小組成員：組長：曾明潔組員：李青林李競坤李梓杏陳柏岑曾小文LOGO無憂PPT原創(chuàng)商務(wù)模板案例分析

一位25歲的廣西籍孕婦在其12周孕期時到醫(yī)院婦產(chǎn)科進(jìn)行首次產(chǎn)前檢查，這是她的首次懷孕，她非常關(guān)注她懷的小孩患家族其他成員出現(xiàn)的一種遺傳性血液病的風(fēng)險。孕婦主訴輕度貧血史，但是沒有向她哥哥那樣嚴(yán)重，其哥哥患有嚴(yán)重的貧血，需要經(jīng)常輸血，10歲去世。該孕婦以往被診斷為貧血，但沒有任何貧血的癥狀。體格檢查符合12周妊娠，超聲波檢查確診為12周宮內(nèi)妊娠，血液檢查顯示為小細(xì)胞低色素貧血（血紅蛋白（HB）濃度為90g/L）,血紅蛋白電泳分析顯示血紅蛋白A2（HbA2）含量增高（4.0%），胎兒血紅蛋白量也增高，符合輕型β-地中海的表現(xiàn)。為了檢查胎兒是否患有地中海貧血，孕婦進(jìn)行了絨毛膜穿刺檢查，幾個小時后得到診斷結(jié)果。

由于珠蛋白基因缺陷或點(diǎn)突變，使血紅蛋白中的珠蛋白肽鏈有一種或幾種合成減少或不能合成，導(dǎo)致血紅蛋白組成成分發(fā)生改變，最重要的是患者一生都會受到貧血的影響。（材料）診斷：β-地中海貧血CD41-42(-CTTT)缺失突變

什么是貧血？末梢血中單位容積內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)或血紅蛋白量低于正常值。我國成年男性Hb<120g/L，成年女性（非妊娠）Hb<110g/L，孕婦Hb<100g/L，就是貧血。造成貧血的原因有多種：缺鐵、出血、溶血、造血功能障礙等。

(《臨床遺傳學(xué)》2010人民出版社韓驊)

貧血的嚴(yán)重程度分類：

分級血紅蛋白（g/L）臨床表現(xiàn)

輕度120～91(12～9.1g/dl)癥狀輕微

中度90～61(9～6.1g/dl)體力勞動后感到心慌、氣短

重度60～31(6～3.1g/dl)臥床休息時也感心慌、氣短

極度<30(3.0以下g/dl)常合并貧血性心臟病貧血超聲波檢查

利用超聲產(chǎn)生的波在人體內(nèi)傳播時，通過示波屏顯示體內(nèi)各種器官和組織對超聲的反射和減弱規(guī)律來診斷疾病的一種方法。超聲波具有良好的方向性，當(dāng)在人體內(nèi)傳播過程中，遇到密度不同的組織和器官，即有反射、折射和吸收等現(xiàn)象產(chǎn)生。根據(jù)示波屏上顯示的回波的距離、弱強(qiáng)和多少，以及衰減是否明顯，可以顯示體內(nèi)某些臟器的活動功能，并能確切地鑒別出組織器官是否含有液體或氣體，或?yàn)閷?shí)質(zhì)性組織。小細(xì)胞低色素貧血在缺鐵性貧血的早期，多為正常細(xì)胞性貧血，表現(xiàn)為輕度貧血；隨著進(jìn)展，紅細(xì)胞和血紅蛋白進(jìn)一步下降，出現(xiàn)明顯的小細(xì)胞低色素性貧血，呈典型的缺鐵性貧血。所以出現(xiàn)典型小細(xì)胞低色素貧血，可見于缺鐵性貧血的晚期。絨毛膜取樣術(shù)-適用人群

適用于高危險群通常進(jìn)行絨毛膜取樣者是經(jīng)第一孕期篩檢后為高危險群者，意即后頸部透明帶太厚或超音波即發(fā)現(xiàn)胎兒結(jié)構(gòu)異常者，或高齡產(chǎn)婦擔(dān)心胎兒可能異常、前次懷孕有過染色體異常者，亦或是夫妻兩人有一人有染色體異常者。蕭慶華醫(yī)師表示，若是絨毛膜取樣術(shù)早于懷孕10周前實(shí)施，會有些許胎兒肢體異常現(xiàn)象，為了避免此風(fēng)險，會在11周后才實(shí)施絨毛膜取樣術(shù)。但若絨毛膜取樣結(jié)果為正常，也不百分百代表會生出健康的胎兒，因人類肢體先天的缺陷占了約2～3%，這部分則不在絨毛膜取樣術(shù)的檢驗(yàn)之內(nèi)。

地中海貧血（簡稱地貧）指海的貧血，它不是一種簡單的病癥，而是一種遺傳性溶血性貧血；其共同特點(diǎn)是由于珠蛋白基因的缺陷或點(diǎn)突變使血紅蛋白中的珠蛋白肽鏈有一種或幾種合成減少或不能合成，導(dǎo)致血紅蛋白的組成成分改變。1．

陸再英，鐘南山。內(nèi)科學(xué)（第7版）北京：人民衛(wèi)生出版社。2008年pp587-589陳灝珠，實(shí)用內(nèi)科學(xué)（第12版）.北京：人民衛(wèi)生出版社，2005.pp2371-2374）

地中海貧血？深度剖析β-地中海貧血的發(fā)病機(jī)制β-地中海貧血的分子基礎(chǔ)如何檢測β-地中海貧血為什么患者HbA2增高

當(dāng)β基因缺陷時β-珠蛋白生成障礙，ξ珠蛋白代償性增加，進(jìn)而α2ξ2含量增加，HbA2相對含量增加?！秶a(chǎn)全自動電泳系統(tǒng)檢測礙性貧血HbA2診斷p珠蛋白生成障》張新華，周艷潔，李平萍，羅瑞貴，阮麗明，吳志奎，李敏，黃有文臨床檢驗(yàn)雜志2007年第25卷第l期β-地中海貧血的分子基礎(chǔ)β-珠蛋白基因突變

β珠蛋白基因簇在11號染色體短臂上，包含5個功能基因和1個假基因，功能基因結(jié)構(gòu)中有3個編碼序列（稱為外顯子）被2個插入序列（稱為內(nèi)含子）所分開，經(jīng)過切除內(nèi)含子拼接外顯子，在5’端加上“帽”結(jié)構(gòu)，3’端加上多聚腺苷酸、轉(zhuǎn)錄的mRNA便形成為成熟的mRNA。當(dāng)β珠蛋白基因或者與其相關(guān)的DNA序列發(fā)生點(diǎn)突變時，在轉(zhuǎn)錄、RNA的加工及翻譯過程中出現(xiàn)各種障礙，導(dǎo)致β珠蛋白合成不足或缺如。

（β-珠蛋白基因突變結(jié)構(gòu)圖）

目前，中國人最常見的β-地中海貧血突變類型有以下5種《多重等位基因PCR技術(shù)對中國人5種常見β-地中海貧血突變的快速產(chǎn)前診斷》

焦飛，趙新東,馬穎，劉長福

第44卷第6期2008年12月青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)CD71-72CD41-42CD17-0IVS-II-654(C—T)-28A—G突變類型對基因表達(dá)的影響表現(xiàn)CD71-72(+T)翻譯過程中移碼突變β0CD41-42(-TCTT)β0CD17（AT）RNA加工中無義突變β0IVS-II-654(CT)RNA加工突變，插入序列β+-28(AG)轉(zhuǎn)錄過程中點(diǎn)突變β+羅超權(quán)?；蛟\斷與基因治療進(jìn)展鄭州：河南醫(yī)科大學(xué)出版社，1992.12這些突變對基因表達(dá)的影響影響：基因（Gene）是指攜帶有遺傳信息的DNA序列，是控制性狀的基本遺傳單位?；蛲ㄟ^指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成來表達(dá)自己所攜帶的遺傳信息，從而控制生物個體的性狀表現(xiàn)。基因有兩個特點(diǎn)，一是能忠實(shí)地復(fù)制自己，以保持生物的基本特征；二是基因能夠“突變”，突變大絕大多數(shù)會導(dǎo)致疾病，另外的一小部分是非致病突變。非致病突變給自然選擇帶來了原始材料，使生物可以在自然選擇中被選擇出最適合自然的個體.所謂遺傳病，就是從父母親那里接受到已發(fā)生突變的遺傳物質(zhì)(基因)而引起相應(yīng)的疾病或缺陷。這種遺傳因素(致病基因)，按一定的方式傳給子代，子代就可能發(fā)生遺傳病?！杜R床血液學(xué)》

。應(yīng)用引物擴(kuò)增珠蛋白基因，同時合成與正常序列和突變序列完全互補(bǔ)的寡核苷酸探針。將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物點(diǎn)在尼龍膜上，分別與標(biāo)記的正常和突變的ASO探針雜交，不完全互補(bǔ)的探針，在一定條件下可以完全洗脫，再從放射自顯影觀察雜交結(jié)果。如果兩個等位B珠蛋白基因正常，僅與正常探針雜交，反之，均帶有突變時，則僅與突變探針雜交。這種檢測方法快速、靈敏寡核苷酸探針雜交反向點(diǎn)雜交將一系列針對中國人18種β-地中海貧血(β-地貧)基因突變的ASO探銈固定在尼龍膜條上。用此膜條與用5′端生物素化引物擴(kuò)增獲得的β-珠蛋白基因片段雜交。再用酶標(biāo)抗生物素蛋白及底物系統(tǒng)檢出。用本法檢測已知的18種中國人β-地貧突變樣品,可準(zhǔn)確識別這些突變的雜合子.純合子和雙重雜合子或正常DNA。。每種酶有其特定的核苷酸序列識別特異性，酶的活性需Mg2來激活。不同的酶也有許多差別：有些酶除需Mg2外，還需ATP等其他輔助因子的激活；切割位點(diǎn)和識別序列間的距離不同；有的內(nèi)切酶同時具有甲基化作用。根據(jù)這些差別，可將限制性內(nèi)切酶分為I、II和III種類型。II型限制性內(nèi)切酶只需要二價鎂離子的激活，酶在其識別序列內(nèi)切割雙鏈DNA，產(chǎn)生的各種DNA片段具有相同的末端結(jié)構(gòu)，而且大多數(shù)的II型酶可提供粘性未端，有利于片段再連接，大部分II型酶所識別的序列具有反向?qū)ΨQ的結(jié)構(gòu)。目前先進(jìn)的診斷方法①血常規(guī)檢查②高效液相色譜技術(shù)(HPLC)③基因診斷④探針斑點(diǎn)雜交技術(shù)（ASO）⑤反向點(diǎn)雜交方法（ＲＤＢ）⑥等位基因特異性擴(kuò)增技術(shù)ＰＣＲ⑦DNA芯片技術(shù)⑧DNA序列測定法⑨熒光聚合酶鏈反應(yīng)（出自《貧血》）地中海貧血基因攜帶者或輕型地中海貧血患者平常是沒有明顯癥狀的，但是如果夫婦雙方都帶有地中海貧血基因，即兩人都是輕型地中海貧血，他們的子女就會有25%是重型地中海貧