1、精選優質文檔-傾情為你奉上精選優質文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業專心-專注-專業精選優質文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業章末測驗（第一章）1. 下列關于基因工程的敘述，錯誤的是()A目的基因和受體細胞均可來自動物、植物或微生物B限制性核酸內切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素無生物活性D載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細胞和促進目的基因的表達【答案】D【解析】目的基因來源于含有人們所需要性狀的一切生物，可以是動物、植物，也可以是真菌、細菌等；基因工程中一般要使用同種限制性核酸內切酶進行切割，以獲得具有相同粘性末端的目的基因和載體，在DNA連

2、接酶的作用下，將目的基因和載體連接，形成重組DNA分子；人的胰島素原基因可以在大腸桿菌內表達，但是由于大腸桿菌是原核生物，沒有內質網、高爾基體等細胞器，合成的胰島素不具有胰島素的功能，即沒有生物活性；標記基因是為了檢測并篩選含重組DNA的細胞，但對于目的基因的表達沒有影響。2.下圖表示限制性核酸內切酶切割某DNA的過程，據圖分析，該酶能識別的堿基序列及切點是 （ ）ACTTAAG，切點在C和T之間BCTTAAG，切點在G和A之間CGAATTC，切點在G和A之間DCTTAAC，切點在C和T之間【答案】C 解析 該酶識別序列為GAATTC，切割G和A堿基間的磷酸二酯鍵。3.（2016春龍海市校級期

3、中）下列有關限制性內切酶識別的敘述，不正確的是（）A從反應類型來看，限制性內切酶催化的是一種水解反應 B限制性內切酶的活性受溫度、pH的影響 C一種限制性內切酶只能識別雙鏈DNA中某種特定的脫氧核苷酸序列 D限制性內切酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現的幾率就越小【答案】D【解析】限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，即催化的是一種水解反應，故A正確；限制性內切酶的活性受溫度、pH的影響，在最適宜的溫度和pH條件下，酶的活性最高；溫度和pH偏高或偏低，酶的活性都會明顯降低；在過酸、過堿或溫度過高條件下酶會變性失活，而在低

4、溫條件下酶的活性降低，但不會失活，故B正確；一種限制性內切酶只能識別雙鏈DNA中某種特定的脫氧核苷酸序列，并在特定的位點切割磷酸二酯鍵，說明酶專一性，故C正確；限制性內切酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現的幾率就越大，故D錯誤4.EcoR和Sma限制酶識別的序列均由6個核苷酸組成，但切割后產生的結果不同，其識別序列和切割位點（圖中箭頭處）如圖所示，據圖分析下列說法正確的是（ ）EcoR識別序列及切割位點 SmaI識別序列及切割位點A所有限制酶的識別序列均由6個核苷酸組成BSma切割后產生的是黏性末端C用DNA連接酶連接平末端和黏性末端的效率一樣D細菌細胞內的限制酶可以切割外源DNA，防止外

5、源DNA入侵【答案】D【解析】限制酶的識別位點一般由4、5、6或8個核苷酸序列組成，故A錯誤；據圖分析，Sma限制酶切割后產生的是平末端，故B錯誤；用DNA連接酶連接平末端的效率比黏性末端低，故C錯誤；細菌細胞內限制酶可以切割外源DNA，防止外源DNA入侵，是一套完善的防御機制，故D正確5.下表是外源基因插入位置（插入點有a、b、c），請根據表中提供細菌的生長情況，推測三種重組后細菌的外源基因插入點，正確的一組是（ ）A是c；是b；是aB是a和b；是a；是bC是a和b；是b；是aD是c；是a；是b【答案】A【解析】第組中細胞能在含氨芐青霉素培養基上生長，說明抗氨芐青霉素基因沒有被破壞；細菌能在

6、含四環素培養基上的生長，說明抗四環素基因沒有被破壞說明了外源基因插入位置使c；第組中細胞能在含氨芐青霉素培養基上生長，說明抗氨芐青霉素基因沒有被破壞；細菌不能在含四環素培養基上的生長，說明抗四環素基因被破壞說明了外源基因插入位置是b；細胞不能在含氨芐青霉素培養基上生長，說明抗氨芐青霉素基因被破壞；細菌能在含四環素培養基上的生長，說明抗四環素基因沒有被破壞說明了外源基因插入位置是a。6.現有一長度為1000堿基對（by）的DNA分子，用限制性核酸內切酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000by，用Kpn1單獨酶切得到400by和600by兩種長度的DNA分子，用EcoR，Kpn同時酶切后

7、得到200by和600by兩種長度的DNA分子該DNA分子的酶切圖譜正確的是（ ）A BC D【答案】D【解析】A選項中的DNA用Kpnl單獨酶切會得到600by和200by兩種長度的DNA分子，與題意不符，A錯誤；B選項中的DNA用EcoRI單獨酶切會得到800by和200by兩種長度的DNA分子，與題意不符，B錯誤；C選項中的DNA用EcoR1酶切后得到200by和800by兩種長度的DNA分子，與題意不符，C錯誤；D選項中的DNA用EcoR1酶切后得到的DNA分子是1000by，用Kpn1單獨酶切得到400by和600by兩種長度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同時酶切后得到200b

8、y和600by兩種長度的DNA分子，與題意相符，D正確7.采用基因工程的方法培育抗蟲棉，下列導入目的基因的做法正確的是（ ）將毒素蛋白注射到棉受精卵中將編碼毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中將編碼毒素蛋白的DNA序列，與質粒重組，導入細菌，用該細菌感染棉的體細胞，再進行組織培養將編碼毒素蛋白的DNA序列，與細菌質粒重組，注射到棉的子房并進入受精卵A B C D【答案】C【解析】將毒素蛋白注射到棉受精卵中，導入的是蛋白質，不是目的基因，錯誤；不能將目的基因直接注射到棉花的受精卵中，需要先形成重組質粒，才能保證目的基因的穩定遺傳和表達，錯誤；采用基因工程的方法培育抗蟲棉的過程中，目的基因是編碼

9、毒素蛋白的DNA序列，先將該序列與質粒重組成重組質粒，將重組質粒導入細菌，利用該細菌去感染棉花體細胞，再利用這個細胞進行組織培養，可以獲得轉基因抗蟲棉，正確；也可以將重組質粒注射棉的子房并進入受精卵，直接發育成轉基因抗蟲棉，正確。故選C。8.(2016年浙江舟山中學高二5月)大腸桿菌pUC118質粒具有氨芐青霉素抗性基因，某限制性核酸內切酶唯一切點位于該質粒的lacZ基因中。在特定的選擇培養基中，若lacZ基因沒有被破壞，則大腸桿菌菌落呈藍色；若lacZ基因被破壞，則菌落呈白色。右圖表示轉基因操作過程。下列說法錯誤的是A作為受體大腸桿菌應不含氨芐青霉素抗性基因，以便于篩選B若受體大腸桿菌的菌落

10、為白色，則有質粒導入大腸桿菌C選擇培養基中除必需的營養物質外，還應加入適量氨芐青霉素D應選擇藍色菌落的大腸桿菌進行擴大培養 【答案】D 【解析】據題意可得，lacZ基因是否被破壞是本實驗篩選重組DNA的標志，觀察指標即為菌落的顏色，如果受體大腸桿菌含有氨芐青霉素抗性基因，無論重組還是未重組菌落將都表現為藍色，A正確；若大腸桿菌的菌落為白色，說明lacZ基因被破壞，因此證明重組質粒導入大腸桿菌，B正確；圖中可以看出，質粒中還存在氨芐青霉素抗性基因，因此培養基中加入適量氨芐青霉素，這樣可以將沒有導入目的基因的大腸桿菌淘汰，C正確；白色菌落的大腸桿菌是轉入了目的基因的，所以應選擇白色菌落的大腸桿菌進

11、行擴大培養，D錯誤9.北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白具有11個氨基酸的重復序列，該序列重復次數越多，抗凍能力越強，下圖是獲取轉基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關敘述正確的是（ ）A過程獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測序B多個抗凍基因編碼區依次相連成能表達的新基因，不能得到抗凍性增強的抗凍蛋白C過程構成的重組質粒缺乏標記基因，需要轉入農桿菌才能進行篩選D應用DNA探針技術，可以檢測轉基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達【答案】B【解析】圖中是獲取目的基因的過程，獲取的目的基因，可用于基因工程，但不能用于比目魚基因組測序，故A錯誤；將多個抗凍基因編碼區相連形成的能表

12、達的新基因不再是抗凍基因，所以得不到抗凍性增強的抗凍蛋白，故B正確；是基因表達載體的構建過程，基因表達載體通常由啟動子、目的基因、終止子和標記基因構成，其中標記基因的作用是篩選重組質粒，利用農桿菌轉化法只能將質粒導入受體細胞，不能對重組質粒進行篩選，故C錯誤；利用DNA探針技術檢測目的基因是否導入到受體細胞，利用抗原抗體雜交技術檢測目的基因是否表達出來，故D錯誤10.下圖是將某細菌的基因A導入大腸桿菌內，制備“工程菌”的示意圖。據圖回答：(1)獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在_酶的催化下，合成互補的單鏈DNA，然后在_的作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因；二是根據目標蛋白質的

13、_序列，推測出相應的mRNA序列，然后按照堿基互補配對原則，推測其DNA的_序列，再通過化學方法合成所需基因。(2)利用PCR技術擴增DNA時，需要在反應體系中添加的有機物質有_、_、4種脫氧核糖核苷三磷酸和耐熱性的DNA聚合酶，擴增過程可以在PCR擴增儀中完成。(3)由A和載體B拼接形成的C通常稱為_。(4)在基因工程中，常用Ca2處理D，其目的是_。【答案】(1)逆轉錄DNA聚合酶氨基酸脫氧核苷酸(2)引物模板DNA (3)重組DNA(4)使細菌細胞處于感受態，提高轉化率【解析】(1)以A的mRNA為模板，在逆轉錄酶的催化作用下合成單鏈DNA，然后再以該單鏈DNA為模板，在DNA聚合酶的作

14、用下合成雙鏈DNA；根據目標蛋白質的氨基酸序列，參照密碼表可推測出相應的mRNA序列，然后根據堿基互補配對原則可推測出其DNA中的脫氧核苷酸序列，再通過化學方法利用DNA合成儀合成所需基因。(2)利用PCR擴增目的基因時，需要提供目的基因作為模板，添加引物來引導子鏈的形成，添加四種脫氧核糖核苷三磷酸(即dCTP、dATP、dGTP、dTTP)作為原料，耐熱性的DNA聚合酶來催化子鏈的形成；擴增過程可在PCR擴增儀中完成。(3)目的基因A和載體B拼接形成的C通常稱為重組DNA。(4)基因工程中，常用Ca2處理細菌細胞，使之成為感受態細胞，有利于其吸收重組DNA分子，提高受體細胞的轉化率。11.

15、我國科學家成功克隆了控制水稻理想株型的關鍵多效基因IPA1。研究發現，基因IPA1發生突變后，會使水稻穗粒數和千粒重(以克表示的一千粒種子的重量)增加，同時莖稈變得粗壯，增加了抗倒伏能力。實驗顯示，將突變后的IPA1基因導入常規水稻品種，可以使其產量增加10%以上。如圖表示該水稻新品種的簡易培育流程，據圖回答問題。(1)上圖所示流程中步驟是實驗所用技術的核心步驟。此步驟使_和_構成重組質粒。(2)將重組質粒導入土壤農桿菌之前，常用_處理該細菌，以增加該細菌_的通透性。(3)每個含突變基因IPA1的重組質粒中至少含_個限制性核酸內切酶識別位點。(4)從變異類型上分析，該水稻的新性狀的出現應該屬于

16、可遺傳變異中的_。【答案】(1)突變的IPA1基因Ti質粒(2)氯化鈣細胞壁(3)1(4)基因重組【解析】(1)基因工程操作的核心步驟是把目的基因和載體連接成重組DNA分子，這里的目的基因是突變的IPA1基因，載體是土壤農桿菌Ti質粒。(2)用氯化鈣處理細菌，能增大細菌細胞壁的通透性，可以提高導入重組DNA分子的成功率。(3)形成的重組質粒中至少含有一個限制性核酸內切酶的識別位點，且每個限制性核酸內切酶識別位點只能插入一個目的基因。(4)利用植物細胞的全能性，將已經導入目的基因的受體細胞通過植物組織培養可以形成完整的新品種植株，這種新品種植株中新性狀的出現屬于基因重組。12. 普通棉花中含甘露

17、糖苷酶基因(GhMnaA2)，能在纖維細胞中特異性表達，產生的甘露糖苷酶催化半纖維素降解，使棉纖維長度變短。為了培育新的棉花品種，科研人員構建了反義GhMnaA2基因表達載體，利用農桿菌轉化法導入棉花細胞，成功獲得轉基因棉花品種，具體過程如下。請分析回答：(1)和過程中所用的限制性核酸內切酶分別是_、_。(2)過程中用酶切法可鑒定正、反義表達載體。用Sma 酶和Not 酶切正義基因表達載體獲得0.05 kb、3.25 kb、5.95 kb、9.45 kb四種長度的DNA片段，則用Not 酶切反義基因表達載體獲得DNA片段的長度應是_和_。(3)過程中利用農桿菌介導轉化棉花細胞的過程中，在_溶液

18、環境中用_酶來制備原生質體。轉化后的細胞再通過_形成植物體。(4)導入細胞內的反義GhMnaA2轉錄的mRNA能與細胞內的GhMnaA2轉錄的mRNA互補配對，從而抑制基因的表達，其意義是_。【答案】(1)Hind、BamHSma (2)6.0 kb12.7 kb(3)甘露醇(或較高滲透壓)纖維素酶和果膠植物組織培養(4)阻止甘露糖苷酶合成，使棉纖維更長【解析】(1)根據圖示，過程中所用的限制性核酸內切酶是Hind 、BamH 。過程中所用的限制性核酸內切酶是Sma 。(2)根據圖示，正、反義基因表達載體總長度相等，Not 酶切位點在目的基因中的位置不一樣，因此只用Not I酶切反義基因表達載

19、體獲得DNA片段的長度應是5.95 kb0.05 kb6.0 kb，9.45 kb3.25 kb12.7 kb。(3)原生質體是植物細胞去除細胞壁之后的部分，而植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，需要用纖維素酶和果膠酶去除植物細胞壁。受體細胞經過植物組織培養技術形成轉基因植物。(4)因為普通棉花中含甘露糖苷酶基因(GhMnaA2)，能在纖維細胞中特異性表達，產生的甘露糖苷酶催化半纖維素降解，棉纖維長度變短。而導入細胞內的反義GhMnaA2轉錄的mRNA能與棉花細胞內的GhMnaA2轉錄的mRNA互補配對，從而抑制基因的表達，其意義是阻止甘露糖苷酶合成，使棉纖維更長。13. (2012江蘇高考)

20、圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列，圖2表示一種質粒的結構和部分堿基序列。現有Msp、BamH、Mbo、Sma4 種限制性核酸內切酶，它們識別的堿基序列和酶切位點分別為CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。請回答下列問題：eq avs4al(),圖1)eq avs4al(),圖2)(1)圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由_連接。(2)若用限制酶Sma完全切割圖1中DNA片段，產生的末端是_末端，其產物長度為_。(3)若圖1中虛線方框內的堿基對被TA 堿基對替換，那么基因D就突變為基因d。從雜合子中分離出圖1 及其對應的DNA 片段，用限制

21、酶Sma完全切割，產物中共有_種不同長度的DNA 片段。【答案】 (1)脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖(2)平537bp、790bp、661bp(3)4 【解析】 本題考查基因工程中的限制性核酸內切酶的作用機理。(1)DNA中一條脫氧核苷酸鏈上相鄰的兩個堿基不直接相連，而是通過脫氧核糖和磷酸以磷酸二酯鍵連接的，即依次由脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖連接。(2)Sam識別的堿基序列和酶切位點是CCCGGG，用Sam切割DNA產生的末端是平末端。分析圖1可知，該DNA片段中含有兩個Sam酶切位點，產物一共有三段DNA，長度分別為(5343)bp、(79633)bp、(6583) bp。(3)圖中虛線方框內發生

22、堿基替換后，形成的d基因失去了1個Sma的識別序列，故雜合子用Sma完全切割后，產物中除原有的3種長度的DNA片段外，還增加一種DNA片段。 14.(2014浙江五校第一次聯考)mtDNA是存在于人類細胞線粒體中雙鏈閉合環狀的DNA分子，具有自我復制、轉錄和控制合成蛋白質的功能。mtDNA的類型具有明顯的種族特異性。現用兩種限制性核酸內切酶M和N切割某人的mtDNA(限制酶M和N的識別序列和切割位點如圖1所示)，然后通過凝膠電泳分離DNA片段(通電狀態下，不同分子量的DNA片段在瓊脂中的移動距離不同)，分析后得到下表。 凝膠電泳結果(1 kb1 000對堿基，“”表示該片段的存在以及數量)分子

23、量(kb)酶M酶N酶M酶N1.02.03.04.05.06.07.09.010.0(1)該mtDNA的長度為_kb。在該DNA分子中，酶M與酶N的切割位點分別有_個。(2)酶M與酶N切出的能相互粘連的末端能在_酶的作用下相互連接，請將連接的結果表示出來：_。連接后的序列是否可以用酶M、酶N進行切割，請簡述理由：_。(3)圖2為真核細胞的某基因的結構圖以及限制酶M和N的切割位點。現用酶切法直接從供體細胞中切割圖2中的基因從而獲得目的基因，可選用酶_來切割。這個方法雖然操作方便，但切割下的基因中含有不能指導蛋白質合成的區域。因此，目前往往采用逆轉錄方法人工合成。其基本步驟是_。圖2(4)已知圖2中

24、區的堿基數是2 000個，其中陰影區域堿基數是800個，空白區域中G和C的總數共有400個，則由該區轉錄的mRNA中A和U總數是_。【答案】 (1)163、2(2)DNA連接eq avs4al(AGATCC,TCTAGG)否。連接后的序列不是酶M和酶N所能識別的特定的堿基序列(3)N從表達該基因的細胞中分離出mRNA，在逆轉錄酶的作用下，形成單鏈DNA，再經過復制形成雙鏈DNA(4)400【解析】 (1)分析題表可知，不管用哪種酶切割，所切割出的片段之和都是16 kb，因此可知該mtDNA的長度為16 kb。由于該mtDNA是雙鏈閉合環狀的，被酶M和酶N分別切割為3段和2段，因此切割位點分別有3個和2個。(2)粘性末端在DNA連接酶的作用下相互連接，其連接結果為eq avs4al(AGATCC,TCTAGG)，由于連接后的序列不是酶M和酶N所能識別的特定的堿基序列，因此不能再用酶M、酶N進行切割。(3)直接用酶N切割可獲得目的基因；逆轉錄法的步驟是從表達該基因的細胞中分離出mRNA，再在逆轉錄酶的作用下，形成單鏈DNA，再經過復制形成雙鏈DNA。(4)空白區域堿基總數為2 000個800個1 200個，其中G和C的總數是400，因此A和T共有800個，每條鏈中A和T之和均為400個，故以其中一條鏈為模板進行轉錄得到的mRN