1、實驗三、反射弧分析與反射時測定實驗目的 1、通過對脊蛙的屈肌反射的分析，探討反射弧的完整性與反射活動的關系； 2、學習掌握反射時的測定方法，了解刺激強度和反射時的關系； 3、以蛙的屈肌反射為指標，觀察脊髓反射中樞活動的某些基本特征，并分析它們產生可能的神經機制。 實驗原理 反射活動的結構基礎是反射弧。典型的反射弧由感受器、傳入神經、神經中樞、傳出神經和效應器五個部分組成。 引起反射的首要條件是反射弧必須保持完整性。反射弧任何一個環節的解剖結構或生理完整性一旦受到破壞，反射活動就無法實現。 完成一個反射所需要的時間稱為反射時。動物和器材 蟾蜍或蛙， 硫酸溶液（0.1%、0.3%、0.5%、1%）

2、、 1%可卡因或普魯卡因 蛙類手術器械、鐵支柱、玻璃平皿、燒杯（500 ml 或搪瓷杯）、小濾紙(約 1 cm1 cm)、秒表、紗布。 實驗方法與步驟 標本制備： 取一只蟾蜍，毀腦制成脊蟾蜍。將動物俯臥位固定在蛙板上，于右側大腿背部縱行剪開皮膚，在股二頭肌和半膜肌之間的溝內找到坐骨神經干，在神經干下穿一條細線備用。將脊蟾蜍懸掛在鐵架臺上。 3、反射弧的分析： （1） 用手術剪自右后肢最長趾基部環切皮膚，然后用手術鑷剝凈該趾上的皮膚，用硫酸刺激去皮的該趾，記錄結果；（2）改換右后肢有皮膚的其它趾，將其浸入硫酸溶液中，記錄結果；（3） 取一浸有1%硫酸溶液的濾紙片，貼于蟾蜍右側背部或腹部，記錄結果

3、；（4） 用一細棉條包住分離出的坐骨神經，在細棉條上滴幾滴2%普魯卡因溶液后，每隔2分鐘重復步驟（2），記錄加藥時間，至屈反射消失，并記錄時間。當屈反射剛不能出現時，立即重復步驟（3），每隔2分鐘重復一次步驟（3），直至搔扒反射不再出現為止，記錄時間。*記錄從加藥至屈反射消失的時間及加藥至搔扒反射消失的時間。（5）將左后肢最長趾再次0.5%硫酸溶液中，記錄反射時有無變化。毀壞脊髓后再重復實驗，記錄結果。搔扒反射（脊蛙反射） 是一種非條件反射 把一只青蛙只損壞蛙的大腦，保留完整的脊髓，用沾了低濃度硫酸的紙片涂抹青蛙腹部的皮膚，蛙受到刺激后會用后肢去撓被涂抹的部位。這是由于它的脊髓里也有神經中樞，

4、可以做出反應。 這一反射的全過程為當青蛙的皮膚受酸液刺激后，皮膚上感受器產生神經沖動，沿傳入神經（坐骨神經）傳入脊髓。經脊髓處理后沿傳出神經（坐骨神經）坐骨神經為混合神經,傳至效應器后肢骨胳肌，于是骨胳肌收縮使青蛙發生屈腿反射。步驟分析 （1） 用手術剪自右后肢最長趾基部環切皮膚，然后用手術鑷剝凈該趾上的皮膚，用硫酸刺激去皮的該趾，記錄結果（2）改換右后肢有皮膚的其它趾，將其浸入硫酸溶液中，記錄結果： 蛙的皮膚為騷扒反應反射弧中的感受器。 將蛙的右足底皮膚剝去，分別刺激兩只后足的足底，可見左后肢出現搔扒反射而右后肢不動。說明搔扒反射的感受器存在于皮膚。去掉皮膚，沒有了產生神經沖動的感受器，因而

5、不會出現反射。步驟分析 （3） 取一浸有1%硫酸溶液的濾紙片，貼于蟾蜍右側背部或腹部，記錄結果: 由于刺激了蛙右側背部的部分，可見右腿出現搔扒反射，說明坐骨神經中有分布到右腿的傳出神經的成份。步驟分析 （4） 用一細棉條包住分離出的坐骨神經，在細棉條上滴幾滴2%普魯卡因溶液后，每隔2分鐘重復步驟（2），記錄加藥時間，至屈反射消失，并記錄時間。當屈反射剛不能出現時，立即重復步驟（3），每隔2分鐘重復一次步驟（3），直至搔扒反射不再出現為止，記錄時間。*記錄從加藥至屈反射消失的時間及加藥至搔扒反射消失的時間：在分離出的坐骨神經處滴加普魯卡因溶液，傳入神經先逐漸被麻痹，刺激右腳趾慢慢失去反應。而刺激

6、右側背部右還有屈腿現象，此時傳出神經還未被麻痹。而隨時間延長繼續添加普魯卡因，重復刺激背部不再出現騷扒反應，此時傳出神經也被麻痹了。從而證明了坐骨神經是傳入和傳出神經，為反射弧的組成部分。普魯卡因溶液 普魯卡因毒性較小，是常用的局麻藥之一。一般不用于表面麻醉，常局部注射用于浸潤麻醉、傳導麻醉、蛛網膜下腔麻醉和硬膜外麻醉。注射給藥后1-3min起效，可維持30-45min。 此實驗中，在坐骨神經處滴加魯普卡因，阻斷坐骨神經中神經纖維的傳導。此外，坐骨神經為復合神經，傳入神經的纖維為細的無髓纖維，藥物滲入快，而傳出神經為粗的有髓纖維，藥物滲入慢。因此傳入神經先被麻醉，而傳出神經后被麻醉。步驟分析 （5）將左后肢最長趾再次0.5%硫酸溶液中，記錄反射時有無變化。毀壞脊髓后再重復實驗，記錄結果： 由于左后肢反射結構完好，因此再刺激反射時間無明顯變化。而毀壞脊髓之后，在對腳趾進行刺激，不起任何作用。因為神經中樞被損壞，反射弧不完整，騷扒反射同樣無法完成。 從而證明了脊髓為神