1、高中生物必修2第六章第2節基因工程及其應用同步測試一、選擇題1、已知某種限制性內切酶在一線性DNA分子上有3個酶切位點，如圖中箭頭所指，如果該線性DNA分子在3個酶切位點上都被該酶切斷，則會產生a、b、c、d四種不同長度的DNA片斷現有多個上述線性 DNA分子，若在每個 DNA分子上至少有一個酶切位點被該酶 切斷，則理論上講，經該酶酶切后，這些線性DNA分子最多能產生長度不同的DNA片斷的 TOC o 1-5 h z 種類數是（）SbCd銭性DNA分子的萌切示意圖A. 3B. 4C. 9D. 122、蛋白質工程與基因工程相比較，其突出的優點是（）基因工程原則上能產生任何蛋白質蛋白質工程能對現有

2、蛋白質進行改造，或制造出一種新的蛋白質C蛋白質工程可以不通過轉錄和翻譯來實現D.蛋白質工程是在基因工程的基礎上，延伸出來的第三代基因工程二、非選擇題3、為擴大可耕地面積，增加糧食產量，黃河三角洲等鹽堿地的開發利用備受關注.我國科學家應用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系獲得耐鹽基因后，構建重組DNA分子所用的限制性內切酶作用于圖中的 處，DNA連接酶作用于 處（填“ a”或“ b”） TOC o 1-5 h z 將重組DNA分子導入水稻受體細胞的常用方法有土壤農桿菌轉化法和 法將導入目的基因的水稻細胞培養成植株需要利用 技術，該技術的核心是禾廿.為了確定耐鹽轉基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位

3、素標記的做探針進行分子雜交檢測， 又要用 的方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性.*4、將動物致病菌的抗原基因導入馬鈴薯制成植物疫苗，飼喂轉基因馬鈴薯可使動物 獲得免疫力以下是與植物疫苗制備過程相關的圖和表請根據以下圖表回答下列問題 圖1圖1lllllnpPWfflfflnnnnTwynnT -帳樁引物對與權板結存示更圖圖2真1引物對序列袤I引輸對APl AAcTCA A XTGTAGCTAIrS2 TTA AGTCC ATrACreTAo !引物對BCTCCGkCTAGTGGCT( IrtGAGCT(XiCGTACCCTCG I& 2兒種Sr制梅識別序列及為割.X限制酶AiUIEMwI 1PX

4、ilSwil切割位點AG Jr CT TC GAG J AAlTCCrrAA T GC rGCA J GG T CGTCI一CCC J GCClGGG T CCCl（1） 在采用常規PCR技術擴增目的基因的過程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內的DNA聚合酶，其最主要的特點是 .（2） PCR過程中退火（復性）溫度必須根據引物的堿基數量和種類來設定表1為根據模板設計的兩對引物序列，圖2為引物對與模板結合示意圖請判斷哪一對引物可采用較高的退火溫度？ .（3） 圖1步驟所用的 DNA連接酶對所連接的 DNA兩端的堿基序列是否有專一性要 求？ .（4） 為將外源基因轉入馬鈴薯，圖1步驟轉基因所

5、用的細菌 B通常為.（5）對符合設計要求的重組質粒 T進行酶切假設所用的酶均可將識別位點完全切開，請根據圖1中標示的酶切位點和表 2所列的識別序列，對以下酶切結果作出判斷采用ECoRl和PSt I酶切，得到 種DNA片斷.采用EcoRI和SmaI酶切，得到 種DNA片斷.*5、如圖為某種質粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內切酶ECORk BamHl的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tetR為四環素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori 為復制原點已知目的基因的兩端分別有包括 EcoRk BamHI在內的多種酶的酶切位點.據圖回答：將含有目的基因的 DNA與該質粒表達載體分別用Eco

6、RI酶切，酶切產物用DNA連 TOC o 1-5 h z 接酶進行連接后，其中由兩個DNA片斷之間連接形成的產物有 、三種若要從這些連接產物中分離出重組質粒，需要對這些連接產物進行上述3種連接產物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉化實驗之后將這些宿主細胞接種到含四環素的培養基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是 ;若接種到含有青霉素的培養基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是 目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結合的位點是 ,其合成的產物是在上述實驗中，為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切后產生的末端發生任意連接，酶切時應選用的酶是 *6、蛋白質分子的設計是一項復雜而艱巨的工程，其

7、基本流程可以用下圖表示：新的蛋白質!DSA (1)構建新的蛋白質模型是分子設計的關鍵環節你認為構建蛋白質模型的依據是什(1)么？通過DNA合成的新基因怎樣才能得到準確的表達？有的學者認為，蛋白質工程本身也是研究蛋白質結構和功能的一種有力工具，你 是怎么看待的？試題答案】、選擇題1、 C 2、 B二、非選擇題3、答案：（ 1）a a （2）基因槍（花粉管通道）（3）植物組織培養脫分化（去分化） 再分化（ 4）耐鹽基因（目的基因）移栽到鹽堿地中（或用一定濃度的鹽水澆灌）解析：限制酶可水解 DNA分子中特定位點兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，DNA連接酶可催化兩個脫氧核苷酸分子之間磷酸二酯鍵的形成；

8、 在轉基因植物的培育過程中， 可以 運用土壤農桿菌轉化法、 基因槍法或花粉管通道法將目的基因導入受體細胞， 還需利用植物 組織培養技術將受體細胞培養成新植株 .4、 答案：（1）耐高溫 （2）引物對B （ 3）否 （4）農桿菌（5）2 1 解析：（1） PCR技術擴增DNA時，首先要在80 C100 C溫度范圍內使 DNA解螺旋.高溫解決了打開 DNA雙鏈的問題但又面臨DNA聚合酶失活的新問題.20世紀80年代，科 學家從水生耐熱細菌 Taq中分離得到耐高溫的 Taq DNA聚合酶，使體外DNA擴增成為現實（2）堿基A與T之間通過兩個氫鍵相連配對， 堿基C與G之間通過3個氫鍵相連配對， DNA

9、分子中堿基C與G的比例決定了 DNA分子的耐高溫程度引物對B中C與G的比例明 顯高于引物對A,因此，引物對 B可采用較高的退火溫度（ 3） DNA 連接酶的作用部位是磷酸基團與五碳糖之間的磷酸二酯鍵，自然，對所連接 的 DNA 兩端的堿基序列沒有專一性要求 （4） 將外源基因導入不同的受體細胞中時， 所用的方法是不同的 對于動物細胞常用顯 微注射法，對于植物細胞最常用的是土壤農桿菌轉化法故本小題所用的細菌 B通常為農桿 菌.（5） 由圖1過程知，用ECoRl酶和A1uI酶切割抗原基因 DNA片斷會得到XY片斷， 由圖1過程可知，用EcoRI酶和Smal酶切割質粒產生 MN片斷.這樣形成的兩個

10、DNA片 斷用DNA連接酶形成重組質粒.其中X、M連接處是EcoRI酶的切割位點，M、N之間還有 一個PStI酶的切割位點.如果用EcoRI酶和PStI酶切割重組質粒，將會在兩個切割位點切割 產生2種DNA片斷.但若用EcoRI酶和SmaI酶切割重組質粒，由圖1過程判斷，重組 質粒上沒有Sma I酶的切割位點，因此 EcoRI酶只能切割出1種DNA片斷.5、答案：（1）目的基因載體連接物 載體載體連接物 目的基因目的基因連接物 分離純化 （ 2）載體載體連接物 目的基因載體連接物、載體載 體連接物（3）啟動子 mRNA （4） EcoRI和BamHI解析：本題考查基因工程及基因表達的相關知識

11、將含有目的基因的 DNA 與質粒表達載 體分別用EcoRI酶切后，它們所產生的黏性末端相同，用DNA連接酶處理后，不同的片斷隨機結合， 可形成 3 種不同的連接物， 這些連接物可采用電泳、 層析或超速離心等方法進行分 離純化， 將這 3 種連接物導入受體菌后， 可根據不同連接物所攜帶抗性基因的差異選擇不同 的選擇性培養基進行篩選 由圖示和題目中提供的信息可知，由于不同的酶所切割出的黏性 末端不同，所以能避免末端的任意連接，因此應用EcoRI和BamHI進行酶切可有效防止酶切后產生的末端發生任意連接 基因轉錄過程中，只有RNA聚合酶識別并與啟動子結合，才能使目的基因轉錄出 mRNA.6、答案：（

12、 1 ）構建蛋白質模型的依據是控制這種蛋白質合成的基因以及蛋白質的空間 結構 （2）通過基因工程技術，將新基因導入大腸桿菌等受體細胞中，新基因在受體細胞中 指導合成新蛋白質 （ 3）學者的認識恰當 蛋白質結構直接影響其功能活性， 要想研究蛋白質結構和功能的 關系， 蛋白質工程就是有力的工具， 利用這種工具可以改變蛋白質的空間結構， 探究其功能 的改變，從而作出相應的科學結論 解析：本題主要考查蛋白質工程的目的、實質及基本操作順序解答本題時，首先要明確蛋白質工程的目的及實質， 然后對其操作過程進行相應的推導來組織答案： （1）蛋白質工 程的目的是合成人類需要的蛋白質， 蛋白質的功能是設計的依據， 由于功能與結構的統一性，所以要根據蛋白質的空間結構來