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文檔簡介

1、膠乳凝集試驗RF測定實驗原理以聚苯乙烯膠乳顆粒為載體的間接凝集試驗： 聚苯乙烯顆粒具有很強的吸附蛋白質的能力，借此將抗原（變性IgG）與膠乳顆粒結合成致敏顆粒，直接與待測標本中的抗體（RF）發生凝集反應。 RF為抗變性IgG的抗體，因此本實驗使用的是人IgG致敏的聚苯乙烯顆粒。試劑和器材RF檢測試劑（商品化試劑）RF陰性血清和陽性血清（試劑盒自帶）黑色反應板、滴管、攪拌棒等操作方法在黑色反應板上取3格，用滴管分別加待測血清、陽性血清和陰性血清各1滴，然后每格加入1滴致敏膠乳顆粒試劑。用攪拌棒充分混勻后，連續搖動23min后與對照比較，觀察結果。結果判斷膠乳顆粒凝集且液體澄清者為陽性， 膠乳顆粒

2、不凝集仍保持均勻膠乳狀者為陰性；首先觀察陽性血清和陰性血清的反應結果，若前者為陽性反應后者為陰性反應，說明試劑有效；然后再觀察待測樣品的反應情況，并判斷陰陽性。方法學評價該試驗方法簡單、快速、特異性強、結果清晰易觀察判斷。觀察時應注意排除非特異性凝集反應。如何進行半定量分析？ CIC測定實驗原理： PEG沉淀法 聚乙二醇（PEG），分子量6000，具有較強的脫水作用，可引起蛋白質沉淀，沉淀具有選擇性且對蛋白質生物活性無影響。是免疫濁度測定技術中常用的增濁劑。PEG沉淀蛋白質的選擇性與其濃度相關：2%PEG只能沉淀大分子， 4%PEG能沉淀較小分子的循環免疫復合物 大于5%PEG，選擇性沉淀特性

3、消失。在PH、離子強度等條件固定時，蛋白質分子量越大，用以沉淀的PEG濃度越小。分離血清免疫復合物一般采用最終濃度為3%4%PEG。血清中加入最終濃度約為3.5%的PEG后，其濁度與血清中免疫復合物含量相關，用分光光度計測定其A值，代表免疫復合物相對含量。試劑和器材試劑1：0.1mol/L PH8.6硼酸緩沖液 試劑2：3.75%PEG-硼酸緩沖液 （已備好）儀器：721分光光度計 操作方法加樣：對每一份標本，取兩試管按下表操作 加入物（單位：mL）對照管測定管待測血清0.10.1試劑1（硼酸緩沖液 ）3試劑2（PEG-硼酸緩沖液 ）3操作方法將以上反應管充分混勻，置室溫1小時。用721分光光度計在460nm波長下混勻測定OD值。關機，清潔儀器，蓋上布罩。 正常參考值：OD0.15結果易受多種大分子蛋白質的干擾，特異性差。CIC的檢出可以為多種與自身免疫相關疾病提供輔助診斷診斷指標，但由于方法上的問題，其測定結果尚不能作

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