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文檔簡介

1、培基培養基是由人工方法配制而成的,專供微生物生長繁殖使用的混合營養物制品。適宜的培養基僅可 用于細菌的分離純化培養、傳代、菌種保存,還可用于研究細菌的生理、生化特性,是病原菌離鑒定的 重要環節和必不可少的手段。一、培養基的組成成分二、培養基種類三、分離培養基的選擇一培基組成(一)營養物質細菌需要的基礎營養物質應含有氮源、碳源、無機鹽類和生長因子等,常用的營養物質如下:1.蛋胨 提氮。動物或植物蛋白質經酶或酸堿解而成。含胨、多肽和多種氨基酸,為大多數 細菌生長所利用,尤其是含大量色氨酸的胰蛋白胨,更適于測靛基質用的蛋白胨。蛋白胨易溶水,遇酸 不沉淀,不因受高溫而凝固,并對兩性電解質有緩沖作用。但

2、吸水性強,應注意干燥密封保存2.肉浸液 是新鮮牛肉浸泡、沸而制成的肉汁。其中含有可溶性含氮浸出物(肌酸、黃嘌呤、腺嘌 呤、次黃嘌呤核苷酸、谷氨酸、甘氨酸等)和非含氮浸出物(肝糖、乳酸、琥珀酸、磷酸己糖脂肪、無 機鹽類等)。還有一些生長因子。肉浸液提供氮源和碳源,但肉浸液中所含氮物質過少而不能滿足細菌的需要,因此在制備培養時應 再加入 1%2%的蛋白胨和 0.5%化鈉。3.牛肉膏 由浸液經長時間加濃縮而制成類在加熱過程中被破壞以營養價值低于肉液, 但因無糖可用作腸道桿菌鑒別培養基的基礎成分。由于使用方便常于備養。4.糖、類 提碳和源。備培養基所用的糖類、醇類有多種,常用的糖類有單糖葡萄糖、 阿拉

3、伯糖等)、雙糖(乳糖、蔗糖等)和多糖(淀粉、菊糖等);常用的醇類有甘露醇、衛茅等。除葡 萄糖、蔗糖主要作為碳源和能源的基本成分外,其他糖類和醇類主要用于鑒定細菌所做的發酵應。6.無機鹽類 提供細菌生長的各元素,如:鉀、鈉、鐵、鎂、鈣、磷、硫等。用于制備培養基的無機 鹽類有多種,其中常的氯化和酸,者維酶活、節體外滲透非重, 后是菌好磷,在養中有沖用7.雞蛋和動物血清 雖然是構成培養基的基本成分,但卻是某些細菌生長所必需的營養物質,以僅 用于制備一些特殊的培養基這些菌接雞和物清獲營。培結核枝菌雞培 養和養喉菌呂血培基。8.生長因子 是細菌生長所必需,但需要量很小。在制備培養基時,常在肝浸液、肉浸液

4、、酵母浸液 和含血液培養基中加入維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等生長因子。(二)凝固物質制備固體培養基時,需要在液體中加入凝固物質。最常用的凝固物質為瓊脂,特殊情況下也可明膠、 卵白蛋白、血清等。無營養作用。(三)抑制劑和指示劑用于選擇、鑒定及判斷結果。1.抑制劑 有擇制用抑非出(病原)生,利檢菌病菌的長 常用的有膽鹽、煌綠、亞硫酸鈉、亞硒酸鈉及一些染料和某些抗生素等。2.指示劑觀察細菌是否利用和分解培養基中的糖、醇類。常的酚、性、基、甲紫溴香酚、國藍酸指劑亞藍用氧還指劑二培基類1.基礎培養基含基生所的本養分最用是浸,稱湯主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。 基礎培養基廣泛用于細菌的增菌、檢驗,也是制備其

5、他培養基的基礎成分。2.營養培養基在礎養中加葡糖血、長子特成,營養求高細和要殊長 因的菌長最常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等。3.鑒別培養基 利細分解類蛋質能及代產的同在培基加入定作底 物指劑觀細生過中解物釋的同物通過示的應同鑒細。例如糖發酵管、克氏雙糖鐵瓊脂KIA、伊-亞甲藍瓊脂和動-吲哚尿()養基等 4.選擇培養基 在養基中加入制劑,去抑制標本中的雜菌生長,有助于所選擇的細菌種類的生長。例培腸致菌 SS 瓊脂其中膽能制蘭性,櫞鈉煌能制腸埃菌因 使病沙菌志菌易離。5.特殊培養基 包厭培養和菌 L 培基。者培養專性厭氧菌的培養基,除含營養成分 外,還加入還原劑以降低培養基的氧化還原電勢,如皰

6、肉培養基、巰基乙醇酸鈉培養基等。后是針對細 胞壁缺損的細菌 L 型,由于胞內透壓較高,故培養該菌時必須采用高滲3%5%NaCl、10%20%糖或 7%聚乙烯吡咯烷酮等)低瓊脂培基。三分培基選臨床標本送往細菌實驗室后,應立即接種到適當的分離培養基上。依據衛生部臨床檢驗中心推,細 菌實驗室應備有如下分離培養基:血平 適于類細的長一細檢標的離都接此板。巧克血板 其中有 V X 因,于種有血菌、瑟等標。中國平或紅甲藍板 可制蘭陽細,選地促革陰細生,是好弱 選性養。酵革陰桿因解糖力同在平板菌顏不,于別種麥康平 具中強選擇,抑力強有少革陰菌生在康平上否長 是發菌定一依。5.SS 瓊 有較的菌,于賀和沙菌分

7、。選性強可響出,以使 用最加種選平以對補堿性脂 TCBS 瓊 用于糞中分霍弧及他菌血液菌養 用于從液骨中離見原。營養湯 用標本各細的菌養根標來和能在病菌確選各分培基痰本血板中藍麥凱巧力板分。血板于炎球、喉狀菌的離中藍麥凱用篩革陰桿;含菌 肽巧力板于選血菌,期高菌驗準性。【例題】對于 SS 瓊,說法不正確的是A. SS 瓊脂有較強的抑菌力B.用于志賀菌和沙門菌的分離C.單獨使用可提高檢出率D.常與弱選擇平板配對使用E.因選擇性過強,可影響檢出率正確答案C答案解析SS 瓊脂有較強抑菌力,用于志賀菌和沙門菌的分離。因選擇性過強,可影響檢出率。 所以,使用時最好加一種弱選擇平板配對互補。【例題】牛肉膏

8、湯是常用的培養基,它的特點是A.可培養需求較高的細菌B.可作有糖基的培養基C.可作無糖基的培養基D.培養要求苛刻的細菌E.可培養難以生長的細菌正確答案C答案解析牛肉膏是由肉浸液經長時間加熱濃縮而制成。糖類在加熱過程中被破壞,所以其養價值 低于肉浸液,但因無糖可用作腸道桿菌鑒別培養基的基礎成分。由于使用方便,常用于無糖基培養基?!纠}】在基礎瓊脂培養基中不含有的營養成分是A.水解酪蛋白B.肉湯C.蛋白胨D.NaClE.瓊脂正確答案A答案解析基礎培養基是指含有基礎生長所需的基本營養成分,最常用的是肉浸液,俗稱肉,主要 成分含牛肉浸液、蛋白胨、酵母提取物和 NaCl?;A培養基廣泛用于細菌的增菌、檢

9、驗,也是制其他 培養基的基礎成分?;A瓊脂培養基中除了以上的成分外,還有瓊脂?!纠}】屬于選擇性培養基的是A.血瓊脂平板B.SS 瓊C.肉膏湯培養基D.蛋白胨水E.巧克力平板正確答案B答案解析選擇培養基是在培養基中加入抑制劑,去抑制標本中的雜菌生長,有助于對所選的細菌 種類的生長。如培養腸道致病菌的 SS 瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽性菌,枸櫞酸鈉和煌綠可抑大腸 埃希菌,因而使致病的沙門菌、志賀菌容易分離到?!纠}】不屬于選擇性培養基的是A.巧克力平板B.SS 平C.麥康凱平板D.堿性蛋白胨水E.伊紅亞藍瓊脂正確答案A2答案解析巧克力血平板屬于分離培養基,其中含有和因子,適于接種疑有嗜血桿菌、

10、瑟菌等 的標本。2【例題】在下列選擇性培養基中,常用于分離腸道致病菌的是A.SS 瓊B.堿性瓊脂C.羅-琴培養基D.尿素培養基E.蛋黃平板正確答案A答案解析培養腸道致病菌的 SS 瓊,其中的膽鹽能抑制革蘭陽性菌,枸櫞酸鈉和煌綠能抑制腸埃 希菌,因而使致病的沙門菌、志賀菌容易分離到?!纠}】巧克力平板是A.選擇性培養基B.基礎培養基C.營養培養基D.特殊培養基E.鑒定培養基正確答案C答案解析營養培養基是在基礎培養基中可加入葡萄糖、血液、生長因子等特殊成分,供營要求較 高的細菌和需要特殊生長因子的細菌生長。最常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等?!纠}】雙糖鐵培養基屬于A.基礎培養基B.鑒別培養基C

11、.營養培養基D.選擇培養基E.厭氧培養基正確答案B答案解析鑒別培養基是指利用細菌分解糖類和蛋白質的能力及其代謝產物的不同,在培養中加入 特定的作用底物和指示劑,觀察細菌生長過程中分解底物所釋放的不同產物,通過指示劑的反不同來 鑒別細菌。例如糖發酵管、克氏雙糖鐵瓊脂)、伊-藍瓊脂和動力吲-尿素MIU)培基等。【例題】某咽炎患者,疑為溶血性鏈球菌感染,取咽拭子標本,應選擇接種于下列哪種培養基 A.羅氏培養基B.血平板C.巧克力血平板置 5%10%COD.中國藍平板E.麥康凱平板正確答案B答案解析血平板適合其生長并可觀察溶血情況,巧克力血平板觀察不到其溶血現象,鏈球在其他 培養基則不生長?!纠}】下列哪種培養基適合觀察變形桿菌的遷徙生長現象A.伊紅美藍培養基B.血平板C.麥康凱平板D.SS 平E.中國藍平板

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