1、醫學形態學實驗課程教學大綱山東大學醫學院醫學形態學實驗課程教學大綱課程名稱：醫學形態學實驗英文名稱：MedicalmorphologicalExperiment課程編實驗課性質：融合創新性實驗課程負責人：開放實驗項目數：8大綱主撰人：武玉玲、張慶慧、郝晶等人大綱審核人：一、學時、學分課程總學時：32實驗學時：32課程總學分：實驗學分：二、適用專業及年級供基礎、臨床醫學、預防、口腔醫學、護理學5、6、7年制專業用三、實驗教學目的與基本要求通過醫學形態學融合性實驗教學，將人體解剖學、組織胚胎學和病理解剖學三個相關學科的交叉內容進行有機整合，形成系統化的知識。通過創新實驗的學習，使學生學會使用醫學形

2、態學實驗常用的儀器，熟悉科研常用的技術方法，培養學生動手能力、提高學生利用所學知識解決實際問題的能力，啟迪學生的科研思維和創新精神，以適應研究型大學培養人才的要求。四、主要儀器設備1.動物：Wistar大鼠，昆明小鼠2.儀器設備：顯微圖像觀察系統、恒溫培養箱，手術器械、微量注射器、常用染料。五、實驗課程內容和學時分配序號實驗項目名稱實驗內容學時分配實驗要求指導教師已開/未開1淋巴系統的組成1.第1、2趾蹊間隙之下注射0.2mlPatentblue,10分鐘后在月國窩及腹股溝處切開皮膚，尋找藍染的淋巴管及淋巴結（可追蹤至腹膜后隙）。觀察淋巴管及淋巴結的形態和分布。2 .將一段小腸系膜平鋪于透明的

3、載物臺上，用顯微圖像觀察系統觀察小腸系膜內淋巴管的運動。注意尋找淋巴管的瓣膜。3 .小腸漿所注射適量Patentblue。觀察淋巴管的吸收功能及引流。4 .追蹤腹膜后隙染色的淋巴結。5 .在腹股溝處結扎、切斷腹股溝淋巴結和淋巴管，造成淋巴引流障礙，觀察淋巴淤滯和淋巴水腫的形成。6 .觀察淋巴引流注射標本，淋巴結和淋巴管組織切片。總結淋巴系統的組成和功能。4分小組進行丁兆習未開2脊髓半切損傷的手術試驗觀察1、將Wista大鼠麻醉固定于手術臺。2、切開背部皮膚，暴露脊柱，打開椎管，剪斷T脊髓。3、縫合背部肌及皮膚。4、待大鼠清醒后，觀察大鼠損傷后的臨床表現。5、討論并寫出試驗4分小組進行邢子英未開

4、3肥大細胞的制作與觀察1 .肥大細胞的制作與觀察：取健康大鼠一只，脫臼處死。隨后剪取皮下組織，平鋪置于載玻片上。用95%乙醇溶液固定、甲苯胺藍染色，最后樹膠封片。鐐下觀察肥大細胞形態、顆粒染色特點及肥大細胞走形分布特點。2 .大鼠I型超敏反應動物模型的建立取馬血清用生理鹽水按一定的比例稀釋，然后給大鼠腹腔注射進行被動致敏。致敏后14日再用馬血清進行腹腔注射進行大鼠致敏實驗。隨后剪取皮下組織，觀察肥大細胞脫顆粒情況。4分小組進行張艷敏未開4小鼠活精子標本的制作與精1 .活精于標本的制備與觀察取育齡期雄鼠附睪，將其剪成小塊，制作小鼠活精子懸液。將懸液滴于載玻片上，低倍鏡觀察精子的活動情況。另取精子

5、懸液涂片，用0.3%甲苯胺藍液染色，光鏡觀察精子的形態結構。2 .體外抑精子實驗實驗分組：（1）實驗組：在37恒溫條件下，取50M精子懸液與等量一定濃度的抑精子藥液充分混合，分別于混合后30sec、5min、10min和30min時，取一滴混合液清于載玻片上，顯微值T計數10個視野，記錄活動精子百分率（或用伊紅染料染色，計算精子存活率）。（2）對照組：取50M精子懸液與等量生理鹽水混合，其余操作方法同上。比較在處理后不同時間內兩組活動精子的百分率。同時，分別取處理10min分4分小組武玉玲未開進子低滲月中鐘后的實驗組及對照組的精子行脹試驗懸液，以10001500r/min離心5min,棄上精液

6、，取沉淀于管底的精子涂片，用0.3%甲苯胺藍液染色，光鏡觀察兩5小鼠體外受精實驗1 .精子獲能實驗取12-16周齡ICR雄鼠的附睪尾放在石蠟油中，用眼科剪在其頂端剪一小口，然后用眼科鐐子擠壓附睪尾部精子，將其挑到200ul平衡過夜的HTF受精獲能液滴中，置于37C、5%CO2飽和濕度條件下培養ih使精亍獲能，顯微鐐r觀察精亍的形態和運動。2 .超排卵及收集卵細胞：取6-8周齡ICR雌鼠，腹腔注射7.5IU/只PMSG,間隔48h后再注射7.5IU/只HCG進行超排處理（實驗老師課前準備）。注射HCG14h后，頸椎脫臼處死雌鼠，取出輸卵管在濾紙上除去血跡，放入培養皿中，用解剖針刺破輸卵管的膨大部

7、，將流出的卵子團引入到HTF培養液滴中，顯微鏡卜觀察卵丘復合體的形態。3 .觀察受精過程：在卵子HTF培養液滴中，加入51Oul獲能精子（200個精子/u1）,顯微鏡卜觀察精子向卵細胞周圍集聚。放入CO2培養箱培養。4 .觀察精、卵原核：精卵共同孵育12-16h后,將受精卵移至玻片上（多聚賴氨酸預處理），空氣干燥5min,向玻片上滴加數滴甲醇-冰醋酸溶液（3:1）室溫（25C）卜固定5min,滴加1%美藍染色液室溫5min,水洗，90%、95%和純酒精脫水各2分鐘，二甲苯透明，樹膠封片，高倍顯微鐐下觀察受精卵的卵原核和精原核。4分小組進行郝晶未開6結締組織增生與肝硬化1 .肉眼及鐐下觀察正常肝

8、臟的大體形態特點及正常組織結構。2 .鐐下觀察固有結締組織的形態特點。3 .肉眼及鏡卜觀察肝硬化的標本及病理切片，對照肝臟正常結構找出肝硬化的病理組織學特點。4 .互動式討論：肝臟結構與功能的關系，固有結締組織的功能以及在創傷愈合中的作用，結締組織增生與肝硬化的關系，肝硬化時肝臟多種功能降低的結構基礎以及如何防止肝硬化的發生。4分小組進行張慶慧，甄軍暉未開7巨噬細胞與矽肺、塵肺的發生1 .肉眼觀察矽肺、塵肺的病理標本；2 .顯微鏡觀察活體染色的疏松結締組織鋪片，重點觀察吞噬了染料顆粒的巨噬細胞，成纖維細胞和膠原纖維；3 .顯微鏡觀察正常肺切片，熟悉肺組織的正常結構，觀察肺問質中的塵細胞；4 .

9、顯微鏡觀察矽肺、塵肺的病理切片，匕止常肺切片對照比較，以理解巨噬細胞與矽肺、塵肺發病的關系；5 .學生自己動手，給小鼠腹腔注射或W注射臺盼藍，2小時后取腹腔液制作涂片，或取皮卜組織制作鋪片，伊紅染色，顯微鏡觀察吞噬了染料顆粒的巨噬細胞；6 .教師和學生互動式討論巨噬細胞的形態結構和生理功能，矽肺、塵肺的病理過程，巨噬細胞與矽肺、塵肺病理過程的相關關系，吸煙的危害；7 .教師和學生互動式討論巨噬細胞在特異性免疫和非特異性免疫中的作用，討論巨噬細胞在矽肺、塵肺、結核病、動脈粥樣硬化等疾病發生、發展和歸宿中的意義；4分小組進行甄軍暉未開8肺組織結構特點與急性肺淤血、肺水月中的觀察1. 取大鼠稱重。一組腹腔注射腎上腺素22.5mg/kg體重，另一組腹腔注射相同量的生理鹽水做對照，注射后觀察記錄兩只大鼠的一般情況和呼吸等臨床表現。15min20min后處死動物（注意結扎氣管以免液體外溢），取出肺和心臟。2. 用濾紙吸去肺表面的液體，用天平稱兩肺的重量，計算肺重系數（肺重量g/體重kg*100%）,若肺重系數1%,比較兩組大鼠的肺重余數。若肺重系數1%,表明肺水月中已形成。3. 對比觀察2組大鼠肺的外觀，記錄包括人小、顏色、質地、及切向外觀，將2組大鼠的肺臟用10%的甲醛固定。4. 鏡卜觀察對比和