用保留值來定性和用歸一化法定量，（3）了解相對重量校正因子的意義、用途和測定方法。

實(shí)驗(yàn)原理在一定的固定相和一定的操作條件下（如柱溫、柱長、柱內(nèi)徑和載氣流速等），任何一種物質(zhì)都有一確定的保留值，因此，在相同條件下測定未知各組分的色譜峰的保留時間和已知物色譜峰的保留時間后，兩相對照，就能判定某組分的色譜峰代表哪種物質(zhì)。乙酸乙酯和甲苯的沸點(diǎn)分別為77.1℃和110.8℃，而苯和環(huán)己烷的沸點(diǎn)很相近（80.10℃和80.81℃），用一般的分離方法難將其分離。在氣相色譜法中是利用苯比環(huán)己烷易于極化的性質(zhì)，采用一個中等極性的固定液，使苯產(chǎn)生誘導(dǎo)偶極，對苯有滯留作用，較晚餾出色譜柱，使它們之間得以分離。歸一化法是氣相色譜中常用的一種簡便、準(zhǔn)確的定量方法，使用這種方法的條件是：樣品中的所有組分都要流出色譜柱，在所用檢測器上都產(chǎn)生信號，當(dāng)樣品經(jīng)色譜試驗(yàn)后，以所得色譜圖，求出各組分的峰面積（A=1.065hW1/2），并利用各組分的純品測出其相對重量校正因子fi，就可求得各組分的含量。主要儀器和試劑102G型氣相色譜儀（用熱導(dǎo)檢測器），色譜柱：2m×4mm不銹鋼螺旋柱：內(nèi)裝DNP（鄰苯二甲酸二壬酯）15%的102型的白色擔(dān)體，其顆粒大小為60—80目。記錄儀：XWC—100A型（靈敏度：5mV/25cm），微量注射器（滿刻度5μl或10μl）6支，秒表一只，載氣：氮?dú)狻Ｒ宜嵋阴ァ⒈健⒓妆健h(huán)己烷（AR）。實(shí)驗(yàn)步驟

一、儀器的運(yùn)轉(zhuǎn)（1）開啟載氣鋼瓶，將鋼瓶的輸出壓力調(diào)到3kg/cm2左右，再將柱前壓力調(diào)到2kg/cm2左右，轉(zhuǎn)子高度調(diào)節(jié)到10~20mL/min左右（注意觀察氣路系統(tǒng)有無漏氣現(xiàn)象）。（2）接通電源前，應(yīng)使色譜儀的電器開關(guān)都處于“關(guān)”狀態(tài)，接通電源后，打開儀器主機(jī)面板上的“啟動”開關(guān)，這時總機(jī)指示燈亮，層析室鼓風(fēng)馬達(dá)開始運(yùn)轉(zhuǎn)。（3）打開溫度控制器電源開關(guān)，調(diào)節(jié)“層析室溫度調(diào)節(jié)”旋鈕，即向順時針方向轉(zhuǎn)動，層析室溫度升高，且“加熱指示燈”亮，表示層析室在加熱，當(dāng)主機(jī)側(cè)水銀溫度計(jì)溫度指示為100℃，調(diào)節(jié)“層析室溫度調(diào)節(jié)”旋鈕，即緩慢向反時針方向轉(zhuǎn)動，使“加熱指示燈”呈暗紅或閃動，則表示層析室溫度將處于100℃恒溫狀態(tài)。（4）打開氣化加熱開關(guān)，按順時針方向緩慢轉(zhuǎn)動“氣化氫焰溫度調(diào)節(jié)”旋鈕，此時氣化加熱指示燈亮，氣化室溫度會逐漸升高。溫度值的顯示借用測溫毫伏計(jì)（即通過一單刀三波段開關(guān)的切換，借以顯示層析室、氣化室和氫焰離子室的溫度）。當(dāng)溫度升到140~150℃時，按反時針方向旋轉(zhuǎn)“氣化氫焰溫度調(diào)節(jié)”旋鈕，使加熱指示燈暗紅或閃動，則表示氣化室的溫度將維持在140~150℃之間。（5）將放大器的“熱導(dǎo)”、“氫焰”轉(zhuǎn)換開關(guān)置于“熱導(dǎo)”，打開放大器的電源開關(guān)，將橋路電流調(diào)節(jié)到120mA處，衰減器調(diào)到1/2處，待半小時后，接通記錄儀電源，調(diào)節(jié)“熱導(dǎo)零調(diào)”旋鈕和“熱導(dǎo)平衡”旋鈕，使記錄儀指針在零位附近，打開“記錄”開關(guān)，將紙速撥至1cm/min檔，待基線呈直線后，就可進(jìn)行測試工作。

二、定性、定量分析（1）用微量注射器（使用方法見附錄），吸取1μl分析純的環(huán)己烷，快速注入進(jìn)樣器內(nèi)，并同時開動秒表，當(dāng)色譜峰出現(xiàn)最高點(diǎn)時，關(guān)閉秒表，讀出所用時間，即為環(huán)己烷的保留時間，用同樣的方法測出乙酸乙酯、苯和甲苯的保留時間。（2）取乙酸乙酯、苯、甲苯和環(huán)己烷的混合試樣5μl，注入進(jìn)樣器內(nèi)進(jìn)行色譜分離，測量各峰的保留時間，再與上述各已知物的保留時間對照，即可判定出樣品中各峰代表哪種物質(zhì)，并測量出各峰的峰面積，用作定量計(jì)算。（3）取乙酸乙酯、苯、甲苯和環(huán)己烷的標(biāo)準(zhǔn)樣混合物5μl，進(jìn)行色譜試驗(yàn)，由所得色譜圖，可求得組分的相對重量校正因子（fi）。三、測量完畢關(guān)色譜儀的過程（1）關(guān)閉記錄器電源。（2）關(guān)閉熱導(dǎo)檢測器橋電流及所有加熱電源，然后關(guān)閉總機(jī)。（3）關(guān)閉載氣鋼瓶活塞,待柱前壓力表指示為零時,關(guān)閉載氣穩(wěn)壓閥。

數(shù)據(jù)記錄和處理（1）相對重量校正因子（fi）的計(jì)算令苯為標(biāo)準(zhǔn)物（S），則fs=f苯

=1.00，乙酸乙酯、甲苯和環(huán)己烷的fi值可用下式求得式中：Ai、A苯為標(biāo)準(zhǔn)混合物色譜圖中測得的乙酸乙酯、甲苯、環(huán)己烷和苯的峰面積。

W苯、Wi分別為標(biāo)準(zhǔn)混合物中苯、乙酸乙酯、甲苯及環(huán)己烷的重量。（2）樣品中乙酸乙酯、苯、甲苯和