1、雞胚成纖維細(xì)胞膜上禽流感病毒雞胚成纖維細(xì)胞膜上禽流感病毒受體蛋白的鑒定受體蛋白的鑒定指點(diǎn)教師：指點(diǎn)教師： 某某某某某某 副教授副教授本本 科科 生：生： 某某某某某某專專 業(yè)：業(yè)： 動(dòng)物醫(yī)學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué) 匯匯 報(bào)報(bào) 內(nèi)內(nèi) 容容v一一 研討目的與意義研討目的與意義v二二 實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù)實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù)v三三 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論一、研討目的與意義一、研討目的與意義v1、禽流感概述、禽流感概述v HA+Sialic acid Gal - GlcNAc-Host cellHost cell一、研討目的與意義一、研討目的與意義v2、研討禽流感病毒受體的意義、研討禽流感病毒受體的意義v 二、實(shí)驗(yàn)方法與

2、技術(shù)二、實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù)方法與技術(shù)方法與技術(shù)一、一、CEF的培育的培育取材取材分別分別純化純化培育培育二、病毒的增殖二、病毒的增殖 方法與技術(shù)方法與技術(shù)接種病毒接種病毒回收尿囊液回收尿囊液純化分裝純化分裝方法與技術(shù)方法與技術(shù)三、膜蛋白提取三、膜蛋白提取方法與技術(shù)方法與技術(shù)四、四、VOPBA分析分析 利用利用VOPBA方法對(duì)已提取的方法對(duì)已提取的CEF細(xì)胞膜蛋細(xì)胞膜蛋白進(jìn)展鑒定。詳細(xì)操作如下圖：白進(jìn)展鑒定。詳細(xì)操作如下圖：SDS-PAGE電泳電泳蛋白轉(zhuǎn)印蛋白轉(zhuǎn)印麗春紅染色麗春紅染色病毒疊加病毒疊加封鎖封鎖PVDF膜膜抗體孵育抗體孵育DAB顯色鑒定顯色鑒定結(jié)果結(jié)果三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論

3、1、SDS-PAGE電泳結(jié)果電泳結(jié)果 泳道泳道1，2：雞胚成纖維細(xì)胞膜蛋白；：雞胚成纖維細(xì)胞膜蛋白；泳道泳道M：蛋白預(yù)染：蛋白預(yù)染Marker 1 2 MkD832516.532.56247.51752、VOPBA結(jié)果結(jié)果 雞胚成纖維細(xì)胞膜上禽流感病毒疑似受體條帶雞胚成纖維細(xì)胞膜上禽流感病毒疑似受體條帶 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論16.5 25 32.547.58317562 M 1 2 3R1R2R5R6R3R4R8R73、結(jié)論、結(jié)論 本次實(shí)驗(yàn)勝利得到了本次實(shí)驗(yàn)勝利得到了 條疑似禽流感受體的條疑似禽流感受體的蛋白條帶，初步鑒定了在蛋白條帶，初步鑒定了在CEF膜上的禽流感膜上的禽流感病毒受體，為進(jìn)一步研討打下了根底。病毒受體，為進(jìn)一步研討打下了根底。 由于方法的局限性，所得到了蛋白條帶還由于方法的局限性，所得到了蛋白條帶還需進(jìn)一步分別純化，才干確以為禽流感