1、睪酮檢測標準操作流程睪酮檢測標準操作流程睪酮檢測標準操作流程睪酮檢測標準操作流程編制僅供參考審核批準生效日期地址： 電話：傳真: 郵編:概述雄性激素睪酮（17-羥雄烯二酮）的分子量為288道爾頓。男性體內的睪酮幾乎全由睪丸間質細胞合成。分泌受黃體生成素（LH）的調節，并負反饋影響垂體-下丘腦的調節機制。睪酮促進男性第二性征的形成，維持前列腺和精囊的功能。血循環中的睪酮絕大部份與載體蛋白質結合（如性激素結合球蛋白（SHBG）。女性的卵巢可產生少量睪酮。生理水平濃度的雄激素對婦女沒有特殊的作用。女性雄激素水平的升高可導致男性化（取決于雄激素水平的增加程度）。檢測女性體內睪酮含量有助于診斷雄激素綜合

2、征（AGS）、多囊性卵巢（Stein-Leventhal綜合癥）以及懷疑卵巢腫瘤、腎上腺腫瘤、腎上腺發育不良或卵巢功能障礙時。檢測男性體內睪酮含量可用于診斷睪酮產生不足的疾病，如性腺發育不足、雌激素治療、染色體異常（如Klinefelter綜合征）和肝硬化。1 目的規范睪酮檢測測試，確保檢測結果準確性和重復性。2 檢測方法和原理檢測方法：競爭法檢測原理：ADVIA Centaur睪酮檢測是一種競爭性的免疫測定方法，使用直接化學發光技術。病人樣品中的睪酮與標記試劑中經過吖啶酯標記的睪酮共同竟爭有限量的與單克隆小鼠抗兔抗體結合的多克隆兔抗睪酮抗體，前者在固相試劑中結合到順磁性顆粒上。檢測過程中，使

3、用睪酮釋放劑將樣品中的結合睪酮從結合的蛋白質上釋放出來。3 標本采集與保護新鮮無溶血血清遵守以下推薦的血清標本處理，運行和儲存步驟用真空采樣管采集血液標本時須遵守常規注意事項離心前使標本完全自然形成凝塊全程保證樣品管的密閉狀態盡快分離血清，并及時測定如果標本不能在24小時內檢測或運送標本時，將標本保存在4冷藏標本室溫放置20分鐘后再測定；冷凍標本室溫解溶后放置20分鐘后再測定不符合標本處理溶血和乳糜血標本在報告單的備注欄注明標本量過少的標本，嚴重溶血和乳糜血標本與臨床溝通并將標本退回，填寫不合格標本拒接登記。4 試劑和設備試劑SIEMENS原裝配套試劑試劑組成標記試劑：盒，用吖啶酯標記的睪酮（

4、mL)， 置于含防腐劑的緩沖鹽水中。固相試劑：盒，在磷酸鹽緩沖液中結合到單兌降小鼠抗兔抗體(g/mL)的多克隆兔抗睪酮抗體（g/mL)，前者通過共價鍵結合到順磁性顆粒上，含疊氮化鈉（%)和防腐劑。探針沖洗液：盒，含疊氮化鈉（%)和防腐劑的緩沖鹽溶液。釋放劑：盒，類固醇釋放劑(g/mL),其置于含疊氮化鈉%)和防腐劑的緩沖液中。試劑準備：手工混合所有試劑包。肉眼檢查試劑底部以確保所有顆粒分散均勻并處懸浮狀態，然后將混合物載入系統直接使用 試劑保存試劑28避光保存，并保持豎直向上質控品SIEMENS原裝配套質控品校準品SIEMENS原裝配套標準品。4. 4警告和注意事項只可用于體外診斷；試劑中含有

5、疊氮鈉，請小心處理，請勿吞服或與皮膚粘膜接觸！疊氮鈉在與銅或鉛等重金屬接觸后會產生有毒的疊氮化物；試劑盒的測定結果僅作為臨床各種疾病的輔助診斷依據儀器ADVIA Centaur CP 全自動化學發光免疫分析儀5 操作程序檢測過程流程簽收樣品離心上機檢測審核報告簽發報告標本保存樣本簽收嚴格按標本接收程序簽收標本標本處理以3000r/min，離心610min，分離血清上機測定，若標本不能及時檢測，將分離血清冷藏于28的冰箱內標本檢測手工編排測試項目：在主界面選中樣本區域 選擇樣本架 選擇樣本 點擊Samples區域中的樣本類型選擇按鈕切換至樣本類型選擇樣本ID編排區沒有通過掃描樣本管條形碼輸入ID

6、號的樣本，在此處手工輸入樣本ID 然后在Assay Selection 區域選擇測試項目樣本運行 確認樣本裝載，必要的樣本信息輸入完畢確認所有耗品及試劑已裝載 按START鍵 開始運行樣本。檢驗后標本保存保存在標本冰箱內，保存期為7d6 校準程序校準品的準備和儲存將校準品從冰箱中取出，加5ml蒸餾水復融，輕輕旋轉搖勻，室溫放置30min，待充分混勻后分裝。-20冰凍保存可保存20d，復融后28可穩定24h。校準條件在室內質控失控，或使用新批號試劑，或更換儀器主要配件，或進行大保養后均需校準。無特殊情況校準周期為28d校準程序參見生化組的校準操作程序7 質量控制程序控制品的準備和儲存每瓶準確加入

7、蒸餾水復融，輕輕旋轉搖勻，室溫放置30min待充分溶解后分裝，保存于-30冰箱，啟用前取出，室溫放置30min待充分融化后使用，28可穩定24h。控制品水平和分析批長度每24h至少進行1批。質控操作程序參見生化組的質量控制操作程序。8 性能參數不準確度 % 不精密度 CV%線性范圍 10-1500ng/dl9 生物參考區間14-76ng/dl10異常結果的處理結果與診斷不符或兩次結果差異較大時，應及時與臨床溝通。11 臨床意義雄激素睪酮的分子量為288D。在男性睪酮幾乎全由睪丸的間質細胞合成，并由LH調節其分泌，受垂體-下丘腦負反饋機制的影響。睪酮促進男性第二性征的發育，維持前列腺和精囊的功能

8、。血循環中的睪酮絕大多數與載體蛋白質結合（SHBG=性激素結合球蛋白）。女性的卵巢可產生少量睪酮。生理水平的雄激素對婦女沒有特殊的作用。雄激素含量升高可引起女子男性化。檢測女性體內睪酮含量有助于診斷雄激素綜合征（AGS）、多囊性卵巢。當懷疑卵巢腫瘤、腎上腺腫瘤、腎上腺發育不良或卵巢功能不足時，也可檢測睪酮。檢測男性體內睪酮含量可用于診斷睪酮產生不足的疾病，如性腺發育不足、雌激素治療、染色體異常（如Klinefelter綜合征）和肝硬化。12 干擾因素檢測結果不受黃疸（膽紅素513mol/L或30 mg/dL）， 溶血（血紅蛋白 mmol/L或 g/dL），脂血(脂肪乳劑1000mg/dL)和生

9、物素60 ng/mL或123 nmol/L的影響13 安全防護措施血液標本運輸必須保證運輸過程的生物安全，防止溢出。血液標本溢出后，應立即對污染環境和設備進行消毒處理；對標明有污染性疾病的血液標本應特別的防護，以不污染環境和保證工作安全為前提；在進行血液分析的一切操作過程中應按照檢驗科生物安全管理程序進行；與血液標本接觸的一切器皿。儀器組裝/拆卸組合零件都應視為污染源，因此操作人員不小心接觸到了這種污染源時，應立即用清水清洗被污染區域并進行消毒；如果操作人員皮膚或衣服上污染（沾到）了血液或廢液應立即沖洗并進行消毒處理。如果眼睛被濺入了血液或廢液應立即用大量清水沖洗并進行必要的醫療措施。血液標本離心的過程中所有標本都應該加蓋，離心后，開啟試管時應注意防止氣溶（霧）膠污染環境；所有檢測過的血液標本及有關廢物，都會給您帶來潛在的危險及生物污染。所有廢棄樣本及廢物的處理方法同血液標本的處理程序。14 參考文獻SIEMENS