1、液相色譜柱維護保養及儀器沖洗注意色譜柱維護保養就是很重要得,關系到色譜柱得使用壽命與檢測結果得準確性,所以任何人用過色譜柱之后 ,一定要對色譜柱進行保養,管理人員與使用者互相監督。輕拿輕放,避免損壞填料;另外沒有使用得情況下,一總得原則就是色譜柱要定要保證、對于具體得色譜柱 下面列出常用色譜柱維護保養得,具體方法與注意事項,以便使用者參考。C18柱包括預柱)對于未啟用得新得色譜柱,先用甲醇或乙腈以小流速0.2m/min緩慢升高到0.5ml/mi不接檢測器沖洗色譜柱 30 分鐘后,將色譜柱與檢測器連上,流速調為1。0 ml/min 沖洗色譜柱60 分鐘,然后不斷降低有機相得比例如 80%、5、1

2、甲醇或乙腈各沖洗至少0 ,則將色譜柱保存在高比例有機相中(如0%甲醇或乙腈,或者參考該色譜柱使用說明書中建議得溶劑中);色譜柱使用時應用與分析流動相相同比例得有機溶劑(將緩沖鹽溶液換成水)沖洗色譜柱5 分鐘,然后再換成流動相進行樣品分析。樣品分析完后,色譜柱維護與保養方法:,則要先用 10%甲醇或乙腈沖洗,1l/in 得流速沖洗至少 30min,再用 8甲醇或乙腈沖洗至少 30in,柱子保存在80甲醇或乙腈里(,再換成流動相。,如柱子長時間未用 則柱子保存在 10得甲醇或乙腈里。對于含有離子對試劑得流動相如庚烷磺酸鈉與十二烷基磺酸鈉等 ,柱子應采用梯度洗脫,一般用乙腈-水系統(水:0-0;乙腈

3、:1090)沖洗時間要稍長些,然后保存于 90乙腈。,目前所有得C18(柱均不能用純水進行長時間 1小時以上)沖洗,除非有專門耐水得專用柱,否則,用純水長時間沖洗色譜柱,會導致色譜柱得固定相流失與相塌陷,損壞色譜柱。大多數反相色譜柱得 pH 穩定范圍就是8,有得穩定范圍會寬,具體pH穩定范圍參照色譜柱說明書,當分析條件得 pH 值偏小或偏大時,可選擇 pH穩定范圍寬得柱子進行分析,否則,會損壞色譜柱。在每次進行樣品分析時,要保證流動相與色譜系統及柱內得保存液要互溶,如不能互溶,則需要用一定比例得有機溶劑不低于 10或與分析流動相相當得有機溶劑對柱子進行過渡,否則,流動相中得鹽會在系統與柱內析出

4、,影響樣品分析或損壞柱子。硅膠柱、正相手性色譜柱【包括 AS-HAH系列,DMB5TBB系列,O系列如 O3100、OA330】對于未啟用得新得色譜柱,在保證系統就是正相得情況下,可先用異丙醇小流速流速為 0103ml/mn)沖洗色譜柱約 15分鐘,然后換上正相流動相平衡進行色譜分析。硅膠柱及正相手性柱不能過水相對于sepax系列得硅膠柱,可以過低比例得水相有機相不低于接上色譜柱之前要保證液相色譜系統中得所有管路為如水/乙腈;水/甲醇),先用異丙醇沖洗所有管路,然后用正相流動相沖洗所有管路 ,最后再接上色譜柱;若反相流動相中含有緩沖鹽如緩沖鹽乙腈;緩沖鹽甲醇),先用純水沖洗HPL系統,然后用異

5、丙醇沖洗所有管路,最后用正相流動相沖洗,先用異丙醇沖洗色譜系統與色譜柱,再用色譜級得正己烷沖洗色譜柱,(或者直接用正己烷-異丙醇(90:10)沖洗,并保存在正己烷異丙醇(90:0)中。如長時間未用,則保存在正己烷中。需要特別強調得就是,沖洗硅膠柱時,不能用純水或含水得有機溶劑或緩沖鹽體系沖洗色譜柱,只能用純有機溶劑沖洗色譜柱對于sepax系列得硅膠柱可以用不低于 50%有機相沖洗色譜柱),最后保存在純得有機溶劑中、在進行樣品分析前,一定要保證流動相與色譜系統及色譜柱柱內得保存液要互溶,如不互溶,則需要用異丙醇過度,否則,會影響色譜系統與損壞柱子。反相手性色譜柱如CEL O):同 C 柱1陰離子

6、柱與陽離子柱:目前常見得陰子柱有waters PTM anon,陽離子柱有磺酸基陽離子柱與 rs陽離子交換柱鈣型。對于water IC-PakTM anio 與waters鈣型),新柱子使用前用高純水小流速(0、mi緩慢升高到.5mmi沖洗約 30 分鐘,然后再換成流動相平衡色譜柱。在沖洗色譜柱之前,要保證整個色譜系統為純水相。對于磺酸基陽離子柱(含有硅膠基柱得),使用前用甲醇或乙腈小流速沖洗0分鐘,然后高純水替換系統沖洗,然后接上色譜柱。分析完樣品后,對于 waers ICPaTM anion 與 waters 陽離子交換柱(鈣型)用高純水沖洗色譜柱,色譜柱最后保存在純化水中。對于磺酸基陽離

7、子柱,用0%得乙腈或甲醇沖洗色譜柱 3分鐘,最后保存在甲醇或乙腈中(參照柱子說明書。沖洗所用流速根據柱子耐壓情況進行調整、需要特別強調得就是wats IC-PTM ao與waters陽離子交換柱鈣型就是不能過有機相純有機溶劑或有機溶液),否則會損壞色譜柱。氨基柱、氰基柱、苯基柱及 C8柱目前所使用得氨基柱、氰基柱、苯基柱及 C8 柱基本都就是使用反相系統,其操作方法與維護保養與 C1相同。對于新碰到得別得型號得色譜柱,如本規程沒有說明時,要參照色譜柱說明書具體問題具體分析。液相儀器得沖洗1、沖洗色譜系統具體情況具體分析,可針對緩沖鹽濃度較高得流動相)一般做完試驗沖洗完色譜柱后,換上兩通,將各通

8、道放于 10%乙腈中沖洗至少30 分鐘若原色譜系統中流動相含鹽,則用高純水 有時候用溫水效果更好沖洗至少30分鐘后再用10%,則將儀器保存于乙腈中。、清洗進樣針、柱塞桿洗針液應選擇能較好溶解樣品得溶劑(如該樣品在 7甲醇中溶解,則洗針液應選擇 甲醇或更高比例得甲醇);清洗柱塞桿得溶劑(為了清洗流動相中析出得鹽),一般選擇低比例得有機相,如 1甲醇或乙腈、3、儀器得鈍化包括進樣器與檢測池若被污染,系統應做清洗與鈍化處理。一般采用 30%磷酸水溶液作為清洗劑,用 6mol/L 硝酸作為鈍化劑,先清洗再鋼管路得內表面形成光滑均勻得氧化膜。30%磷酸水溶液制備:取5濃磷酸 3ml 與 65ml 水混勻。6ml/L硝酸得制備:取濃硝酸 4ml 與0ml水混勻。方法:將色譜柱取下,用兩通連接進樣器與檢測器,將所有吸濾頭放入高純水中,以1.ml/n至少30分鐘待管路中