1、食品雙歧桿菌鑒定檢驗原始記錄樣品編號： 檢驗開始時間： 年 月 日樣品名稱： 檢驗完成時間： 年 月 日檢測項目：雙歧桿菌鑒定 檢測依據：GB 4789.34-2016 雙歧桿菌的鑒定 純菌菌種：半固體或液體菌種直接接種在雙歧桿菌瓊脂平板或 MRS瓊脂平板。固體菌種或真空冷凍干燥菌種,可先加適量滅菌生理鹽水或其他適宜稀釋液,溶解菌粉。接種于雙歧桿菌瓊脂平板或 MRS瓊脂平板。361厭氧培養48h2h,可延長至72h2h。 食品樣品：取樣25.0g(mL),置于裝有225.0mL 生理鹽水的滅菌錐形瓶,均質1min2min,制成110的樣品勻液。將上述樣品勻液接種在雙歧桿菌瓊脂平板或 MRS瓊脂

2、平板,或取0.1mL適當稀釋度的樣品勻液均勻涂布在雙歧桿菌瓊脂平板或 MRS瓊脂平板。361厭氧培養48h2h,可延長至72h2h。挑取3個或以上的單個菌落接種于雙歧桿菌瓊脂平板或 MRS瓊脂平板。36 1厭氧培養48h2h,可延長至72h2h。選取可疑菌落做鏡檢及生化試驗。檢 驗 項 目雙歧桿菌樣品純菌菌種食品樣品接 種 量25.0g(mL)前處理稀釋液225.0mL 生理鹽水接種和涂布培 養 基雙歧桿菌瓊脂平板或 MRS瓊脂平板雙歧桿菌瓊脂平板或 MRS瓊脂平板培養溫度361（厭氧）361（厭氧）培養時間48h2h/72h2h48h2h/72h2h純培養培 養 基/雙歧桿菌瓊脂平板或 MR

3、S瓊脂平板培養溫度/361（厭氧）培養時間/48h2h/72h2h結 果鏡檢及生化試驗結 果注：+生長或有可疑菌落；-未生長或無可疑菌落。G-b革蘭氏陰性桿菌；G+b革蘭氏陽性桿菌；G+c革蘭氏陽性球菌。電子天平編號： 使用狀況 試驗前： 試驗后：培養箱編號： 使用狀況 試驗前： 試驗后：檢測人： 校核人： 審核人：樣品編號： 雙歧桿菌的計數 純種菌種：固體與半固樣，以無菌操作稱取2.0g樣品，加入198.0mL稀釋液，均質1min2min，制成1:100的樣品勻液；液體樣品以無菌操作量取1.0mL樣品，置于9.0mL稀釋液中，混勻，制成1:10的勻液。用1mL無菌吸管或微量移液器1:10樣品

4、勻液1mL注入盛有9mL稀釋液制成1:100的樣品勻液。按照上述方法，制成10倍系列稀釋樣品勻液。 食品樣品：無菌操作稱（量）取樣品25g或ml加入225ml無菌生理鹽水滅菌錐形瓶中，均質1min2min，制成1:10的樣品勻液；按照純菌種方法制成10倍系列稀釋樣品勻液。選擇2-3個適宜稀釋度的樣品均液，吸取1ml樣品均液于無菌平皿內，每個稀釋度做2個平皿。同時，別吸取1ml空白稀釋液加入兩個無菌平皿內作空白對照，及時將15-20ml冷至46的雙歧桿菌瓊脂培養基或MRS瓊脂培養基傾注平皿，轉動平皿使其混合均勻，凝固后翻轉平板，置 361 培養厭氧培養48h2h，可延長至72h2h，計數平板上菌落數（CFU）。稀 釋 度10-110-210-310-410-5空白對照雙歧桿菌菌落數（CFU/板）計算及結果： 雙歧桿菌菌落數（CF