1、子宮內膜癌血管內皮生長因子及微血管密度表達的分析【摘要】目的討論子宮內膜癌血管內皮生長因子(vegf)的表達、微血管生成及其與臨床病理參數的關系。方法采用s-p免疫組化染色法檢測50例子宮內膜癌及10例正常子宮內膜中vegf的表達及計數微血管密度(vd)。結果子宮內膜癌中vegf表達陽性率(92%)、vd(46.04.5)顯著高于正常子宮內膜的表達率(30%、vd14.01.7,p0.01。43例子宮內膜癌浸潤深度1/2肌層,其vegf表達率為90.7%,7例肌層浸潤深度1/2,vegf全部陽性表達，經統計學處理差異無統計學意義，腫瘤浸潤深度1/2肌層組vd69.916.8顯著高于浸潤深度1/

2、2肌層組42.84.4，差異有統計學意義p0.05。vegf表達率、vd與其他臨床病理因素不相關。結論vegf、vd在子宮內膜癌中高表達，說明vegf、vd與子宮內膜癌的發生有關。vd可作為子宮膜癌判斷預后的參考指標。【關鍵詞】血管內皮生長因子;子宮腫瘤;血管生成素血管生成對腫瘤增殖和進展非常重要。在很多種人類腫瘤中，檢測間質的血管生成都是重要的預后因素。但在子宮內膜癌中，關于血管生成的研究報道很少。血管生成因素在子宮內膜癌中的重要性目前尚未完全明了，血管內皮生長因子vegf作為一種多功能的細胞因子，是腫瘤血管生成的重要調節因子1。vegf、微血管密度vd在多種腫瘤中的表達研究曾有很多報道，但

3、國內尚無關于子宮內膜癌vegf、vd的研究報道。筆者應用免疫組化方法，觀察50例子宮內膜腺癌和10例正常子宮內膜中vd及vegf的表達，并研究其與臨床、病理因素的相關性。1資料與方法1.1一般資料選取我院19972001年間手術切除的子宮內膜癌標本50例，年齡3070歲，平均54.53.5歲，全部經病理證實為子宮內膜癌。按fig臨床分期標準及子宮內膜癌的病理分級標準，其中期43例，期7例；級26例，級24例。腫瘤浸潤深度1/2肌層43例，腫瘤浸潤深度1/2肌層7例。選取10例正常子宮內膜標本。1.2試劑與方法兔抗人vegf多克隆抗體rab-0243、兔抗人因子相關抗原r：ag多克隆抗體rab-

4、0070、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化酶免疫組化超敏試劑盒s-p均購自福州邁新公司。標本經中性福爾馬林固定，梯度酒精脫水，石蠟包埋，切片厚4，脫蠟，水化后，s-p法免疫組化操作按試劑盒說明書染色步驟進展，后經蘇木素復染、封片、觀察。1.3結果斷定染色陽性者呈棕色顆粒。vegf表達陽性物質位于胞漿內，vegf陽性表達于腫瘤細胞及血管內皮細胞。結果斷定按照vl2報道的判斷標準進展，根據以下兩方面的總分進展判斷。1選染色均勻的陽性表達腫瘤區域，以著色細胞占視野細胞總數的多少分級。0：無陽性細胞；1：陽性細胞數25%；2：陽性細胞數26%50%；3：陽性細胞數50%。2按著色細胞染色強弱分：0：陰性；1

5、：弱，淡黃色；2：中等，棕黃色；3：強，棕褐色。按1、2的數值相加判斷結果，02為陰性-；34為弱陽性+；56為強陽性+。vd計數參照aeda等3和veidner等4報道的方法，由兩個對患者情況不理解的醫生背對背分別計數，取其平均值。先在低倍鏡100下全面觀察切片以確定腫瘤內血管密度最高處，再在高倍鏡200下計數3個視野最高數目的微血管，取其平均數。凡呈現棕色單個內皮細胞或內皮細胞群者均作為一個血管計數，但肌層較厚及管腔直徑8個紅細胞直徑的血管不計數。1.4統計學方法采用2檢驗和t檢驗進展統計學分析。2結果2.1子宮內膜癌vegf表達及其與臨床病理分級的關系50例子宮內膜癌中“+16例，“+3

6、0例，“-4例，10例正常子宮內膜中“+3例，“-7例。50例子宮內膜癌組織vegf表達陽性率為92%，明顯高于正常子宮內膜中vegf的陽性率30%，差異有統計學意義2=17.5，p0.01。vegf的表達與子宮內膜癌的臨床分期及病理分級無關p0.05。腫瘤浸潤深度1/2肌層組vegf陽性率高于腫瘤浸潤深度1/2組，但差異無統計學意義p0.05。2.2子宮內膜癌微血管定量及其與臨床病理分級的關系子宮內膜癌和正常子宮內膜組織的微血管經因子相關抗原染色均呈陽性表現，癌組織中vd明顯高于正常子宮內膜t=2.0，p0.05。子宮內膜癌組織中vd與臨床分期、病理分級無關t值分別為1.21、0.63；均p

7、0.05。vd計數在腫瘤浸潤深度1/2肌層組高于腫瘤浸潤深度1/2組，差異有統計學意義t=2.03，p0.05。vegf表達和vd與病理分級、臨床分期、肌層浸潤的關系見表1。表1vegf表達、vd與子宮內膜癌分期分級和肌層浸潤的關系略3討論血管內皮生長因子是一種由兩個亞基以二硫鍵相連而成的二聚體糖蛋白，相對分子量3442103。其主要作用于血管內皮細胞，促進內皮細胞增殖、遷移，誘導新生血管的生成，并可顯著水解基底膜，增加微血管的通透性5。yshihit等6在子宮內膜癌的研究中發現，腫瘤細胞不僅表達vegf，而且同樣表達受體，因此推斷vegf的分泌機制不僅存在旁分泌，同時也存在自分泌機制。腫瘤組

8、織內的新生血管是腫瘤細胞生長、侵襲和轉移的根底7。目前，vegf在卵巢癌、宮頸癌、胃腸道等癌組織中呈高表達。vegf表達和vd與多種腫瘤的生物學行為相關。本實驗50例子宮內膜癌組織中，vegf陽性46例，陽性率92%；vd46.64.5，vegf陽性率及vd在子宮內膜癌中明顯高于正常子宮內膜陽性率30%，vd14.01.7，差異具有非常顯著性p0.01。這與國外報道的vegf在子宮內膜癌及正常子宮內膜中的表達率結果相近，說明子宮內膜癌組織中存在vegf高表達及vd明顯增高。vegf生成增多使血管生成增多，從而促進癌細胞生長，在子宮內膜癌的開展中起重要作用。本實驗中肌層浸潤1/2組中vegf表達

9、比浸潤深度1/2組有增高趨勢，但無統計學意義，vd在腫瘤浸潤深度1/2肌層組中69.916.8高于肌層浸潤1/2組42.84.4，說明vegf表達及vd與子宮內膜癌肌層浸潤的程度有關，這與yshihit等6的報道一樣。由于vegf是促進腫瘤血管生成、生長、轉移的潛在因子，抑制vegf及其與受體的結合可作為治療腫瘤的打破點。盡管vegf可反映多種腫瘤的進展和侵襲性，但vegf對子宮內膜癌預后的預測作用那么較有限，vegf的表達與子宮內膜癌的生物學行為無關。有實驗已證實在子宮內膜癌中vegf受體flt-4的過度表達可作為判斷其預后的獨立因素7。子宮內膜癌據其浸潤和轉移情況進展分期。腫瘤肌層浸潤的深

10、度是指示預后的重要指標8。因此可以推斷計數子宮內膜癌vd可作為判斷其預后的一個重要因素。總之，本實驗說明vegf、vd是子宮內膜癌發生的重要因素，子宮內膜癌組織中vd明顯增高，可作為判斷子宮內膜癌預后的重要因素之一。【參考文獻】4：775-82.2vl，kagir，janer，1997，74：64-68.4veidnern，flkanj，pzzaf，etal.turangigenesis：anesignifiantandindependentprgnstiindiatrinearly-stagebreastarina.jnatl