一、免疫學技術的類型按抗原抗體反應性質不同，可分為凝集性反應、標記抗體技術、有補體參與的反應、中和反應以及電免疫反應、免疫轉印、蛋白質

等技術。凝集試驗

直接凝集試驗、間接凝

集試驗、乳膠凝集試驗沉淀試驗

環狀沉淀試驗、絮狀沉淀試驗、瓊脂擴散試驗、免疫電泳補體參與的試驗

補體結合試驗4

標記抗體技術熒光抗體技術、酶標抗體技術、放射免疫測定、化學發光標記技術、免疫電鏡技術、免疫膠體金技術中和試驗電免疫反應中和試驗免疫傳感器技術7

免疫

技術蛋白質

技術二、

學反應的特點1、抗原抗體結合的特異性與交叉性學反應具有高度的特異性，如豬瘟

的抗體只與豬瘟

結合。同一抗原分子可具有多種不同的抗原表位，若兩種不同的抗原具有一個或多個相同（相似）的抗原表位，在與相應抗體反應時可出現交叉反應（crossreacion)2、抗原抗體結合的可逆性抗原與抗體的結合為弱能量的共價結合，其結合力取決于抗體的抗原結合位點與抗原表位之間形成的共價鍵的數量、性質和距離，由此可分為高親和力、中親和力和低親和力抗體。抗原抗體結合是分子表面的結合，該過程受物理、化學和熱力學的法則所制約，結合溫度在

0~40℃，pH在4~9。如溫度超過60或pH在3以

下，則可解離。等價帶表示抗原與抗體比例最合適，形成大而多的結合物，此時在反應體系中測不出或有極少游離的抗原或抗體；抗體過剩帶（前帶）和抗原過剩帶（后帶）皆表示抗原與抗體的比例不合適，所形成的結合物少且小，在反應體系中存在著較多的游離抗原或抗體3、抗原抗體結合的比例性與結合物的可見性4、抗原抗體反應的階段性第一階段是抗原抗體的特異結合，此階段僅需幾秒到幾分鐘，尚無可見反應第二階段為可見反應階段，需數分鐘、數小時乃至數日，受各種因素影響三、抗原抗體反應的主要影響因素1、抗原和抗體濃度、比例抗原和抗體濃度、比例對抗原抗體反應影響最大、是決定性因素，如前所述。2、電解質3、溫度4、酸堿度四學技術的應用一、動物疫病二、動植物體內生理活性物質研究三、物種及微生物鑒定四、生物制品研究五、動物疫病致病機理研究六、分子生物學研究第二節凝集反應

（agglutination）(動畫演示)凝集試驗是指顆粒性抗原（細菌、細胞等）與相應的抗體，或可溶性抗原（亦可用抗體）吸附于與免疫無關的載體，形成致敏顆粒（免疫微球）與相應的抗體（或抗原），在有合適的電解質存在下，形成肉眼可見的凝集小塊。一、直接凝集試驗(direct

agglutination

test)顆粒性抗原與相應抗體直接結合，并出現凝集現象的試驗，稱直接凝集試驗。按操作方法，分為玻片法和試管法兩種。1

玻片法為一種定性試驗。是將含有已知抗體的（適當稀釋）與待檢菌懸液各一滴在玻片上混合，數分鐘后，出現顆粒狀凝集。方便快速，用于細菌的鑒定或分型。2

試管法為一種半定量試驗。用以檢測待檢

中是否存在相應抗體和測定該抗體的效價。可作為臨床

或流行病學

。操作時將待檢

進行倍比稀釋，然后加入等量抗原，37℃水浴數小時，觀察凝集程度。二間接凝集試驗（indirctagglutination）可溶性抗原（或抗體）先吸附于一種與免疫無關的、一定大小的不溶性顆粒表面，然后與相應的抗體（或抗原）作用，在有電解質存在的適宜條件下，出現特異性的凝集反應。常用的載體有紅細胞、乳膠、炭粉、離子交

換樹脂等。可溶性抗原為細菌的裂解物或浸出液、、

物或裂解物、各種蛋白等。1

間接血凝試驗

(indirect

hemagglutination

test)亦稱為

血凝試驗，是將可溶性抗原致敏于紅細胞表面，用以檢測相應抗體。如用抗體致敏于紅細胞表面，用以檢測相應抗原，稱反向間接血凝試驗（reverse

passivehemagglutination

test).乳膠凝集試驗

（Latex

agglutination

test)協同凝集試驗（co-agglutination

test）覆蓋有特異性抗體的金黃色葡萄球菌與相應的抗原結合時，可產生凝集反應，稱協同凝集試驗.因金黃色葡萄球菌表面有SPA，能與多種動物的IgG結合。第三節沉淀反應(precipitation

test)沉淀反應是指可溶性抗原與相應抗體在合適電解質存在下，出現肉眼可見的白色沉淀。參與反應的抗原稱沉淀原，抗體稱沉淀素。可溶性抗原分子量小，單位體積內所含的量多，在做定量實驗時，常稀釋抗原，否則易出現前帶現象。1

環狀沉淀試驗（ring

precipitation

test)是最簡單的沉淀試驗，目前仍使用。在一支小口徑試管內，先加入已知抗體，然后沿管壁加入待檢抗原疊加于抗體表面。數分鐘后，液面交界處出現白色環狀沉淀。如Ascoli試驗2

瓊脂擴散試驗（

瓊脂是一種含有硫酸基的多糖，高溫可溶解于水，冷卻后形成凝膠。其呈多孔結構，內充滿水分，1%瓊脂凝膠的孔徑有85nm。因此可允許抗原抗體在里面

擴散。（1）雙向雙擴散（double

diffusion

in

two

dimension)又稱雙擴散。是在1%的瓊脂凝膠板上澆注2~3mm的凝膠板，在上面打梅花孔或長方形槽，在相鄰

抗原或抗體，在飽和濕度下擴散24小時，觀察沉淀帶。雙向單擴散（simple

diffusion

intwo

dimension)又稱輻射擴散