1、第三節基因工程的應用一、基因工程與遺傳育種一、基因工程與遺傳育種1、傳統的遺傳育種方法有哪些？、傳統的遺傳育種方法有哪些？雜交育種雜交育種誘變育種誘變育種單倍體育種單倍體育種多倍體育種多倍體育種優點：優點：缺點：缺點：時間長、時間長、遠緣親本難以雜交（優良性狀的重組遠緣親本難以雜交（優良性狀的重組只能限制于同種生物之間）只能限制于同種生物之間） 2、基因工程技術如何解決不同生物之間優、基因工程技術如何解決不同生物之間優良性狀的重組？良性狀的重組？3、到目前為止，基因工程技術解決了哪些不、到目前為止，基因工程技術解決了哪些不同生物之間優良性狀的重組？同生物之間優良性狀的重組？ 轉基因抗蟲棉花轉基

2、因抗蟲棉花轉入蘇云金桿菌轉入蘇云金桿菌的一個抗蟲基因，的一個抗蟲基因，是中國目前最主要是中國目前最主要的轉基因作物的轉基因作物 轉黃瓜抗青枯病基因的甜椒轉黃瓜抗青枯病基因的甜椒轉魚抗寒基轉魚抗寒基因的番茄因的番茄轉黃瓜抗青枯病基因的馬鈴薯轉黃瓜抗青枯病基因的馬鈴薯不會引起過敏的轉基因大不會引起過敏的轉基因大豆豆轉基因植物：轉基因植物：1 1）高產、優質的農作物；）高產、優質的農作物；2 2）抗逆性品種抗逆性品種 抗鹽堿、抗寒、抗干旱抗鹽堿、抗寒、抗干旱3 3）提高農作物的營養價值。）提高農作物的營養價值。提高動物生長速度提高動物生長速度生長快、耐不良環境、肉質生長快、耐不良環境、肉質好的轉基因

3、魚好的轉基因魚( (中國中國) )轉基因動物：轉基因動物：乳汁中含有人生長激素的轉乳汁中含有人生長激素的轉基因牛基因牛( (阿根廷阿根廷) )轉基因的動物生產藥物轉基因的動物生產藥物導入貯藏蛋白基因的超級羊和超級小鼠導入貯藏蛋白基因的超級羊和超級小鼠改善畜產品的品質改善畜產品的品質導入人基因具特殊用途的豬和小鼠導入人基因具特殊用途的豬和小鼠轉基因的動物作器官移植的供體轉基因的動物作器官移植的供體二、基因工程與疾病治療二、基因工程與疾病治療1 1、基因工程生產藥物、基因工程生產藥物2 2、基因治療、基因治療胰島素從豬、牛等動物的胰島素從豬、牛等動物的胰腺中提取，胰腺中提取，100Kg100Kg胰

4、腺只能胰腺只能提取提取4 45g5g的胰島素，其產量之的胰島素，其產量之低和價格之高可想而知。低和價格之高可想而知。將合成的胰島素基因將合成的胰島素基因導入大腸桿菌，每導入大腸桿菌，每2000L2000L培養液就能產生培養液就能產生100g100g胰島素！使其價格胰島素！使其價格降低了降低了30%-50%!30%-50%!胰島素胰島素通過基因工程的方式創通過基因工程的方式創造了能合成人干擾素的大腸造了能合成人干擾素的大腸桿菌，每桿菌，每1Kg1Kg的培養液可提的培養液可提取取204204mgmg干擾素。干擾素。 干擾素治療病毒感染簡直是干擾素治療病毒感染簡直是“萬能靈藥萬能靈藥”！過去從人血！

5、過去從人血中提取，中提取，300L300L血才提取血才提取1mg1mg！其其“珍貴珍貴”程度自不用多說。程度自不用多說。干擾素干擾素 干擾素是病毒侵入細胞后產生的一干擾素是病毒侵入細胞后產生的一種糖蛋白。干擾素幾乎能抵抗所有病毒引起種糖蛋白。干擾素幾乎能抵抗所有病毒引起的感染，是一種抗病毒的特效藥。此外干擾的感染，是一種抗病毒的特效藥。此外干擾素對治療某些癌癥和白血病也有一定療效。素對治療某些癌癥和白血病也有一定療效。 傳統的干擾素生產方法是從人血液傳統的干擾素生產方法是從人血液中的白細胞內提取，每中的白細胞內提取，每300L300L血液只能提取出血液只能提取出1mg1mg干擾素。干擾素。19

6、80198219801982年，科學家用基因工年，科學家用基因工程方法在大腸桿菌及酵母菌細胞內獲得了干程方法在大腸桿菌及酵母菌細胞內獲得了干擾素，是傳統的生產量的擾素，是傳統的生產量的1212萬倍。萬倍。19871987年上年上述干擾素大量投放市場。述干擾素大量投放市場。 我國第一個基因重組新藥我國第一個基因重組新藥-干擾素（安達干擾素（安達芬），安達芬具有抗病毒，抑制腫瘤細胞增生，調節芬），安達芬具有抗病毒，抑制腫瘤細胞增生，調節人體免疫功能的作用，廣泛用于病毒性疾病治療和多人體免疫功能的作用，廣泛用于病毒性疾病治療和多種腫瘤的治療，是當前國際公認的病毒性疾病治療的種腫瘤的治療，是當前國際公

7、認的病毒性疾病治療的首選藥物和腫瘤生物治療的主要藥物。首選藥物和腫瘤生物治療的主要藥物。其它基因工程藥物其它基因工程藥物人造血液、白細胞介素、乙肝疫苗等通過基因工程實人造血液、白細胞介素、乙肝疫苗等通過基因工程實現工業化生產，均為解除人類的病苦，提高人類的健現工業化生產，均為解除人類的病苦，提高人類的健康水平發揮了重大的作用。康水平發揮了重大的作用。我國生產的基因工程藥品我國生產的基因工程藥品乙肝疫苗乙肝疫苗白細胞介素白細胞介素-2-2干擾素干擾素人生長激素等人生長激素等轉基因動物的乳腺。轉基因動物的乳腺。 就基因藥物而言，最理想的表達場所是哪里？就基因藥物而言，最理想的表達場所是哪里？ 是指

8、把人或哺乳動物的某種基因導入到哺乳是指把人或哺乳動物的某種基因導入到哺乳動物動物( (如鼠、兔、羊和豬如鼠、兔、羊和豬) )的受精卵里，目的的受精卵里，目的基因若與受精卵染色體基因若與受精卵染色體DNADNA整合，細胞分裂時，整合，細胞分裂時，該基因隨染色體的倍增而倍增，使每個細胞該基因隨染色體的倍增而倍增，使每個細胞中都帶有目的基因，使性狀得以表達，并穩中都帶有目的基因，使性狀得以表達，并穩定地遺傳給后代，從而獲得基因產品。這樣定地遺傳給后代，從而獲得基因產品。這樣一種新的個體，稱為轉基因動物。一種新的個體，稱為轉基因動物。 什么叫轉基因動物？什么叫轉基因動物？ 1 1、乳腺是一個外分泌器官

9、，乳汁不進入體、乳腺是一個外分泌器官，乳汁不進入體內循環，不會影響轉基因動物本身的生理代謝內循環，不會影響轉基因動物本身的生理代謝反應。反應。 2 2、從乳汁中獲取目的基因產物，產量高，、從乳汁中獲取目的基因產物，產量高，易提純，表達的蛋白質已經過充分的修飾加工，易提純，表達的蛋白質已經過充分的修飾加工，具有穩定的生物活性。具有穩定的生物活性。 3 3、從乳汁中源源不斷獲得目的基因的產物、從乳汁中源源不斷獲得目的基因的產物的同時，轉基因動物又可無限繁殖。的同時，轉基因動物又可無限繁殖。 為什么乳腺能成為基因藥物最理想的表達場為什么乳腺能成為基因藥物最理想的表達場所呢？所呢？2 2、基因治療、基

10、因治療（1 1）概念：向目標細胞引入正常功能的基因，）概念：向目標細胞引入正常功能的基因，以糾正或補償基因的缺陷，達到治療的目的。以糾正或補償基因的缺陷，達到治療的目的。（2 2）實例：）實例：19901990年，美國年，美國 重度免疫缺陷癥的臨床基因治療重度免疫缺陷癥的臨床基因治療 1990 1990年年9 9月月1414日，安德森對一例患腺甘脫氨酶缺乏癥（日，安德森對一例患腺甘脫氨酶缺乏癥（ADAADA缺乏缺乏癥）的癥）的4 4歲女孩進行基因治療。這個歲女孩進行基因治療。這個4 4歲女孩由于遺傳基因有缺陷，歲女孩由于遺傳基因有缺陷，自身不能生產自身不能生產ADAADA，先天性免疫功能不全，

11、只能生活在無菌的隔離，先天性免疫功能不全，只能生活在無菌的隔離帳里。他們將這個女孩的白血球進行基因改造，使有缺陷的基因帳里。他們將這個女孩的白血球進行基因改造，使有缺陷的基因被健康的基因替代，然后把含正常白血球的血液輸入她左臂的一被健康的基因替代，然后把含正常白血球的血液輸入她左臂的一條靜脈血管中。在以后的條靜脈血管中。在以后的1010個月內她又接受了個月內她又接受了7 7次這樣的治療，同次這樣的治療，同時也接受酶治療。后來，她的免疫功能日趨健全，能夠走出隔離時也接受酶治療。后來，她的免疫功能日趨健全，能夠走出隔離帳，過上了正常人的生活，并進入普通小學上學。帳，過上了正常人的生活，并進入普通小

12、學上學。 ADAADA缺乏癥：一種嚴重的免疫缺陷癥缺乏癥：一種嚴重的免疫缺陷癥, ,腺苷脫氨酶的缺乏可使腺苷脫氨酶的缺乏可使T T淋巴細胞因代謝產物的累積而死亡淋巴細胞因代謝產物的累積而死亡, ,從而導致嚴重的聯合性免疫缺從而導致嚴重的聯合性免疫缺陷癥陷癥(SCID)(SCID)。通常導致嬰兒出生幾個月后死亡。通常導致嬰兒出生幾個月后死亡。ADAADA缺乏癥的基因治療缺乏癥的基因治療取患者骨髓取患者骨髓分離干細胞分離干細胞運載體病毒運載體病毒正常基因正常基因導入正常基因的干細胞導入正常基因的干細胞注入患者體內注入患者體內ADAADA缺乏癥的基因治療缺乏癥的基因治療1、基因工程物、基因工程物基因

13、工程與疾病治療基因工程與疾病治療2、基因診斷、基因診斷3、基因治療、基因治療胰島素、干擾素胰島素、干擾素 、乙肝疫苗、乙肝疫苗基因探針檢測病毒、診斷遺傳病基因探針檢測病毒、診斷遺傳病 把健康的外源基因導入有基因缺陷的細胞中，把健康的外源基因導入有基因缺陷的細胞中，達到治療疾病的目的。達到治療疾病的目的。 基因診斷：基因診斷：（1 1）概念：）概念：用放射性同位素（用放射性同位素（3232P P）、熒光分子等標）、熒光分子等標記的記的DNADNA分子做探針，利用分子做探針，利用DNADNA分子雜交原理，鑒定被分子雜交原理，鑒定被檢測標本上的遺傳信息，達到檢測疾病的目的。檢測標本上的遺傳信息，達到

14、檢測疾病的目的。（2）原理：）原理：DNA分子雜交。分子雜交。（3 3）DNADNA探針：探針：概念：概念：用已知序列的用已知序列的DNADNA片段作為探針與待測樣品片段作為探針與待測樣品的的DNADNA序列進行核酸分子雜交，用于對待測核酸樣品序列進行核酸分子雜交，用于對待測核酸樣品中特定基因順序的探測。中特定基因順序的探測。 DNADNA探針的必備條件：探針的必備條件：A A、必須是單鏈；、必須是單鏈；B B、帶有容易被檢測出來的標記物。、帶有容易被檢測出來的標記物。（5）實例：實例：病毒的檢測：病毒的檢測：肝炎病毒、腸道病毒、單純孢疹肝炎病毒、腸道病毒、單純孢疹病毒等；病毒等； 遺傳性疾病

15、的檢測：遺傳性疾病的檢測：鐮刀型細胞貧血癥、苯丙酮鐮刀型細胞貧血癥、苯丙酮尿癥等；尿癥等；A A、制作基因探針；、制作基因探針；（4）基因診斷的過程基因診斷的過程B B、將待測基因加熱成單鏈；、將待測基因加熱成單鏈；C C、兩者混合雜交。、兩者混合雜交。 DNA分子雜交原理：分子雜交原理：互補的互補的DNADNA單鏈能夠在一定條件下結合成雙鏈，單鏈能夠在一定條件下結合成雙鏈，即能夠進行雜交。這種結合是特異的，即嚴格即能夠進行雜交。這種結合是特異的，即嚴格按照堿基互補配對進行。因此，當用一段已知按照堿基互補配對進行。因此，當用一段已知基因的核苷酸序列作為探針，與被測基因進行基因的核苷酸序列作為探

16、針，與被測基因進行接觸，若兩者的堿基完全配對成雙鏈，則表明接觸，若兩者的堿基完全配對成雙鏈，則表明被測基因中含有已知的基因序列。被測基因中含有已知的基因序列。異常基因異常基因作探針作探針點雜交點雜交正常基因正常基因 作探針作探針點雜交點雜交正常人正常人 患者患者 DNA DNA DNADNA正常人正常人 患者患者 DNA DNA DNADNA1 1、制作基因探針、制作基因探針2 2、將待測基因加、將待測基因加熱成單鏈熱成單鏈3 3、兩者混合雜交、兩者混合雜交應用：應用：基因診斷基因診斷生物芯片生物芯片 從正常人的基因組中分離出從正常人的基因組中分離出DNADNA，與，與DNADNA芯片雜交就可

17、以得芯片雜交就可以得出出標準圖譜標準圖譜；從病人的基因組中分離出；從病人的基因組中分離出DNADNA與與DNADNA芯片雜交就可芯片雜交就可以得出以得出病變圖譜病變圖譜。通過比較、分析這兩種圖譜，就可以得出病。通過比較、分析這兩種圖譜，就可以得出病變的變的DNADNA信息。基因芯片診斷技術以其快速、高效、敏感、經信息。基因芯片診斷技術以其快速、高效、敏感、經濟、平行化、自動化等特點，將成為一項現代化診斷新技術。濟、平行化、自動化等特點，將成為一項現代化診斷新技術。 體外核酸擴增技術。體外核酸擴增技術。 優點：優點：具有特異、敏感、產率高、具有特異、敏感、產率高、 快速、簡便、快速、簡便、重復性好、易自動化等；重復性好、易自動化等； 能在一個試管內將所要研究的目的基因或某一能在一個試管內將所要研究的目的基因或某一DNADNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍, ,使肉能使肉能直接觀察和判斷；直接觀察和判斷； 可從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增可從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的出足量的DN