第3章

消毒滅菌教學要求1、掌握消毒、滅菌、防腐和無菌的基本概念。高壓蒸氣滅菌的機理、應用范圍及注意點。紫外線殺菌法、濾過除菌法機理、應用范圍及注意點。2、理解其它熱力滅菌的種類、原理及應用范圍。3、了解常用化學消毒劑的的種類、殺菌機理及應用。影響消毒滅菌效果的因素。消毒滅菌常用術語滅菌（sterilization）：殺滅物體上所有微生物

的方法。消毒（disinfection）：殺死物體上或環(huán)境中的

病原微生物的方法。消毒劑。防腐（antisepsis）：防止或抑制細菌生長繁殖的方

法。清潔（cleaning）：是指通過除去塵埃和一切污

穢以減少微生物數(shù)量的過程。無菌（asepsis）和無菌操作：無菌是無活菌，

滅菌的結果。防止細菌進入人體

或其它物品的操作技術，稱為無菌操作。第一節(jié)物理消毒滅菌法一、熱力滅菌法

最常用（一）原理

高溫對細菌有明顯的致死作用：

①蛋白質(zhì)的變性；②核酸的斷裂

（二）干熱滅菌法

1.焚燒：最徹底，適用于病理性廢棄物品或動物尸體第一節(jié)物理消毒滅菌法一、熱力滅菌法（二）干熱滅菌法

2.燒灼：火焰滅菌，適用接種環(huán)、試管口

3.干烤：干烤箱，160-170℃，2h，適用于高溫下不損壞，不變質(zhì)、不蒸發(fā)的物品。玻璃、瓷器

4.紅外線：電磁波、在表面好。紅外線烤箱所需溫度和時間同干烤箱。適用于醫(yī)療器械滅菌第一節(jié)物理消毒滅菌法一、熱力滅菌法（三）濕熱滅菌法最常用

在同一溫度下比干熱效力大（1）濕熱條件下菌體蛋白較易凝固變性（2）濕熱的穿透力比干熱大（3）濕熱的蒸汽有潛熱存在。第一節(jié)物理消毒滅菌法一、熱力滅菌法（三）濕熱滅菌法1.巴氏消毒法：61.1-62.8℃，30min；71.7℃，15-30s。牛乳、酒類等液體低溫殺滅病菌。2.煮沸法：100℃5min（繁殖體）2h（芽孢）。食具、刀剪、注射器。加NaHCO3提沸點到105℃3.流動蒸汽消毒法：蒸汽100℃15-30min（繁殖體），類似蒸籠。第一節(jié)物理消毒滅菌法一、熱力滅菌法（三）濕熱滅菌法4.間歇蒸汽滅菌法：反復多次流動蒸汽間歇加熱滅菌。不耐高熱的含糖，牛奶等的培養(yǎng)基。5.高壓蒸汽滅菌法（1）最常用，最好（2）103.4kPa，121.3℃，15-20min，殺所有微生物（3）常用于耐高溫、耐濕物品的滅菌，如一般培養(yǎng)基、生理鹽水、手術敷料等。第一節(jié)物理消毒滅菌法二、輻射殺菌法1.紫外線殺菌（1）波長：240-300nm的紫外線有殺菌作用，其中以265-266nm最強（2）殺菌機制：作用于DNA，形成胸腺嘧啶二聚體，干擾DNA的復制與轉錄。（3）殺菌作用特點①穿透力弱，用于空氣及物品表面的消毒②只殺繁殖體，不能殺芽孢③對人皮膚、眼睛有損傷，注意防護。（4）適用范圍：手術室、傳染病房、無菌實驗室的空氣消毒，或不耐熱物品的表面消毒第一節(jié)物理消毒滅菌法二、輻射殺菌法2.電離輻射（β射線、γ射線）

用途：干擾DNA合成，大量的一次性醫(yī)用塑料制品的消毒食品、藥品、生物制品，不破壞營養(yǎng)。

3.微波

用途：產(chǎn)生熱效應。非金屬器械、食品、食具、檢驗室用品、藥杯等。第一節(jié)物理消毒滅菌法三、濾過除菌法1.用物理阻留的方法將液體或空氣中的細菌除去，達到無菌的目的。2.細菌不能過孔徑，可除去，不能除去病毒。3.用于不耐高溫的血清、毒素、抗生素除菌4.液體除菌用濾菌器，空氣除菌用生物潔凈技術。濾菌器和層流室（生物潔凈室）第一節(jié)物理消毒滅菌法四、干燥與低溫抑菌法1.干燥：可使細菌內(nèi)的水分逸出，使細菌生命活動停止。保存食物。2.低溫：可使細菌的新陳代謝減慢，影響細菌的生長。保存菌種。3.冷凍真空干燥法：保存菌種的最好方法保存微生物數(shù)年-數(shù)十年。第二節(jié)化學消毒滅菌法一、原理1.促進菌體蛋白質(zhì)變性或凝固2.干擾細菌的酶系統(tǒng)和代謝3.損傷細菌細胞膜第二節(jié)化學消毒滅菌法二、種類（一）高效消毒劑：殺死芽孢

1.含氯消毒劑；2.過氧化物消毒劑；

3.醛類消毒劑；4.環(huán)氧乙烷（二）中效消毒劑

1.含碘消毒劑；2.醇類消毒劑（三）低效消毒劑

1.季銨鹽類；2.氯已定；3.高錳酸鉀第三節(jié)消毒滅菌的運用一、醫(yī)療器械物品的消毒滅菌（一）高危器械物品

需進入無菌組織

的物品。所有這些物品都應該滅菌。（二）中危器械物品

不進入無菌組織

但接觸黏膜的器械。采用消毒即可。（三）低危器械物品

只接觸未損傷皮膚但

不進入無菌組織和不接觸黏膜的物品。

一般用后清洗、消毒即可。（四）快速周轉的醫(yī)療器械牙鉆、牙科手術器械等

用瞬時滅菌、微波滅菌、高效消毒劑第三節(jié)消毒滅菌的運用二、室內(nèi)空氣消毒滅菌

1.物理消毒法：①紫外線照射（1.5W/m3，1h）最常用；②濾過除菌：空氣通過孔徑小于0.2μm的高效過濾裝置以除去細菌和帶菌塵埃。

2．化學消毒法：包括化學消毒劑噴霧和熏蒸：①過氧乙酸噴霧、熏蒸；②過氧化氫噴霧；③二氧化氯溶液噴灑；④中草藥點燃煙熏。三、手和皮膚的消毒

手上有暫住菌和常駐菌

用肥皂和流動水經(jīng)常并正確洗手

病原微生物污染時應用消毒劑消毒。第三節(jié)消毒滅菌的運用（四）黏膜的消毒

口腔-過氧化氫（五）病人排泄物與分泌物的消毒滅菌

糞、尿、痰、膿液--次氯酸鈉、漂白粉（六）病人污染物品的消毒

（七）飲水的消毒

自來水--氯氣，少量飲用水—漂白粉（八）環(huán)境的消毒病人住過的房間、地面--過氧乙酸、含氯消毒液廁所、陰溝—生石灰（有效成分是氫氧化鈉）

第四節(jié)影響消毒滅菌效果的因素一、微生物的種類二、微生物的物理狀態(tài)三、微生物的數(shù)量四、消毒劑性質(zhì)、濃度與作用時間五、溫度六、酸堿度七、有機物第五節(jié)病原微生物實驗室生物安全一、病原微生物的分類根據(jù)傳染性和危害分四類：其中一類和二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。二、病原微生物實驗室的分級根據(jù)實驗室對病原微生物的生物安全防護水平（BSL）及實驗室生物安全國家標準，實驗室分一、二、三、四級。三、四級實驗室從事高致病性病原微生物實驗活動。1.殺滅芽胞最常用和最有效的方法是：____________。a.紫外線照射b.煮沸5minc.巴氏消毒法d.流通蒸氣滅菌法e.高壓蒸氣滅菌法2.滅菌方法錯誤的是____________。a.手術室空氣-紫外線b.排泄物-漂白粉c.飲水-氯氣d.含血清培養(yǎng)基-高壓蒸氣滅菌e.溫度計-75%酒精3.下述不可能殺滅細菌芽胞的方法是：____________。a.煮沸法b.巴氏消毒法c.間歇滅菌法d.干熱滅菌法e.高壓蒸氣滅菌法4.關于紫外線，說法錯誤的是____________。a.其殺菌作用與波長有關b.可損壞細菌的DNA構型c.265-266nm殺菌作用最強d.其穿透力弱，故對人體無損害e.紫外線適用空氣和物體表面的消毒5.常用于空氣或物體表面的消毒____________。a.高壓蒸氣滅菌法b.紫外線照射法c.濾過除菌法d.巴氏消毒法e.干烤法

6.常用于基礎培養(yǎng)基滅菌____________。a.高壓蒸氣滅菌法b.紫外線照射法c.濾過除菌法d.巴氏消毒法e.干烤法7.常用于手術器械的滅菌____________。a.高壓蒸氣滅菌法b.紫外線照射法c.濾過除菌法d.巴氏消毒法

e.干烤法8.常用于血清的除菌____________。a.高壓蒸氣滅菌法b.濾過除菌法c.紫外線照射法