Y-干擾素釋放試驗的臨床應用Y-干擾素釋放試驗的臨床應用Y干擾素釋放試驗(interferon．1releaseassays），IGRA是檢測結核分枝桿菌(MTB)特異性抗原刺激T細胞產生的Y干擾素，以判斷是否存在MTB的感染。IGRAs可彌補PPD試驗的不足，目前多個國家已將其用于診斷MTB潛伏感染(1atenttuberculosisinfection，LTBI)，我國部分醫院也已常規開展此項檢測Y干擾素釋放試驗(interferon．1releas受到MTB抗原刺激致敏的T細胞再次遇到同類抗原時可產γ干擾素IGRAs通過檢測全血或分離自全血的單核細胞在MTB特異性抗原刺激下產生的γ干擾素，判斷受試者是否感染MTB受到MTB抗原刺激致敏的T細胞再次遇到同類抗原時可產γ干擾素目前國際上較成熟的IGRAs有2種：(1)全血法：采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測全血中致敏T細胞再次受到MTB特異性抗原刺激后釋放的1．干擾素水平，稱之為全血檢測或結核感染T細胞免疫檢測；(2)細胞法：采用酶聯免疫斑點技(ellzymelinkedimmunospotassay，ELISPOT)測定在MTB特異性抗原刺激下，外周血單個核細胞中能夠釋放1一干擾素的效應T細數量，稱之為細胞檢測或結核感染T細胞檢測。上述2種檢測方法的原理類似，檢測技術和操作程序略有不同，均采用MTB的RDl區基因編碼抗原多肽作為特異性抗原，主要相對分子質量為6000的早期分泌抗原靶(ESAT-6)和相對分子質量為10000的培養濾液蛋白(CFP一10)抗原或抗原多肽目前國際上較成熟的IGRAs有2種：T-SPOT試驗γ干擾素檢測陰性γ干擾素檢測陽性TB抗原多肽T細胞活化T細胞γ干擾素30T-SPOT試驗γ干擾素γ干擾素TB抗原多肽T細胞活化T細胞IGRAs的結核特異免疫抗原SAT-6和CFP一10主要存在于MTB復合群，而在卡介苗和大多數NTM中缺失，因此IGRAs的特異度較好。但ESAT-6和CFP—10也存在于少數幾種NTM中，如堪薩斯分枝桿菌、海分枝桿菌、蘇爾加分枝桿菌、轉黃分枝桿菌和胃分枝桿，故IGRAs陽性不能排除上述幾種NTM感染的可能。IGRAs的結核特異免疫抗原SAT-6和CFP一10主要存在PPD試驗與IGRAs的對比PPD試驗作為診斷MTB感染的傳統方法，具有操作簡便、成本低廉的特點，至今仍廣泛使用，但該方法使用的PPD抗原成分復雜，易受卡介苗接種和非結核分枝桿菌(nontuberculosismyeobacterium，NTM)的影響，特異度較低，且對人免疫缺陷病毒(HIV)感染及重癥疾病患者等免疫功能受損人群的敏感度不足。薈萃分析結果顯示，在HIV感染人群中，IGRAs的敏感度并未高于PPD試驗，但IGRAs(尤其是細胞檢測)受CD4+T細胞數量的影響小于PPD試驗，這可能因為IGRAs檢測過程已對單個核細胞數量進行了標準化，即在檢測程序上消除了淋巴細胞數量減少對檢測結果的影響PPD試驗與IGRAs的對比PPD試驗作為診斷MTB感染的傳PPD陽性對以下情況無法區分卡介苗預防接種√非結核分枝桿菌感染√LIBI√活躍結核病√結核病治愈、自愈后√PPD陽性對以下情況無法區分卡介苗預防接種√IGRAs陽性卡介苗預防接種ⅹ大多數非結核分枝桿菌感染ⅹLIBI√活躍結核病√結核病治愈、自愈后√IGRAs陽性卡介苗預防接種ⅹ2010年全國結核病流行病抽樣調查結核分枝桿菌復合群77.1%，非結核分枝桿菌22.9%2010年廣州結核病流行病抽樣調查：非結核分枝桿菌19.3%，且其中前5位IGRAs為陰性的2010年全國結核病流行病抽樣調查IGRAs的敏感性和特異性美國FDA認證臨床實驗數據：經培養確診的結核病患者樣本183例敏感性95.6%（175∕183）306例入伍新兵特異性97.1%（297∕306）IGRAs的敏感性和特異性美國FDA認證臨床實驗數據：對活動性結核病的輔助診斷：PPD試驗和IGRAs均無法區分LTBI和活動性結核病患者。國內IGRAs的研究數據顯示其敏感度和特異度差別較大，敏感度為53％一98％，特異度為60％～90％(或以上)，但多數文獻報道的敏感度和特異度>70％，提示IGRAs的特異度優于PPD試驗。對活動性結核病的輔助診斷：PPD試驗和IGRAs均無法區分LIGRA用于診斷肺結核：深圳第三人民醫院的結果例數（n）ELISPOT(+)n(%)結核患者24461846（75.47）急性播散型肺結核5851（87.93）繼發性肺結核18381389（75.97）結核性胸膜炎538428（79.55）

結核性腦膜炎5940（67.80）其他肺外結核356275（77.25）陳舊性肺結核5624（42.86）健康對照42265（14.20）新發肺結核密切接觸者384136（35.4）IGRA用于診斷肺結核：深圳第三人民醫院的結果例數ELISPIGRAs檢測活動性結核病的敏感度高于TSTIGRAs敏感性還未高到陰性可以排除結核病的程度存在假陰性，陰性并不能排除結核病IGRAs檢測活動性結核病的敏感度高于TSTIGRAs敏感性IGRAs檢測結核疑似病例的特異性不高IGRAs不能區分活動性肺結核和潛伏期結核感染（陽性不一定是活動性肺結核）存在假陰性，陰性并不能排除結核病IGRAs檢測結核疑似病例的特異性不高IGRAs不能區分活動IGRAs陽性時不能肯定診斷，陰性時不能排除診斷WHO不推薦中、低收入國家在診斷活躍結核感染時使用IGRAsIGRAs陽性時不能肯定診斷，陰性時不能排除診斷WHO不推薦

中國的國情適用IGRAs嗎？中國結核病發病率高WHO不推薦中、低收入國家在診斷活躍結核感染時使用IGRAs

中國的國情適用IGRAs嗎？中國結核病發病率高WHO不推薦Y-干擾素釋放試驗在中國應用的建議我國一方面是結核病高負擔國家，但又與低收入國家在結核病控制經費投入、結核病流行特點、卡介苗接種以及NTM感染等方面存在顯著不同Y-干擾素釋放試驗在中國應用的建議我國一方面是結核病高負擔國IGRAs可以有考慮到我國肺結核患者中菌陰肺結核所占比例較高，在診斷這類患者缺乏細菌學依據時，IGRAs可發揮其輔助作用應用于活動性結核病的輔助診斷應用于LTBI診斷中IGRAs可以有考慮到我國肺結核患者中菌陰肺結核所占比例較高IGRAs用于體液或組織標本？近幾年來國內有IGRAs(僅限于ELISPOT方法)輔助診斷結核性胸膜炎和結核性腹膜炎等肺外結核的報道，其中采用胸腔積液和腹水等體液或組織標本檢測的IGRAs的敏感度和特異度高達90％以上，采用血液標本檢測時IGRAs則并未顯示出優勢。此類研究報道數量不多，病例數也不足，且國家食品藥品監督管理總局批準的IGRAs僅限于血液樣本的檢測，即IGRAs對體液或組織標本的研究尚未經過充分驗證，不能得出可靠的結論。IGRAs用于體液或組織標本？近幾年來國內有IGRAsIGRAs對兒童結核病的輔助診斷兒童結核病的臨床癥狀不典型，重癥及肺外結核病比例較高，且結核病患兒的細菌載量低，咳嗽反射和氣管纖毛運動能力差，病原學檢查陽性率很低，PPD試驗和IGRAs聯合診斷有一定的輔助作用。IGRAs對兒童結核病的輔助診斷兒童結核病的臨床癥狀不典型，IGRAs在LTBI診斷中的應用1．活動性肺結核患者密切接觸者和醫務工作者中LTBI的診斷2．IGRAs在HIV感染等免疫抑制或缺陷患者LTBI診斷中的應用IGRAs在LTBI診斷中的應用1．活動性肺結核患者密切接觸活動性肺結核患者密切接觸者和醫務工作者中LTBI的診斷1.PPD試驗和IGRAs均可用于LTBI的診斷和追蹤，若考慮到PPD試驗檢測結果可能受卡介苗接種或NTM影響時，可對PPD試驗陽性者進一步采用IGRAs幫助確認；(2)不宜采用IGRAs對大范圍人群進行LTBI篩查；(3)PPD試驗仍是在健康人群中動態篩查LTBI的首選。活動性肺結核患者密切接觸者和醫務工作者中LTBI的診斷1(1)對HIV感染人群進行LTBI篩查，單用PPD試驗的敏感度不高，應單用IGRAs或聯合使用PPD試驗，在方法選擇上優先考慮細胞檢測技術。(2)自身免疫性疾病和器官移植患者在接受糖皮質激素或TNF-拮抗劑治療前，應單用IGRAs或聯合使用PPD試驗篩查LTBI。(1)對HIV感染人群進行LTBI篩查，單用PPD試驗的敏感除HIV感染者外，類風濕關節炎等自身免疫性疾病、器官移植等免疫功能受損患者及糖尿病等特殊患者，因其自身原因，或接受糖皮質激素或腫瘤壞死因子TNF拮抗劑等免疫抑制藥物治療導致免疫功能缺陷，這類患者是LTBI發展為結核病的高風險人群，對這類患者也有必要進行LTBI篩查。除HIV感染者外，類風濕關節炎等自身免疫性疾病、器官移植等免應行IGRAs和PPD檢測的6種情況（WHO2015）HIV陽性者肺結核病人的接觸者擬進行抗TNF治療的患者擬透析的患者擬行器官及造血細胞移植者矽肺患者應行IGRAs和PPD檢測的6種情況（WHO2015）HI結語(1)IGRAs可用于診斷MTB感染，但不能區分活動性結核病和LTBI，也不能準確預測LTBI發展為活動性結核病的風險(2)IGRAs對疑似結核病患者具有輔助診斷作用，IGRAs陰性結果對排除MTB感染有一定幫助(3)IGRAs用于篩查LTBI時不受卡介苗接種的影響，較少受到NTM感染的影響，但IGRAs不適用于流行病學篩查(4)IGRAs在HIV感染人群中篩查LTBI的敏感度優于PPD試驗，但在其他人群中的檢測效率尚需進一步研究。結語(1)IGRAs可用于診斷MTB感染，但不能區分活動性結ThankyouThankyouY-干擾素釋放試驗的臨床應用Y-干擾素釋放試驗的臨床應用Y干擾素釋放試驗(interferon．1releaseassays），IGRA是檢測結核分枝桿菌(MTB)特異性抗原刺激T細胞產生的Y干擾素，以判斷是否存在MTB的感染。IGRAs可彌補PPD試驗的不足，目前多個國家已將其用于診斷MTB潛伏感染(1atenttuberculosisinfection，LTBI)，我國部分醫院也已常規開展此項檢測Y干擾素釋放試驗(interferon．1releas受到MTB抗原刺激致敏的T細胞再次遇到同類抗原時可產γ干擾素IGRAs通過檢測全血或分離自全血的單核細胞在MTB特異性抗原刺激下產生的γ干擾素，判斷受試者是否感染MTB受到MTB抗原刺激致敏的T細胞再次遇到同類抗原時可產γ干擾素目前國際上較成熟的IGRAs有2種：(1)全血法：采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測全血中致敏T細胞再次受到MTB特異性抗原刺激后釋放的1．干擾素水平，稱之為全血檢測或結核感染T細胞免疫檢測；(2)細胞法：采用酶聯免疫斑點技(ellzymelinkedimmunospotassay，ELISPOT)測定在MTB特異性抗原刺激下，外周血單個核細胞中能夠釋放1一干擾素的效應T細數量，稱之為細胞檢測或結核感染T細胞檢測。上述2種檢測方法的原理類似，檢測技術和操作程序略有不同，均采用MTB的RDl區基因編碼抗原多肽作為特異性抗原，主要相對分子質量為6000的早期分泌抗原靶(ESAT-6)和相對分子質量為10000的培養濾液蛋白(CFP一10)抗原或抗原多肽目前國際上較成熟的IGRAs有2種：T-SPOT試驗γ干擾素檢測陰性γ干擾素檢測陽性TB抗原多肽T細胞活化T細胞γ干擾素30T-SPOT試驗γ干擾素γ干擾素TB抗原多肽T細胞活化T細胞IGRAs的結核特異免疫抗原SAT-6和CFP一10主要存在于MTB復合群，而在卡介苗和大多數NTM中缺失，因此IGRAs的特異度較好。但ESAT-6和CFP—10也存在于少數幾種NTM中，如堪薩斯分枝桿菌、海分枝桿菌、蘇爾加分枝桿菌、轉黃分枝桿菌和胃分枝桿，故IGRAs陽性不能排除上述幾種NTM感染的可能。IGRAs的結核特異免疫抗原SAT-6和CFP一10主要存在PPD試驗與IGRAs的對比PPD試驗作為診斷MTB感染的傳統方法，具有操作簡便、成本低廉的特點，至今仍廣泛使用，但該方法使用的PPD抗原成分復雜，易受卡介苗接種和非結核分枝桿菌(nontuberculosismyeobacterium，NTM)的影響，特異度較低，且對人免疫缺陷病毒(HIV)感染及重癥疾病患者等免疫功能受損人群的敏感度不足。薈萃分析結果顯示，在HIV感染人群中，IGRAs的敏感度并未高于PPD試驗，但IGRAs(尤其是細胞檢測)受CD4+T細胞數量的影響小于PPD試驗，這可能因為IGRAs檢測過程已對單個核細胞數量進行了標準化，即在檢測程序上消除了淋巴細胞數量減少對檢測結果的影響PPD試驗與IGRAs的對比PPD試驗作為診斷MTB感染的傳PPD陽性對以下情況無法區分卡介苗預防接種√非結核分枝桿菌感染√LIBI√活躍結核病√結核病治愈、自愈后√PPD陽性對以下情況無法區分卡介苗預防接種√IGRAs陽性卡介苗預防接種ⅹ大多數非結核分枝桿菌感染ⅹLIBI√活躍結核病√結核病治愈、自愈后√IGRAs陽性卡介苗預防接種ⅹ2010年全國結核病流行病抽樣調查結核分枝桿菌復合群77.1%，非結核分枝桿菌22.9%2010年廣州結核病流行病抽樣調查：非結核分枝桿菌19.3%，且其中前5位IGRAs為陰性的2010年全國結核病流行病抽樣調查IGRAs的敏感性和特異性美國FDA認證臨床實驗數據：經培養確診的結核病患者樣本183例敏感性95.6%（175∕183）306例入伍新兵特異性97.1%（297∕306）IGRAs的敏感性和特異性美國FDA認證臨床實驗數據：對活動性結核病的輔助診斷：PPD試驗和IGRAs均無法區分LTBI和活動性結核病患者。國內IGRAs的研究數據顯示其敏感度和特異度差別較大，敏感度為53％一98％，特異度為60％～90％(或以上)，但多數文獻報道的敏感度和特異度>70％，提示IGRAs的特異度優于PPD試驗。對活動性結核病的輔助診斷：PPD試驗和IGRAs均無法區分LIGRA用于診斷肺結核：深圳第三人民醫院的結果例數（n）ELISPOT(+)n(%)結核患者24461846（75.47）急性播散型肺結核5851（87.93）繼發性肺結核18381389（75.97）結核性胸膜炎538428（79.55）

結核性腦膜炎5940（67.80）其他肺外結核356275（77.25）陳舊性肺結核5624（42.86）健康對照42265（14.20）新發肺結核密切接觸者384136（35.4）IGRA用于診斷肺結核：深圳第三人民醫院的結果例數ELISPIGRAs檢測活動性結核病的敏感度高于TSTIGRAs敏感性還未高到陰性可以排除結核病的程度存在假陰性，陰性并不能排除結核病IGRAs檢測活動性結核病的敏感度高于TSTIGRAs敏感性IGRAs檢測結核疑似病例的特異性不高IGRAs不能區分活動性肺結核和潛伏期結核感染（陽性不一定是活動性肺結核）存在假陰性，陰性并不能排除結核病IGRAs檢測結核疑似病例的特異性不高IGRAs不能區分活動IGRAs陽性時不能肯定診斷，陰性時不能排除診斷WHO不推薦中、低收入國家在診斷活躍結核感染時使用IGRAsIGRAs陽性時不能肯定診斷，陰性時不能排除診斷WHO不推薦

中國的國情適用IGRAs嗎？中國結核病發病率高WHO不推薦中、低收入國家在診斷活躍結核感染時使用IGRAs

中國的國情適用IGRAs嗎？中國結核病發病率高WHO不推薦Y-干擾素釋放試驗在中國應用的建議我國一方面是結核病高負擔國家，但又與低收入國家在結核病控制經費投入、結核病流行特點、卡介苗接種以及NTM感染等方面存在顯著不同Y-干擾素釋放試驗在中國應用的建議我國一方面是結核病高負擔國IGRAs可以有考慮到我國肺結核患者中菌陰肺結核所占比例較高，在診斷這類患者缺乏細菌學依據時，IGRAs可發揮其輔助作用應用于活動性結核病的輔助診斷應用于LTBI診斷中IGRAs可以有考慮到我國肺結核患者中菌陰肺結核所占比例較高IGRAs用于體液或組織標本？近幾年來國內有IGRAs(僅限于ELISPOT方法)輔助診斷結核性胸膜炎和結核性腹膜炎等肺外結核的報道，其中采用胸腔積液和腹水等體液或組織標本檢測的IGRAs的敏感度和特異度高達90％以上，采用血液標本檢測時IGRAs則并未顯示出優勢。此類研究報道數量不多，病例數也不足，且國家食品藥品監督管理總局批準的IGRAs僅限于血液樣本的檢測，即IGRAs對體液或組織標本的研究尚未經過充分驗證，不能得出可靠的結論。IGRAs用于體液或組織標本？近幾年來國內有IGRAsIGRAs對兒童結核病的輔助診斷兒童結核病的臨床癥狀不典型，重癥及肺外結核病比例較高，且結核病患兒的細菌載量低，咳嗽反射和氣管纖毛運動能力差，病原學檢查陽性率很低，PPD試驗和IGRAs聯合診斷有一定的輔助作用。IGRAs對兒童結核病的輔助診斷兒童結核病的臨床癥狀不典型，IGRAs在LTBI診斷中的應用1．活動性肺結核患者密切接觸者和醫務工作者中LTBI的診斷2．IGRAs在HIV感染等免疫抑制或缺陷患者LTBI診斷中的應用IGRAs在LTBI診斷中的應用1．活動性肺結核患者密切接觸活動性肺結核患者密切接觸者和醫務工作者中LTBI的診斷1.PPD試驗和IGRAs均可用于LTBI的診斷和追蹤，若考慮到PPD試驗檢測結果可