第十五章病毒學概論1精選課件第十五章病毒學概論1精選課件

病毒(virus)的發現1892年發現第一個病毒即煙草花葉病毒1898年發現動物口蹄疫病毒首先被證實對人類有致病性的是黃熱病毒（1901年發現）2精選課件病毒(virus)的發現23000BC，埃及孟非思壁畫中長老患小兒麻痹癥。3精選課件3000BC，埃及孟非思壁畫中長老患小兒麻痹癥。3精選課件病毒的特點：1、體積微小，必須用電子顯微鏡觀察；2、只有一種遺傳物質；3、必須在活細胞內顯示生命活性；4、無完整的細胞結構。4精選課件病毒的特點：4精選課件病毒學:

即研究病毒的本質、病毒與宿主相互作用和規律的生物學科。醫學病毒學:

即研究人類病毒的本質及其與人類疾病關系的一門學科。5精選課件病毒學:醫學病毒學:5精選課件1、臨床約70-80%傳染病是由病毒引起的;2、病毒性疾病對人類健康危害極大;3、近20年來，新病毒不斷被發現，由此引發的病毒性疾病正越來越多的被人們所關注.6精選課件1、臨床約70-80%傳染病是由病毒引起的;6精選課件一、病毒的形態、結構與分類病毒體（virion)——完整的具有傳染性的病毒顆粒，有典型的形態和傳染性。7精選課件一、病毒的形態、結構與分類病毒體（virion)——完整1、測量單位——納米（nm）3、觀察工具——電子顯微鏡2、大多數病毒的直徑小于150nm1病毒的大小

葡萄球菌1000nm立克次體450nm衣原體390nm痘苗病毒300×250nm煙草花葉病病毒100nm流感病毒40nm乙腦病毒30nm脊髓灰質炎病毒70nm腺病毒65×95nm噬菌體8精選課件1、測量單位——納米（nm）3、觀察工具——電子2.病毒的形態：

多為球型，還有桿狀、子彈狀、磚塊狀及蝌蚪狀等。9精選課件2.病毒的形態：9精選課件乙肝病毒腺病毒10精選課件乙肝病毒腺病毒10精選課件輪狀病毒狂犬病毒11精選課件輪狀病毒狂犬病毒11精選課件子彈狀的狂犬病毒12精選課件子彈狀的狂犬病毒12精選課件噬菌體13精選課件噬菌體13精選課件天花病毒Ebola病毒HSV-214精選課件天花病毒Ebola病毒HSV-214精選課件衣殼（capsid）：由許多蛋白質殼粒組成，保護核酸，介導病毒感染細胞且有抗原性。（二）、病毒的結構與化學組成核心（core）：核酸，構成病毒的基因組（genome）。殼粒(capsomere)：由少數幾種重復的多肽亞單位組成核衣殼裸病毒15精選課件衣殼（capsid）：由許多蛋白質殼粒組成，保護核酸，介導病（1）核心（Core）：核酸→基因組genome→決定病毒遺傳、變異和復制（2）殼粒capsomere→衣殼capsid→保護、介導、抗原性（3）包膜envelope，包膜子粒peplomere（刺突spike）→保護、介導、抗原性

16精選課件（1）核心（Core）：核酸→基因組genome→決定

包膜（envelope）:包繞在核衣殼外，上常有刺突（spike），是病毒的表面抗原。包膜子粒、刺突包膜輔助結構：17精選課件包膜（envelope）:包繞在核衣殼外，上常有刺突18精選課件18精選課件EBV結構模式圖19精選課件EBV結構模式圖19精選課件1）病毒核酸

(1)化學成分為DNA或RNA，據此將病毒分DNA病毒和RNA病毒。

(2)核酸可線型或環型、分單股或雙股，一般DNA病毒為雙股，RNA病毒為單股；大小相差懸殊。

(3)攜帶病毒的全部遺傳信息，是病毒的基因組，控制病毒的生殖、遺傳和變異。2、病毒的化學組成20精選課件1）病毒核酸2、病毒的化學組成20精選課件（2）、病毒蛋白質

結構蛋白組成病毒體的成分

衣殼蛋白包膜蛋白基質蛋白——連接衣殼蛋白與包膜蛋白的部分，有跨膜及錨定功能區非結構蛋白病毒內——酶感染細胞內——特殊作用蛋白21精選課件（2）、病毒蛋白質

結構蛋白組成病毒體的成分21精選4、病毒的蛋白質結構蛋白：是組成病毒體的蛋白成分，可離心沉淀后分離純化。（1）衣殼蛋白：（2）基質蛋白：（3）包膜蛋白：22精選課件4、病毒的蛋白質結構蛋白：是組成病毒體的蛋白成分，可離心沉淀3、病毒包膜包膜子粒、刺突包膜（envelope）:包繞在核衣殼外，上常有刺突（spike），是病毒的表面抗原。包膜23精選課件3、病毒包膜包膜子粒、包膜（envelope）:包繞在核衣殼非結構蛋白：可存在于病毒體內也可僅存在于宿主細胞內。（1）病毒內所有的重要的酶類；（2）抑制宿主細胞生物合成或抑制病毒抗原經MHC遞呈的蛋白；（3）轉化宿主細胞的作用；（4）抗細胞因子或抗細胞凋亡作用。24精選課件非結構蛋白：可存在于病毒體內也可僅存在于宿主細胞內。24精選2、病毒衣殼：由多肽構成的殼微粒組成，有三種排列方式：螺旋對稱立體對稱復合對稱25精選課件2、病毒衣殼：由多肽構成的殼微粒組成，有三種排列方式：螺旋對病毒的幾種對稱類型（據殼粒排列方式所分）螺旋對稱型（helicalsymmetry)26精選課件病毒的幾種對稱類型（據殼粒排列方式所分）螺旋對稱型26精選課20面體立體對稱型(icosahedralsymmetry)：大多數球狀病毒屬之；

27精選課件20面體立體對稱型(icosahedralsymmetry28精選課件28精選課件五鄰體六鄰體29精選課件五鄰體六鄰體29精選課件20面體立體對稱型螺旋對稱型（3）復合對稱型(complexsymmetry30精選課件20面體立體對稱型螺旋對稱型（3）復合對稱型(complex（三）病毒的分類分類原則：1、核酸類型和結構；

2、病毒體的形狀和大小；

3、病毒體的形態結構；

4、對脂溶劑的敏感性。31精選課件（三）病毒的分類分類原則：31精選課件1、DNA病毒類；2、RNA病毒類；

3、DNA和RNA逆轉錄病毒類。32精選課件1、DNA病毒類；32精選課件

其他：1、衛星病毒(satellites):基因組缺陷的病毒，一類為可編碼自已衣殼蛋白；另一為RNA分子，需要輔助病毒的衣殼蛋白。500-2000核苷酸，引起植物病變2、類病毒(viroids):植物病毒，單鏈桿狀RNA有二級結構，200-400核苷酸，無包膜，不含蛋白質3、朊粒(prion):3.0×104的蛋白質，引起瘋牛病……33精選課件其他：1、衛星病毒(satellites):基因組缺陷的病毒（一）病毒的

增殖方式——自我復制(selfreplication)

復制周期：1、吸附和穿入(absorptionandpenetration)2、脫殼(uncoating)3、生物合成(biosynthesis)4、裝配與釋放(assemblyandrelease)二、病毒的增殖復制周期34精選課件（一）病毒的增殖方式——自我復制(selfrepli1.吸附和穿入(absorptionandpenetration)吸附：病毒的表面配體位點與細胞表面特異性受體結合；穿入：病毒進入宿主細胞。吸附胞飲方式穿入35精選課件1.吸附和穿入(absorptionandpenetra吸附膜融合后穿入36精選課件吸附膜融合后穿入36精選課件3.脫殼

病毒體必須脫去蛋白質衣殼后，核酸才能發揮作用。多數病毒穿入細胞以后，隨即有細胞溶酶體的作用，使衣殼蛋白水解，釋放出基因組核酸。但痘病毒特殊，分兩步脫殼。先由溶酶體作用脫去外殼蛋白質，病毒核心（內層衣殼和核酸）釋放于細胞質中。然后再經病毒編碼產生一種脫殼酶，脫去內層衣殼后才能釋放出核酸。螺旋對稱型病毒，如流感病毒RNA仍包裹在蛋白質衣殼內時即可進行轉錄。37精選課件3.脫殼病毒體必須脫去蛋白質衣殼后，核（三）生物合成(biosynthesis)：早期：基因組在細胞內合成非結構蛋白（病毒復制酶及抑制細胞正常生物合成的抑制酶）。晚期：根據基因組的指令在細胞內復制病毒核酸合成結構蛋白和非結構蛋白隱蔽期38精選課件（三）生物合成(biosynthesis)：早期：晚

（2）病毒的定量測定：TCID50(50%tissuecultureinfectivedose)：將病毒進行系列稀釋后行細胞培養，觀察能使半數細胞培養孔或試管內的細胞發生細胞病變（CPE）時的病毒量，即TCID50。39精選課件（2）病毒的定量測定：39精選課件病毒感染細胞后形成嗜酸性或嗜堿性包涵體

狂犬病毒感染后在腦細胞的胞漿內出現嗜酸性圓形或橢圓形的包涵體，可供輔助診斷.40精選課件病毒感染細胞后形成嗜酸性或嗜堿性包涵體狂犬病毒感染后

根據基因組轉錄mRNA及轉譯蛋白質的不同，生物合成可分六大類：DNA病毒雙鏈DNA病毒（多數）單鏈DNA病毒（很少）RNA病毒單正鏈RNA病毒單負鏈RNA病毒雙鏈RNA病毒逆轉錄病毒41精選課件根據基因組轉錄mRNA及轉譯蛋白質的不同，生物合成可1、DNA病毒（雙鏈）：細胞核內合成DNA，細胞質內合成病毒蛋白。早期：病毒DNA依賴DNA的RNA多聚酶早期mRNA轉譯早期蛋白DNA多聚酶脫氧胸腺嘧啶激酶調控病毒基因組轉錄的酶抑制宿主細胞生物合成的酶藥物作用的靶42精選課件1、DNA病毒（雙鏈）：早期：病毒DNA依賴DNA的早期mR晚期：解鏈正鏈DNA負鏈DNADNA多聚酶子代DNA轉錄晚期mRNA晚期蛋白病毒衣殼蛋白及其他結構蛋白43精選課件晚期：解鏈正鏈DNADNA多聚酶子代DNA轉錄晚期mRNA晚2、RNA病毒（單鏈）：多數在細胞質內合成子代RNA及病毒蛋白。（1）正單鏈RNA病毒（有mRNA功能）：正單鏈RNA復制子代RNA結構蛋白（衣殼蛋白等）非結構蛋白（依賴RNA的RNA多聚酶）

雙鏈RNA（復制中間型）藥物作用的靶44精選課件2、RNA病毒（單鏈）：（1）正單鏈RNA病毒（有mRNA功（2）負單鏈RNA病毒（有依賴RNA的RNA多聚酶）：負單鏈RNA依賴RNA的RNA多聚酶正單鏈RNA（有mRNA功能）子代RNA

結構蛋白（衣殼蛋白等）雙鏈RNA（復制中間型）藥物作用的靶解鏈45精選課件（2）負單鏈RNA病毒（有依賴RNA的RNA多聚酶）：負單鏈（3）逆轉錄病毒（有逆轉錄酶，即依賴RNA的DNA多聚酶）：單鏈RNA逆轉錄酶RNADNA（復制中間型）進入細胞核雙鏈DNA整合（前病毒）子代病毒RNA病毒mRNA病毒蛋白質DNA腫瘤發生藥物作用的靶46精選課件（3）逆轉錄病毒（有逆轉錄酶，即依賴RNA的DNA多聚酶）：（四）裝配與釋放(assemblyandrelease)裝配細胞核內細胞質內核膜上胞質膜上釋放

裂解細胞釋放（無包膜病毒）出芽釋放（有包膜病毒）47精選課件（四）裝配與釋放(assemblyandrelease)

裂解細胞后病毒釋放出來48精選課件裂解細胞后病毒釋放出來48精選課件出芽釋放49精選課件出芽釋放49精選課件50精選課件50精選課件51精選課件51精選課件一、病毒的培養：（一）動物接種

1、不同的病毒，易感動物不同，常用動物有：小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猴等；

2、接種的途徑也有多種，可：皮下、皮內、腦內、腹腔、靜脈等接種；

3、病毒→動物→動物出現感染癥狀，據癥狀鑒定病毒或取病變組織進一步檢查。52精選課件一、病毒的培養：（一）動物接種52精選課件3、病毒在細胞內增殖的檢查與鑒定（1）觀察細胞變化(cytopathiceffect,CPE)：CPE——病毒感染細胞后引起的細胞病變。正常成纖維細胞單純皰疹病毒感染后細胞變圓等呼吸道合胞病毒感染后形成多核巨細胞53精選課件3、病毒在細胞內增殖的檢查與鑒定（1）觀察細胞變化(cyt（二）雞胚培養1、接種途徑有：尿囊腔、羊膜腔、卵黃囊、絨毛尿囊膜2、培養數天后，觀察雞胚情況或取培養物進一步鑒定尿囊腔接種羊膜腔接種尿囊腔羊膜腔54精選課件（二）雞胚培養1、接種途徑有：尿囊腔、羊膜腔、卵黃囊、絨毛尿卵黃囊接種絨毛尿囊膜接種卵黃囊絨毛尿囊膜55精選課件卵黃囊接種絨毛尿囊膜接種卵黃囊絨毛尿囊膜55精選課件2、細胞種類：（1）原代細胞：以無菌手續采動物等的組織切碎洗凈后用胰蛋白酶消化得分散的單個細胞，加培養液在細胞瓶內培養所獲得的單層貼壁細胞為原代細胞；原代細胞消化、重新分裝并培養所得細胞為次代細胞。特點：對病毒易感性高，主要作為自標本中分離的工具。56精選課件2、細胞種類：56精選課件（三）組織培養（最常用細胞培養）1、優點：（1）便于純化病毒；（2）可直接觀察細胞變化（包括細胞出現病變或轉化）；（3）可對病毒的復制進行基礎性研究；（4）可進行空斑純化病毒克隆；（5）可滴定病毒含量。57精選課件（三）組織培養（最常用細胞培養）1、優點：57精選課件

（3）二倍體細胞：在體外分裂50-100代后仍保持其二倍染色體數目的單型細胞，常用人胚肺二倍體成纖維細胞。

（2）傳代細胞系：能在體外持續增殖傳代的細胞系，多由癌細胞或二倍體細胞突變而成。58精選課件（3）二倍體細胞：（2三、病毒增殖的細胞效應：（一）損傷：

1、無包膜病毒：阻斷或抑制細胞正常代謝，裂解細胞；

2、有包膜病毒：影響細胞功能及其正常代謝可致細胞死亡；有些則形成細胞間橋或引起細胞融合而致細胞損傷等。59精選課件三、病毒增殖的細胞效應：（一）損傷：59精選課件2、產生原因：（1）第一種病毒感染細胞后使細胞表面受體或代謝途徑發生變化；（2）病毒感染細胞后可誘導細胞產生抑制病毒復制的一組蛋白（干擾素，interferon，IFN）（二）干擾現象(interference)：

1、概念：兩種病毒同時感染同一細胞時，可發生一種病毒的增殖抑制另一種病毒復制的現象，即干擾現象。60精選課件2、產生原因：（二）干擾現象(interferenc四、病毒的異常增殖

1、缺陷干擾顆粒（defectiveinterferingparticles,DIP）

缺陷病毒（defectivevirus）：帶有不完整基因組的病毒；當缺陷病毒不能復制但卻能干擾同種成熟病毒體進入細胞時稱DIP；具有兩面性，一則干擾野毒株復制，二則在野毒株完整基因的輔助下可增殖出完整病毒。61精選課件四、病毒的異常增殖1、缺陷干擾顆粒（defectiv

2、頓挫感染（abortiveinfection）病毒進入宿主細胞后，由于細胞缺乏病毒復制所需的酶或能量等必要條件，使病毒在其中不能合成自身成分，或雖合成病毒核酸及蛋白質，卻不能組裝成完整的病毒體，是為頓挫感染。3、衛星病毒：基因組缺損的病毒62精選課件2、頓挫感染（abortiveinfection）五、理化因素對病毒的影響一、物理因素溫度、PH、射線和紫外線二、化學因素脂溶劑、氧化劑、鹵素、醇類63精選課件五、理化因素對病毒的影響63精選課件六病毒的遺傳變異64精選課件六病毒的遺傳變異64精選課件（一）突變株：

病毒基因改變而發生病毒生物學性狀改變，該毒株若能穩定傳代即為變異株（variant).如：溫度敏感突變株、宿主范圍突變株、病毒毒力變異株、抗原性變異株等。65精選課件（一）突變株：如：溫度敏感突變株、65精選課件（二）重組與重配：將有親緣關系的兩種病毒感染同一細胞時，經相互作用后，病毒間交換核酸片段，發生基因重組(recombination)。

分節段基因組病毒的基因重組(交換基因節段）稱重配(reassortment)。發生幾率較高。66精選課件（二）重組與重配：66精選課件ABababABaBAb基因組不分節段的病毒的重組67精選課件AaaAaA基因組不分節段的病毒的重組67精選課件基因組分節段的病毒的重配+68精選課件基因組分節段的病毒的重配+68精選課件（三）遺傳變異意義：1、變異使病毒逃逸免疫監視——造成疾病流行2、變異使抗病毒治療造成困難。

3、變異改變了病毒抗原抗體，造成檢測的困難。4、變異改變了病毒的毒力——可獲得減度疫苗69精選課件（三）遺傳變異意義：1、變異使病毒逃逸免疫監視——造成疾病流第三節病毒的感染與免疫70精選課件第三節病毒的感染與免疫70精選課件1、水平傳播(horizontaltransmission)

病毒在人群不同個體間的傳播，稱水平傳播。

人群人群

呼吸道、消化道皮膚粘膜、醫源性第一節、病毒的傳播方式71精選課件1、水平傳播(horizontaltransmission2、垂直傳播(verticaltransmission)

病毒通過胎盤或產道，直接由親代傳給子代的方式，稱垂直傳播。

病毒

母體

新生兒胎盤

顯隱胎受先流性性兒染天產感感正胎畸死染染常兒形胎經產道經血72精選課件2、垂直傳播(verticaltransmission)1、細胞水平的病毒感染2、整體水平的病毒感染

73精選課件1、細胞水平的病毒感染73精選課件二病毒的致病機制一、細胞水平的致病機制74精選課件二病毒的致病機制一、細胞水平的致病機制74精選課件（1）溶細胞型感染：

多見于無包膜、殺傷性強的病毒，常引起急性感染。75精選課件（1）溶細胞型感染：75精選課件（2）改變細胞膜結構為特異性抗體或CTL細胞識別抗原（1）細胞膜表面出現嵌合有病毒特異抗原的蛋白成分76精選課件（2）改變細胞膜結構為特異性抗體或抗原（1）細胞膜表面出現嵌多細胞核（2）數個細胞間胞膜互相融和而形成多核巨細胞77精選課件多細胞核（2）數個細胞間胞膜互相融和而形成多核巨細胞77精選（3）大量子代病毒的釋放及機體免疫因子介導細胞死亡78精選課件（3）大量子代病毒的釋放及機體免疫因子介導細胞死亡78精選課（3）包涵體形成:病毒合成的場所病毒顆粒的堆積細胞對病毒感染的反應產物79精選課件（3）包涵體形成:病毒合成的場所79精選課件（4）細胞增生與細胞轉化（1）細胞增生：病毒細胞細胞內DNA合成加快細胞增生可能與腫瘤的發生有關80精選課件（4）細胞增生與細胞轉化（1）細胞增生：病毒細胞細胞內DNA細胞轉化病毒培養細胞細胞轉化

細胞形態變化繁殖加快成堆生長81精選課件細胞轉化病毒培養細胞細胞轉化細胞形態變化81精選課件細胞核（5）病毒基因的整合：細胞核細胞核1、逆轉錄病毒復制時以DNA整合入細胞染色體中；2、失常式整合，DNA病毒多見，病毒的DNA偶而以片段整合入細胞的染色體DNA中。82精選課件細胞核（5）病毒基因的整合：細胞核細胞核1、逆轉錄病毒(6)細胞凋亡：誘導因子（如病毒等）細胞死亡基因激活細胞膜鼓泡細胞核濃縮染色體DNA降解電泳時有階梯式條帶83精選課件(6)細胞凋亡：誘導因子（如病毒等）細胞死亡基因激活細胞膜鼓二、機體水平的致病機制(1)病毒對免疫系統的損傷(2)免疫復合物引起的損傷(3)抗體增強病毒感染作用(4)病毒感染可引起免疫應答的功能紊亂84精選課件二、機體水平的致病機制(1)病毒對免疫系統的損傷(2)免疫復三、病毒的感染類型隱性感染

顯性感染

急性感染持續性感染慢性感染

(chronicinfection)潛伏感染

(latentinfection)

慢發病毒感染

(slowvirusinfection85精選課件三、病毒的感染類型隱性感染急四抗病毒免疫非特異性免疫特異性免疫86精選課件四抗病毒免疫非特異性免疫86精選課件(一)非特異性免疫1、遺傳因素：2、宿主年齡及生理狀態3、屏障作用：4、細胞作用：巨噬細胞、NK細胞等5、病毒抑制物：6、炎癥反應：7、干擾素（IFN）：87精選課件(一)非特異性免疫1、遺傳因素：87精選課件1、干擾素（interferon,IFN）：(1)概念：是個體出生后，機體受到病毒或其他干擾素誘生劑刺激巨噬細胞、淋巴細胞以及體細胞等多種細胞產生的一種糖蛋白。88精選課件1、干擾素（interferon,IFN）：(1)(2)抗病毒特點：A.廣譜抗病毒活性，但只抑制病毒而無殺病毒功能；

B.抗病毒作用有相對的種屬特異性，一般在同種細胞中活性最高；

C.調節免疫功能；

D.抑制腫瘤細胞的作用89精選課件(2)抗病毒特點：A.廣譜抗病毒活性，但只抑制病毒而無α-IFN：人白細胞產生

β-IFN：人成纖維細胞產生

γ-IFN：T細胞產生(3)種類：Ⅰ型IFNⅡ型IFN抗病毒作用強于Ⅱ型免疫調節作用強于Ⅰ型，稱免疫IFN90精選課件α-IFN：人白細胞產生(3)種類：Ⅰ型IFNⅡ型IFN抗(4)抗病毒作用機制：需由宿主細胞介導。α/β干擾素α/β干擾素細胞的干擾素受體細胞合成抗病毒蛋白降解mRNA抑制多肽鏈延伸抑制轉譯活化巨噬細胞和NK細胞促進多種細胞MHC-I類抗原表達91精選課件(4)抗病毒作用機制：需由宿主細胞介導。α/β干擾素α/β干IFN的誘生及抗病毒機制92精選課件IFN的誘生及抗病毒機制92精選課件γ干擾素γ干擾素細胞的干擾素受體細胞合成抗病毒蛋白降解mRNA抑制多肽鏈延伸抑制轉譯促進多種細胞MHC-II類抗原表達促進巨噬細胞表達Fc受體，協同誘導TNF，促進巨噬細胞發揮抗病毒作用。93精選課件γ干擾素γ干擾素細胞的細胞合成降解mRNA促進多種細胞MHC2、

NK細胞：不受MHC限制，也不依賴抗體。IFN等細胞因子NK細胞激活

識別“靶”釋放穿孔素釋放α/βTNF，靶細胞溶酶體破壞活化靶細胞核酸內切酶，降解自體DNA殺傷腫瘤細胞及表達抗原的自體細胞94精選課件2、NK細胞：不受MHC限制，也不依賴抗體。IFN等N(二)特異性免疫病毒蛋白活化B細胞活化T細胞體液免疫細胞免疫抗原的加工呈遞95精選課件(二)特異性免疫病毒活化B細胞活化T細胞體液免疫細胞免疫抗原1、單核/巨噬細胞:

抗原的加工與呈遞內源性抗原蛋白酶體MHC-I病毒蛋白CD8+T細胞CTL殺傷病毒清除病毒感染的主要機制A.與MHC-I分子結合：肽段96精選課件1、單核/巨噬細胞:內源性抗原蛋白酶體MHC-I病毒蛋白CB、與MHC-II分子結合：外源性抗原溶酶體MHC-IICD4+T細胞CD4+T活化吞噬溶酶體合成和分泌大量細胞因子輔助B細胞成熟為漿細胞形成DTH分泌抗體肽段97精選課件B、與MHC-II分子結合：外源性抗原溶酶體MHC-IICD2.體液免疫：病毒機體IgM抗體：最早出現IgG：出現晚IgA：粘膜感染中和抗體、非中和抗體98精選課件2.體液免疫：病毒機體IgM抗體：最早出現IgG：出現晚Ig1、中和抗體——可中和病毒的感染作用機制：（1）改變病毒表面結構或與病毒表位結合以阻止病毒的吸附；（2）與病毒形成免疫復合物有利于巨噬細胞的吞噬和清除；（3）有包膜病毒與抗體結合后，激活補體而使病毒裂解。99精選課件1、中和抗體——可中和病毒的感染作用機制：99精選課件激活補體病毒裂解有包膜病毒100精選課件激活補體病毒裂解有包膜病毒100精選課件2、非中和抗體：（1）因其產生抗原與病毒入侵細胞無關，故不能中和病毒的感染；（2）有時有診斷價值；（3）常見種類有：血凝抑制抗體、補體結合抗體等。101精選課件2、非中和抗體：101精選課件3、抗體介導對靶細胞的作用102精選課件3、抗體介導對靶細胞的作用102精選課件NK細胞殺傷靶細胞NK細胞ADCC作用103精選課件NK細胞殺NK細胞ADCC作用103精選課件3.細胞免疫（特異性免疫以此為主）病毒機體致敏Tc細胞（CTL）致敏TDTH殺傷病毒感染的靶細胞釋放多種細胞因子，直接破壞病毒或調理吞噬的功能104精選課件3.細胞免疫（特異性免疫以此為主）病毒機體致敏Tc細胞（CT(1)殺傷性T細胞（CTL）：蛋白酶體MHC-I病毒蛋白肽段CTLCTLCTL分泌細胞毒素靶細胞破壞分泌穿孔素激活靶細胞內的酶靶細胞裂解或凋亡病毒感染恢復的主要機制105精選課件(1)殺傷性T細胞（CTL）：蛋白酶體MHC-I病毒蛋白肽段(2)輔助性T（TH）細胞：TH

細胞輔助B細胞成熟為漿細胞合成和分泌大量細胞因子分泌抗體活化CTL及巨噬細胞106精選課件(2)輔助性T（TH）細胞：TH細胞輔助B細胞合成和分分泌(3)細胞因子：CD4T細胞病毒抗原分泌抗病毒因子（IFN、TNF）激活CTL、TH、巨噬細胞、NK細胞抑制病毒復制清除靶細胞的病毒107精選課件(3)細胞因子：CD4病毒抗原分泌抗病毒因子（IFN、TNF（四）免疫病理作用1、CTL細胞在殺傷病毒感染的靶細胞的同時，也造成了細胞的損傷，并在感染局部引起炎癥反應；

2、當病毒抗體親和力底或與抗原比例不當時，可在體內形成免疫復合物的沉積而引起III型超敏反應；

3、病毒感染致“隱蔽抗原”的暴露可誘發自身免疫病。108精選課件（四）免疫病理作用1、CTL細胞在殺傷病毒感染第四節病毒微生物學檢查109精選課件第四節病毒微生物學檢查109精選課件（一）、選擇采標本的時間：1、病毒分離鑒定一般取發病初期或急性期標本；2、血清學診斷取患者早期（測IgM)和恢復期雙份血液。（二）不同病毒感染采不同標本：呼吸道感染——采鼻咽分泌物；肺部感染——采痰液腸道感染——采糞便；病毒血癥——采血液神經系統感染——采腦脊液。一、標本的采集與送檢：一、病毒感染的檢查方法110精選課件（一）、選擇采標本的時間：（二）不同病毒感染采不同標本：一、標本送檢：

1、標本采集后應盡快送檢；

2、如不能及時檢查，標本宜置冰壺內保存，病變組織可置于50%甘油鹽水中低溫保存；

3、標本的長期保存應置于-70℃低溫冰箱，或-196℃液氮罐中。111精選課件標本送檢：111精選課件病毒的分離培養和鑒定：（一）細胞培養（最常用）：標本原代細胞傳代細胞細胞病變血細胞吸附PH值改變等特異性抗體鑒定112精選課件病毒的分離培養和鑒定：（一）細胞培養（最常用）：標本原代細胞（二）雞胚接種尿囊腔接種羊膜腔接種流感病毒流感病毒尿液羊水血凝及血凝抑制試驗鑒定病毒（三）動物培養（少用）流感病毒+紅細胞血凝流感病毒+特異抗體血凝被抑制113精選課件（二）雞胚接種尿囊腔接種羊膜腔接種流感病毒流感病毒尿液羊水血雞胚接種114精選課件雞胚接種114精選課件二、病毒感染的快速檢查方法：（一）測抗原：標本+熒光標記抗體（已知）酶標記抗體（已知）熒光顯微鏡觀察加底物后觀察ELISA法：乳膠凝集法：115精選課件二、病毒感染的快速檢查方法：（一）測抗原：標本+熒光標記抗體檢查病毒抗原1、免疫熒光技術：直接法：標本+熒光標記抗體→熒光顯微鏡觀察間接法：標本+抗體+熒光標記二抗→熒光顯微鏡觀察2、酶免疫技術：酶免疫組化法：標本+酶標抗體+酶的底物→光學顯微鏡觀察顏色變化

ELISA法：抗體或抗原（反應板）+待檢抗原或抗體+酶標抗體或抗原

+底物→比色計測底物顏色116精選課件檢查病毒抗原1、免疫熒光技術：2、酶免疫技術：116精選課件測抗體（多用ELISA法）：

IgM型抗體：早期診斷價值；

IgG型抗體：應用早期及恢復期雙份血清，后者抗體效價是前者的4倍以上時，有輔助診斷價值；

IgG型抗體（感染后期）：隨訪測抗體效價，如有4倍降低，有輔助診斷價值。117精選課件測抗體（多用ELISA法）：IgM型抗體：早期診斷價值病毒感染的血清學診斷（雙份血清）

１、中和試驗病毒+待檢血清（系列稀釋）→組織細胞→觀察CPE

２、血凝抑制試驗病毒＋紅細胞（雞、人等）→血凝現象病毒＋待檢血清＋紅細胞（雞、人等）→血凝現象消失118精選課件病毒感染的血清學診斷（雙份血清）１、中和試驗病毒核酸的測定：（一）病毒基因探針法：1、標本

病毒基因探針（標記）+雜交

放射自顯影生物素-親和素系統2、Southern印跡法標本DNA凝膠電泳轉移至膜上+病毒探針分析標本中核酸情況119精選課件病毒核酸的測定：（一）病毒基因探針法：1、標本病毒基因多聚酶鏈反應（PCR）：敏感度極高標本提取核酸DNA+耐熱DNA多聚酶RNA轉錄DNADNA擴增電泳基因片段觀察120精選課件多聚酶鏈反應（PCR）：敏感度極高標本提取核酸DNA+耐熱第五節病毒感染的防治原則121精選課件第五節病毒感染的防治原則121精選課件一.病毒感染的治療病毒穿入脫殼核酸復制、轉錄及蛋白質合成裝配吸附釋放藥物藥物藥物藥物藥物122精選課件一.病毒感染的治療病毒穿入脫殼核酸復制、轉錄裝配吸附釋放藥物一、抗病毒藥物1、設計策略：

以合成的異常嘧啶取代病毒DNA前體的胸腺嘧啶，病毒DNA合成時，異常嘧啶即參入到子代DNA中，阻止子代病毒基因結構的合成和表達，從而抑制病毒的復制或復制出失去感染性的病毒DNAATCAGATTA異常CAGA異常異常123精選課件一、抗病毒藥物1、設計策略：DNAATCAGATTA異常CA皰疹凈無環鳥苷、丙氧鳥苷2、常用藥物：毒副作用大病毒特異性胸苷激酶磷酸化后才起作用AZT（三磷酸化的3-疊氮-2、3二脫氧胸腺嘧啶核苷）：，，，

作為類似病毒核苷酸的底物與之競爭并抑制病毒的逆轉錄酶124精選課件皰疹凈無環鳥苷、丙氧鳥苷2、常用藥物：毒副作用大AZT（三磷3、病毒蛋白酶的抑制物：(1)設計策略：

以基因工程表達病毒蛋白酶后，取其結晶用X衍射及電腦模擬技術尋找酶的活性位點，然后設計出對蛋白酶活性位點的抑制劑。(2)“雞尾酒”療法治療HIV：

3TC（核苷類藥物）+蛋白酶抑制劑125精選課件3、病毒蛋白酶的抑制物：(1)設計策略：(2)“雞尾酒”療

（3）其他生物制劑：干擾素、干擾素誘生劑、IL-1、TNF等；中草藥：黃芪、板蘭根、大青葉等。126精選課件（3）其他126精選課件2、抗病毒基因治療21、設計策略：

DNA病毒：首先選擇病毒基因組的靶基因，然后設計互補的DNA片段（15-30個聚寡核苷酸），當它與病毒的關鍵基因結合后，就可阻抑病毒核酸的復制和轉錄。

RNA病毒：主要通過與靶基因的mRNA互補結合后，一可阻礙mRNA與核糖體結合而阻抑病毒蛋白的轉譯；二則因反義RNA與mRNA結合物對核酸沒敏感而被降解，間接阻斷病毒蛋白質的合成。127精選課件2、抗病毒基因治療21、設計策略：127精選課件2、存在問題：

（1）合成反義DNA或RNA、核酶等所需成本高；（2）制劑不穩定易被核酸酶降解及如何使制劑能有效地到達靶基因等。128精選課件2、存在問題：128精選課件

二、免疫制劑：

1、抗病毒的特異免疫球蛋白；

2、治療性疫苗；

3、細胞因子等。129精選課件二、免疫制劑：129精選課件二病毒感染的預防130精選課件二病毒感染的預防130精選課件(二)滅活疫苗：(一)減毒活疫苗（首選）：(三)、與人類病毒有交叉免疫原性的動物病毒（減毒活疫苗）；131精選課件(二)滅活疫苗：(一)減毒活疫苗（首選）：((四)基因工程疫苗：合成編碼保護性抗原的基因片段克隆表達于載體細胞、真菌細菌等大量增殖基因重組疫苗純化132精選課件(四)基因工程疫苗：合成編碼保護性克隆表達大量增殖基因重組疫(五)核酸疫苗（DNA和RNA疫苗）：由載體（質粒DNA）和編碼病原體某種抗原的cDNA或mRNA組成。細胞免疫體液免疫機體細胞細胞表達病毒抗原核酸疫苗

優點：便于制備、儲存與運輸，可誘生細胞免疫和體液免疫且維持時間長。

不足：效果不很穩定，用于人體，需較極大劑量，且需考慮安全性。133精選課件(五)核酸疫苗（DNA和RNA疫苗）：細胞免疫機體細胞細胞表(六)、其他類型疫苗：模擬病毒表位的合成肽疫苗、抗獨特型疫苗、表達多種抗原表位的聯合多價疫苗等。

被動免疫：免疫血清、胎盤球蛋白、丙種球蛋白、轉移因子等。

134精選課件(六)、其他類型疫苗：被動免疫：134精選課件脊髓灰質炎疫苗減毒活疫苗（人二倍體細胞、Vero細胞）麻疹疫苗減毒活疫苗（雞胚細胞）流行性腮腺炎疫苗減毒活疫苗（雞胚細胞）風疹疫苗減毒活疫苗（人二倍體細胞）甲型肝炎疫苗減毒活疫苗（人二倍體細胞）人用狂犬病疫苗滅活疫苗（地鼠腎細胞）乙型腦炎疫苗滅活疫苗（地鼠腎細胞）森林腦炎疫苗滅活疫苗（地鼠腎細胞）乙型肝炎疫苗基因工程疫苗（酵母菌表達）疫苗名稱疫苗種類（培養細胞種類）我國常見的病毒疫苗135精選課件脊髓灰質炎疫苗減毒活疫苗（人二倍體細胞、（二）脫殼(uncoating)：病毒核酸游離于宿主細胞內。病毒核酸病毒核酸136精選課件（二）脫殼(uncoating)：病毒核酸病毒核酸136精選感謝親觀看此幻燈片，此課件部分內容來源于網絡，如有侵權請及時聯系我們刪除，謝謝配合！感謝親觀看此幻燈片，此課件部分內容來源于網絡，第十五章病毒學概論138精選課件第十五章病毒學概論1精選課件

病毒(virus)的發現1892年發現第一個病毒即煙草花葉病毒1898年發現動物口蹄疫病毒首先被證實對人類有致病性的是黃熱病毒（1901年發現）139精選課件病毒(virus)的發現23000BC，埃及孟非思壁畫中長老患小兒麻痹癥。140精選課件3000BC，埃及孟非思壁畫中長老患小兒麻痹癥。3精選課件病毒的特點：1、體積微小，必須用電子顯微鏡觀察；2、只有一種遺傳物質；3、必須在活細胞內顯示生命活性；4、無完整的細胞結構。141精選課件病毒的特點：4精選課件病毒學:

即研究病毒的本質、病毒與宿主相互作用和規律的生物學科。醫學病毒學:

即研究人類病毒的本質及其與人類疾病關系的一門學科。142精選課件病毒學:醫學病毒學:5精選課件1、臨床約70-80%傳染病是由病毒引起的;2、病毒性疾病對人類健康危害極大;3、近20年來，新病毒不斷被發現，由此引發的病毒性疾病正越來越多的被人們所關注.143精選課件1、臨床約70-80%傳染病是由病毒引起的;6精選課件一、病毒的形態、結構與分類病毒體（virion)——完整的具有傳染性的病毒顆粒，有典型的形態和傳染性。144精選課件一、病毒的形態、結構與分類病毒體（virion)——完整1、測量單位——納米（nm）3、觀察工具——電子顯微鏡2、大多數病毒的直徑小于150nm1病毒的大小

葡萄球菌1000nm立克次體450nm衣原體390nm痘苗病毒300×250nm煙草花葉病病毒100nm流感病毒40nm乙腦病毒30nm脊髓灰質炎病毒70nm腺病毒65×95nm噬菌體145精選課件1、測量單位——納米（nm）3、觀察工具——電子2.病毒的形態：

多為球型，還有桿狀、子彈狀、磚塊狀及蝌蚪狀等。146精選課件2.病毒的形態：9精選課件乙肝病毒腺病毒147精選課件乙肝病毒腺病毒10精選課件輪狀病毒狂犬病毒148精選課件輪狀病毒狂犬病毒11精選課件子彈狀的狂犬病毒149精選課件子彈狀的狂犬病毒12精選課件噬菌體150精選課件噬菌體13精選課件天花病毒Ebola病毒HSV-2151精選課件天花病毒Ebola病毒HSV-214精選課件衣殼（capsid）：由許多蛋白質殼粒組成，保護核酸，介導病毒感染細胞且有抗原性。（二）、病毒的結構與化學組成核心（core）：核酸，構成病毒的基因組（genome）。殼粒(capsomere)：由少數幾種重復的多肽亞單位組成核衣殼裸病毒152精選課件衣殼（capsid）：由許多蛋白質殼粒組成，保護核酸，介導病（1）核心（Core）：核酸→基因組genome→決定病毒遺傳、變異和復制（2）殼粒capsomere→衣殼capsid→保護、介導、抗原性（3）包膜envelope，包膜子粒peplomere（刺突spike）→保護、介導、抗原性

153精選課件（1）核心（Core）：核酸→基因組genome→決定

包膜（envelope）:包繞在核衣殼外，上常有刺突（spike），是病毒的表面抗原。包膜子粒、刺突包膜輔助結構：154精選課件包膜（envelope）:包繞在核衣殼外，上常有刺突155精選課件18精選課件EBV結構模式圖156精選課件EBV結構模式圖19精選課件1）病毒核酸

(1)化學成分為DNA或RNA，據此將病毒分DNA病毒和RNA病毒。

(2)核酸可線型或環型、分單股或雙股，一般DNA病毒為雙股，RNA病毒為單股；大小相差懸殊。

(3)攜帶病毒的全部遺傳信息，是病毒的基因組，控制病毒的生殖、遺傳和變異。2、病毒的化學組成157精選課件1）病毒核酸2、病毒的化學組成20精選課件（2）、病毒蛋白質

結構蛋白組成病毒體的成分

衣殼蛋白包膜蛋白基質蛋白——連接衣殼蛋白與包膜蛋白的部分，有跨膜及錨定功能區非結構蛋白病毒內——酶感染細胞內——特殊作用蛋白158精選課件（2）、病毒蛋白質

結構蛋白組成病毒體的成分21精選4、病毒的蛋白質結構蛋白：是組成病毒體的蛋白成分，可離心沉淀后分離純化。（1）衣殼蛋白：（2）基質蛋白：（3）包膜蛋白：159精選課件4、病毒的蛋白質結構蛋白：是組成病毒體的蛋白成分，可離心沉淀3、病毒包膜包膜子粒、刺突包膜（envelope）:包繞在核衣殼外，上常有刺突（spike），是病毒的表面抗原。包膜160精選課件3、病毒包膜包膜子粒、包膜（envelope）:包繞在核衣殼非結構蛋白：可存在于病毒體內也可僅存在于宿主細胞內。（1）病毒內所有的重要的酶類；（2）抑制宿主細胞生物合成或抑制病毒抗原經MHC遞呈的蛋白；（3）轉化宿主細胞的作用；（4）抗細胞因子或抗細胞凋亡作用。161精選課件非結構蛋白：可存在于病毒體內也可僅存在于宿主細胞內。24精選2、病毒衣殼：由多肽構成的殼微粒組成，有三種排列方式：螺旋對稱立體對稱復合對稱162精選課件2、病毒衣殼：由多肽構成的殼微粒組成，有三種排列方式：螺旋對病毒的幾種對稱類型（據殼粒排列方式所分）螺旋對稱型（helicalsymmetry)163精選課件病毒的幾種對稱類型（據殼粒排列方式所分）螺旋對稱型26精選課20面體立體對稱型(icosahedralsymmetry)：大多數球狀病毒屬之；

164精選課件20面體立體對稱型(icosahedralsymmetry165精選課件28精選課件五鄰體六鄰體166精選課件五鄰體六鄰體29精選課件20面體立體對稱型螺旋對稱型（3）復合對稱型(complexsymmetry167精選課件20面體立體對稱型螺旋對稱型（3）復合對稱型(complex（三）病毒的分類分類原則：1、核酸類型和結構；

2、病毒體的形狀和大小；

3、病毒體的形態結構；

4、對脂溶劑的敏感性。168精選課件（三）病毒的分類分類原則：31精選課件1、DNA病毒類；2、RNA病毒類；

3、DNA和RNA逆轉錄病毒類。169精選課件1、DNA病毒類；32精選課件

其他：1、衛星病毒(satellites):基因組缺陷的病毒，一類為可編碼自已衣殼蛋白；另一為RNA分子，需要輔助病毒的衣殼蛋白。500-2000核苷酸，引起植物病變2、類病毒(viroids):植物病毒，單鏈桿狀RNA有二級結構，200-400核苷酸，無包膜，不含蛋白質3、朊粒(prion):3.0×104的蛋白質，引起瘋牛病……170精選課件其他：1、衛星病毒(satellites):基因組缺陷的病毒（一）病毒的

增殖方式——自我復制(selfreplication)

復制周期：1、吸附和穿入(absorptionandpenetration)2、脫殼(uncoating)3、生物合成(biosynthesis)4、裝配與釋放(assemblyandrelease)二、病毒的增殖復制周期171精選課件（一）病毒的增殖方式——自我復制(selfrepli1.吸附和穿入(absorptionandpenetration)吸附：病毒的表面配體位點與細胞表面特異性受體結合；穿入：病毒進入宿主細胞。吸附胞飲方式穿入172精選課件1.吸附和穿入(absorptionandpenetra吸附膜融合后穿入173精選課件吸附膜融合后穿入36精選課件3.脫殼

病毒體必須脫去蛋白質衣殼后，核酸才能發揮作用。多數病毒穿入細胞以后，隨即有細胞溶酶體的作用，使衣殼蛋白水解，釋放出基因組核酸。但痘病毒特殊，分兩步脫殼。先由溶酶體作用脫去外殼蛋白質，病毒核心（內層衣殼和核酸）釋放于細胞質中。然后再經病毒編碼產生一種脫殼酶，脫去內層衣殼后才能釋放出核酸。螺旋對稱型病毒，如流感病毒RNA仍包裹在蛋白質衣殼內時即可進行轉錄。174精選課件3.脫殼病毒體必須脫去蛋白質衣殼后，核（三）生物合成(biosynthesis)：早期：基因組在細胞內合成非結構蛋白（病毒復制酶及抑制細胞正常生物合成的抑制酶）。晚期：根據基因組的指令在細胞內復制病毒核酸合成結構蛋白和非結構蛋白隱蔽期175精選課件（三）生物合成(biosynthesis)：早期：晚

（2）病毒的定量測定：TCID50(50%tissuecultureinfectivedose)：將病毒進行系列稀釋后行細胞培養，觀察能使半數細胞培養孔或試管內的細胞發生細胞病變（CPE）時的病毒量，即TCID50。176精選課件（2）病毒的定量測定：39精選課件病毒感染細胞后形成嗜酸性或嗜堿性包涵體

狂犬病毒感染后在腦細胞的胞漿內出現嗜酸性圓形或橢圓形的包涵體，可供輔助診斷.177精選課件病毒感染細胞后形成嗜酸性或嗜堿性包涵體狂犬病毒感染后

根據基因組轉錄mRNA及轉譯蛋白質的不同，生物合成可分六大類：DNA病毒雙鏈DNA病毒（多數）單鏈DNA病毒（很少）RNA病毒單正鏈RNA病毒單負鏈RNA病毒雙鏈RNA病毒逆轉錄病毒178精選課件根據基因組轉錄mRNA及轉譯蛋白質的不同，生物合成可1、DNA病毒（雙鏈）：細胞核內合成DNA，細胞質內合成病毒蛋白。早期：病毒DNA依賴DNA的RNA多聚酶早期mRNA轉譯早期蛋白DNA多聚酶脫氧胸腺嘧啶激酶調控病毒基因組轉錄的酶抑制宿主細胞生物合成的酶藥物作用的靶179精選課件1、DNA病毒（雙鏈）：早期：病毒DNA依賴DNA的早期mR晚期：解鏈正鏈DNA負鏈DNADNA多聚酶子代DNA轉錄晚期mRNA晚期蛋白病毒衣殼蛋白及其他結構蛋白180精選課件晚期：解鏈正鏈DNADNA多聚酶子代DNA轉錄晚期mRNA晚2、RNA病毒（單鏈）：多數在細胞質內合成子代RNA及病毒蛋白。（1）正單鏈RNA病毒（有mRNA功能）：正單鏈RNA復制子代RNA結構蛋白（衣殼蛋白等）非結構蛋白（依賴RNA的RNA多聚酶）

雙鏈RNA（復制中間型）藥物作用的靶181精選課件2、RNA病毒（單鏈）：（1）正單鏈RNA病毒（有mRNA功（2）負單鏈RNA病毒（有依賴RNA的RNA多聚酶）：負單鏈RNA依賴RNA的RNA多聚酶正單鏈RNA（有mRNA功能）子代RNA

結構蛋白（衣殼蛋白等）雙鏈RNA（復制中間型）藥物作用的靶解鏈182精選課件（2）負單鏈RNA病毒（有依賴RNA的RNA多聚酶）：負單鏈（3）逆轉錄病毒（有逆轉錄酶，即依賴RNA的DNA多聚酶）：單鏈RNA逆轉錄酶RNADNA（復制中間型）進入細胞核雙鏈DNA整合（前病毒）子代病毒RNA病毒mRNA病毒蛋白質DNA腫瘤發生藥物作用的靶183精選課件（3）逆轉錄病毒（有逆轉錄酶，即依賴RNA的DNA多聚酶）：（四）裝配與釋放(assemblyandrelease)裝配細胞核內細胞質內核膜上胞質膜上釋放

裂解細胞釋放（無包膜病毒）出芽釋放（有包膜病毒）184精選課件（四）裝配與釋放(assemblyandrelease)

裂解細胞后病毒釋放出來185精選課件裂解細胞后病毒釋放出來48精選課件出芽釋放186精選課件出芽釋放49精選課件187精選課件50精選課件188精選課件51精選課件一、病毒的培養：（一）動物接種

1、不同的病毒，易感動物不同，常用動物有：小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猴等；

2、接種的途徑也有多種，可：皮下、皮內、腦內、腹腔、靜脈等接種；

3、病毒→動物→動物出現感染癥狀，據癥狀鑒定病毒或取病變組織進一步檢查。189精選課件一、病毒的培養：（一）動物接種52精選課件3、病毒在細胞內增殖的檢查與鑒定（1）觀察細胞變化(cytopathiceffect,CPE)：CPE——病毒感染細胞后引起的細胞病變。正常成纖維細胞單純皰疹病毒感染后細胞變圓等呼吸道合胞病毒感染后形成多核巨細胞190精選課件3、病毒在細胞內增殖的檢查與鑒定（1）觀察細胞變化(cyt（二）雞胚培養1、接種途徑有：尿囊腔、羊膜腔、卵黃囊、絨毛尿囊膜2、培養數天后，觀察雞胚情況或取培養物進一步鑒定尿囊腔接種羊膜腔接種尿囊腔羊膜腔191精選課件（二）雞胚培養1、接種途徑有：尿囊腔、羊膜腔、卵黃囊、絨毛尿卵黃囊接種絨毛尿囊膜接種卵黃囊絨毛尿囊膜192精選課件卵黃囊接種絨毛尿囊膜接種卵黃囊絨毛尿囊膜55精選課件2、細胞種類：（1）原代細胞：以無菌手續采動物等的組織切碎洗凈后用胰蛋白酶消化得分散的單個細胞，加培養液在細胞瓶內培養所獲得的單層貼壁細胞為原代細胞；原代細胞消化、重新分裝并培養所得細胞為次代細胞。特點：對病毒易感性高，主要作為自標本中分離的工具。193精選課件2、細胞種類：56精選課件（三）組織培養（最常用細胞培養）1、優點：（1）便于純化病毒；（2）可直接觀察細胞變化（包括細胞出現病變或轉化）；（3）可對病毒的復制進行基礎性研究；（4）可進行空斑純化病毒克隆；（5）可滴定病毒含量。194精選課件（三）組織培養（最常用細胞培養）1、優點：57精選課件

（3）二倍體細胞：在體外分裂50-100代后仍保持其二倍染色體數目的單型細胞，常用人胚肺二倍體成纖維細胞。

（2）傳代細胞系：能在體外持續增殖傳代的細胞系，多由癌細胞或二倍體細胞突變而成。195精選課件（3）二倍體細胞：（2三、病毒增殖的細胞效應：（一）損傷：

1、無包膜病毒：阻斷或抑制細胞正常代謝，裂解細胞；

2、有包膜病毒：影響細胞功能及其正常代謝可致細胞死亡；有些則形成細胞間橋或引起細胞融合而致細胞損傷等。196精選課件三、病毒增殖的細胞效應：（一）損傷：59精選課件2、產生原因：（1）第一種病毒感染細胞后使細胞表面受體或代謝途徑發生變化；（2）病毒感染細胞后可誘導細胞產生抑制病毒復制的一組蛋白（干擾素，interferon，IFN）（二）干擾現象(interference)：

1、概念：兩種病毒同時感染同一細胞時，可發生一種病毒的增殖抑制另一種病毒復制的現象，即干擾現象。197精選課件2、產生原因：（二）干擾現象(interferenc四、病毒的異常增殖

1、缺陷干擾顆粒（defectiveinterferingparticles,DIP）

缺陷病毒（defectivevirus）：帶有不完整基因組的病毒；當缺陷病毒不能復制但卻能干擾同種成熟病毒體進入細胞時稱DIP；具有兩面性，一則干擾野毒株復制，二則在野毒株完整基因的輔助下可增殖出完整病毒。198精選課件四、病毒的異常增殖1、缺陷干擾顆粒（defectiv

2、頓挫感染（abortiveinfection）病毒進入宿主細胞后，由于細胞缺乏病毒復制所需的酶或能量等必要條件，使病毒在其中不能合成自身成分，或雖合成病毒核酸及蛋白質，卻不能組裝成完整的病毒體，是為頓挫感染。3、衛星病毒：基因組缺損的病毒199精選課件2、頓挫感染（abortiveinfection）五、理化因素對病毒的影響一、物理因素溫度、PH、射線和紫外線二、化學因素脂溶劑、氧化劑、鹵素、醇類200精選課件五、理化因素對病毒的影響63精選課件六病毒的遺傳變異201精選課件六病毒的遺傳變異64精選課件（一）突變株：

病毒基因改變而發生病毒生物學性狀改變，該毒株若能穩定傳代即為變異株（variant).如：溫度敏感突變株、宿主范圍突變株、病毒毒力變異株、抗原性變異株等。202精選課件（一）突變株：如：溫度敏感突變株、65精選課件（二）重組與重配：將有親緣關系的兩種病毒感染同一細胞時，經相互作用后，病毒間交換核酸片段，發生基因重組(recombination)。

分節段基因組病毒的基因重組(交換基因節段）稱重配(reassortment)。發生幾率較高。203精選課件（二）重組與重配：66精選課件ABababABaBAb基因組不分節段的病毒的重組204精選課件AaaAaA基因組不分節段的病毒的重組67精選課件基因組分節段的病毒的重配+205精選課件基因組分節段的病毒的重配+68精選課件（三）遺傳變異意義：1、變異使病毒逃逸免疫監視——造成疾病流行2、變異使抗病毒治療造成困難。

3、變異改變了病毒抗原抗體，造成檢測的困難。4、變異改變了病毒的毒力——可獲得減度疫苗206精選課件（三）遺傳變異意義：1、變異使病毒逃逸免疫監視——造成疾病流第三節病毒的感染與免疫207精選課件第三節病毒的感染與免疫70精選課件1、水平傳播(horizontaltransmission)

病毒在人群不同個體間的傳播，稱水平傳播。

人群人群

呼吸道、消化道皮膚粘膜、醫源性第一節、病毒的傳播方式208精選課件1、水平傳播(horizontaltransmission2、垂直傳播(verticaltransmission)

病毒通過胎盤或產道，直接由親代傳給子代的方式，稱垂直傳播。

病毒

母體

新生兒胎盤

顯隱胎受先流性性兒染天產感感正胎畸死染染常兒形胎經產道經血209精選課件2、垂直傳播(verticaltransmission)1、細胞水平的病毒感染2、整體水平的病毒感染

210精選課件1、細胞水平的病毒感染73精選課件二病毒的致病機制一、細胞水平的致病機制211精選課件二病毒的致病機制一、細胞水平的致病機制74精選課件（1）溶細胞型感染：

多見于無包膜、殺傷性強的病毒，常引起急性感染。212精選課件（1）溶細胞型感染：75精選課件（2）改變細胞膜結構為特異性抗體或CTL細胞識別抗原（1）細胞膜表面出現嵌合有病毒特異抗原的蛋白成分213精選課件（2）改變細胞膜結構為特異性抗體或抗原（1）細胞膜表面出現嵌多細胞核（2）數個細胞間胞膜互相融和而形成多核巨細胞214精選課件多細胞核（2）數個細胞間胞膜互相融和而形成多核巨細胞77精選（3）大量子代病毒的釋放及機體免疫因子介導細胞死亡215精選課件（3）大量子代病毒的釋放及機體免疫因子介導細胞死亡78精選課（3）包涵體形成:病毒合成的場所病毒顆粒的堆積細胞對病毒感染的反應產物216精選課件（3）包涵體形成:病毒合成的場所79精選課件（4）細胞增生與細胞轉化（1）細胞增生：病毒細胞細胞內DNA合成加快細胞增生可能與腫瘤的發生有關217精選課件（4）細胞增生與細胞轉化（1）細胞增生：病毒細胞細胞內DNA細胞轉化病毒培養細胞細胞轉化

細胞形態變化繁殖加快成堆生長218精選課件細胞轉化病毒培養細胞細胞轉化細胞形態變化81精選課件細胞核（5）病毒基因的整合：細胞核細胞核1、逆轉錄病毒復制時以DNA整合入細胞染色體中；2、失常式整合，DNA病毒多見，病毒的DNA偶而以片段整合入細胞的染色體DNA中。219精選課件細胞核（5）病毒基因的整合：細胞核細胞核1、逆轉錄病毒(6)細胞凋亡：誘導因子（如病毒等）細胞死亡基因激活細胞膜鼓泡細胞核濃縮染色體DNA降解電泳時有階梯式條帶220精選課件(6)細胞凋亡：誘導因子（如病毒等）細胞死亡基因激活細胞膜鼓二、機體水平的致病機制(1)病毒對免疫系統的損傷(2)免疫復合物引起的損傷(3)抗體增強病毒感染作用(4)病毒感染可