1、ICS07.080CCSB 6133 浙江省地方標準DB33/T 24332022小黃魚種質要求Requirements for germplasm of little yellow croaker2022 - 01 - 29 發(fā)布2022 - 03 - 01 實施浙江省市場監(jiān)督管理局發(fā) 布 DB33/T 24332022前言本標準按照GB/T 1.12020標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則的規(guī)定起草。 請注意本標準的某些內容可能涉及專利。本標準的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本標準由浙江省農業(yè)農村廳提出并組織實施。 本標準由浙江省水產標準化技術委員歸口。 本標準起草單位：

2、浙江省海洋水產研究所、浙江省農業(yè)科學院。 本標準主要起草人：樓寶、謝慶平、劉峰、詹煒、徐冬冬、陳睿毅、王立改、柴學軍。 I DB33/T 24332022DB33/T 24332022小黃魚種質要求范圍本標準規(guī)定了小黃魚（Little yellow croaker）的學名與分類、主要形態(tài)構造特征、生長與繁殖、細胞遺傳學特性、分子遺傳學特性、檢測方法和判定規(guī)則。 本標準主要適用于小黃魚的種質檢測與鑒定。 規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件， 僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

3、文件。 GB/T 18654.4 養(yǎng)殖魚類種質檢驗 第4部分：年齡與生長測定 GB/T 18654.6 養(yǎng)殖魚類種質檢驗 第6部分：繁殖性能測定GB/T 18654.12 養(yǎng)殖魚類種質檢驗 第12部分：染色體組型分析GB/T 22213 水產養(yǎng)殖術語 3 術語和定義GB/T 22213 界定的術語和定義適用于本標準。 4 學名與分類地位學名小黃魚（Larimichthys polyactis Bleeker, 1877），俗名小鮮、厚鱗仔、黃花魚、小黃花、仔梅魚。 分類地位屬硬骨魚綱（Osteichthyes），鱸形目（Perciformes），石首魚科（Sciaenidae），黃魚屬（Lar

4、imichthys）。 5 形態(tài)特征5.1 外部形態(tài)1 GB/T 18654.1 養(yǎng)殖魚類種質檢驗 第1部分：檢驗規(guī)則GB/T 18654.2 養(yǎng)殖魚類種質檢驗 第2部分：抽樣方法GB/T 18654.3 養(yǎng)殖魚類種質檢驗 第3部分：性狀測定 小黃魚體背灰褐色，腹部銀白色或金黃色，各鰭灰黃色。體延長，側扁，背腹緣均廣弧形，體形似大黃魚。頭大，吻短而尖鈍，具發(fā)達黏液腔，吻上孔3個4個，不顯著，吻緣孔5個，中吻緣孔圓形， 位于吻緣上方，側吻緣孔裂縫狀。眼中大，上側位，位于頭的前半部；眼間隔寬而圓凸，大于眼徑。口前位，口裂大而斜，上下頜約等長，頜骨向后伸達眼之后緣下方。頭部、胸鰭下部及腹鰭前部被圓鱗

5、， 軀干其余部分至尾柄被櫛鱗，尾鰭基部也被小圓鱗。側線發(fā)達，前部稍彎曲，后部平直，伸達尾鰭后端。側線上鱗5行7行。尾柄短而寬。小黃魚的外形見圖1。 圖1 小黃魚外形圖可數(shù)性狀小黃魚可數(shù)形狀如下： 背鰭：D.,-2936； 臀鰭：A.II-910； 胸鰭：P.1117； 腹鰭：I-5； 側線鱗數(shù)：56枚70枚，側線上鱗數(shù)5枚7枚；側線下鱗數(shù)（5-A）枚（7-A）枚。 鰓耙數(shù)：左側第一鰓弓外側鰓耙數(shù)7枚11枚+16枚20枚。 可量性狀可量性狀的比例值見表1。 表1 小黃魚可量性狀比例值5.4 內部構造鰾大，1室，幾乎與體腔等長，前端長圓形，后端尖細，銀白色，鰾側具26對34對纓須狀側支。鰾支管腹分

6、支下小支的前小支和后小支兩分支不等長（見圖2）。耳石近橢圓形，前端寬圓，后端狹尖，2 體長/體高 體長/頭長 頭長/吻長 頭長/眼徑 尾柄長/尾柄高 頭長/眼間距 體長/尾柄長 體長/尾柄高 3.54.1 3.04.2 3.65.3 3.76.3 2.52.9 2.63.0 4.45.0 11.813.4 里緣及外緣弧形；背面隆起，有橫行嵴棱；腹面有一蝌蚪形印記。腹膜，灰黑色。脊椎骨數(shù)27枚30 枚。 2 分支不等長 小黃魚鰾支管分 2 支 圖2 小黃魚鰾支管特征生長與繁殖生長養(yǎng)殖小黃魚初次性成熟1年齡和2年齡性成熟期平均全長，體長和體重指標見表2。 小黃魚體重與體長關系式分別見式（1）和式（

7、2）： 養(yǎng)殖小黃魚： W=0.025L2.809，R2= 0.908，樣本量（123）（1） 野生小黃魚： W=0.019L2.967，R2= 0.962，樣本量（89）（2） 式中： W 體重，單位為克（g）； L 體長，單位為厘米（cm）； R 相關系數(shù)。 繁殖性成熟年齡一般雌雄同步，1年齡性成熟。 產卵類型3 表2 養(yǎng)殖小黃魚生長指標年齡 全長（cm） 體長（cm） 體重（g） 1 20.53.3 17.63.1 73.5927.02 2 24.53.8 21.63.7 120.5957.02 每年性成熟產卵一次，在繁殖期可分批產卵。 懷卵量1齡性成熟雌魚絕對懷卵量（40 10012 4

8、00）粒，2齡性成熟雌魚絕對懷卵量為（99 00021 800） 粒。 受精卵受精卵呈圓球狀，無色透明，卵浮性，單油球，卵徑（1 41373）m，油球徑（46523）m。 細胞遺傳學特征小黃魚染色體共48條，核型為2n=6sm+42t，NF=54。小黃魚染色體核型見圖3。 圖3 小黃魚染色體核型圖分子遺傳學特征小黃魚線粒體COI片段的堿基序列如下： CATAAAGATA TTGGCACCCT CTATCTAATT TTTGGTGCAT GAGCCGGAAT AGTGGGCACC 50 GGCCTAAGTC TCATTATTCG AGCAGAGCTA AGCCAGCCCG GCTCGCTTCT

9、CGGAGACGAC 100 CAGATTTTTA ACGTAGTTGT TACGGCACAT GCCTTCGTTA TAATCTTCTT TATAGTAATA 150 CCCGTAATAA TCGGAGGGTT CGGAAACTGA CTCGTGCCTT TAATAATTGG CGCCCCCGAC 200 ATAGCATTTC CCCGAATAAA TAACATAAGC TTCTGACTTA TCCCCCCTGC TTTCATTATG 250 CTCGCAGCCT CATCAGCGGT TGAAGCAGGG GCCGGAACAG GGTGAACAGT CTACCCCCCA 300 CTTGC

10、TGGAA ATCTCGCACA CGCAGGAGCT TCAGTCGACT TAGCCATTTT CGCTCTGCAC 350 CTTGCGGGTG TCTCTTCAAT CCTGGGGGCC ATCAACTTCA TCACAACAAT TCTTAACATA 400 AAACCCCCTG GCATAACCCA ATACCAAACA CCCCTGTTTG TGTGATCCGT TCTGATTACA 450 GCAGTCCTCC TCCTACTATC ACTGCCCGTC CTAGCTGCCG GCATCACAAT GCTTTTAACA 500 GACCGCAACC TCAACACAAC CTT

11、TTTTGAC CCCTCAGGTG GAGGCGATCC CATCCTTTAT 550 CAACACCTAT TCTGATTTTT TGGTCACC 688 線粒體COI序列分析方法見附錄A。 4 檢測方法檢驗規(guī)則按GB/T 18654.1的規(guī)定執(zhí)行。 抽樣方法按GB/T 18654.2的規(guī)定執(zhí)行。 性狀測定按GB/T 18654.3的規(guī)定執(zhí)行。 年齡鑒定按GB/T 18654.4的規(guī)定執(zhí)行。年齡鑒定材料為耳石。 懷卵量的測定按GB/T 18654.6的規(guī)定執(zhí)行。 染色體和核型檢測按GB/T 18654.12的規(guī)定執(zhí)行。 9.7 分子遺傳學檢測按第8章執(zhí)行。 10 判定規(guī)則檢測結果不符合第5

12、章和第6章，則判定為不合格項，有不合格項的樣品為不合格樣品。 5 附 錄 A（資料性）線粒體 COI 序列分析方法取小黃魚肌肉組織剪碎并用10 %蛋白酶K消化后，按照標準的酚氯仿抽提法或者使用試劑盒進行總DNA的提取。 擴增引物序列為COI-F（5-CATAAAGATATTGGCACC-3）和COI-R（5- GGTGACCAAAAAATCAGAA -3）。反應體系為50 L，每個反應體系包括1.25 U的Taq DNA聚合酶；各種反應組份的終濃度為200 nmol/L的正反向引物；200 mol/L的每種dNTP，10PCR緩沖液200 mmol/L Tris-HCl，pH 8.4；200 mmol/L KCl； 100 mmol/L (NH4)2SO4；15 mm