1、HPLC法同時測定復方萘酚喹片中磷酸萘酚喹和甲氧芐啶的含量摘要 目的：建立同時測定復方萘酚喹片中磷酸萘酚喹和甲氧芐啶含量的方法。方法：高效液相色譜法。固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相為乙腈-0.25%二乙胺（30 : 70,混合后用磷酸調 pH 至 2.5）;檢測波長 271 nm 結果：線 性范圍：磷酸萘酚喹 75.9227.8 卩 g/ml,r=0.9999，甲氧芐啶 26.780.2 卩 g/ml,r=0.9999 ;方法回收率：磷酸萘酚喹 100.5%,RSD 0.3%,n=6,甲氧 芐啶99.7%,RSD 0.7%,n=6。結論：該方法操作簡便，結果準確，適用于該制劑 的含量測定

2、。關鍵詞 HPLC 復方萘酚喹片；磷酸萘酚喹；甲氧芐啶Simulta neos determ in ati on of n aphthoq uine phosphate andtrimethoprim in compo und n aphthoq uine tabletsZhang Yuying(Zhang YY) , Pan Xiqiang(Pan XQ)(Gua ngzhou In stitute for Drug Con trol,Gua ngzhou 510160)ABSTRACT OBJECTIVE To establish the HPLC method for simulta n

3、eos determ inati on of n aphthoq uine phosphate and trimethoprim in compo und naphthoqui netablets.METHODS:The HPLC method was developed un der the followi ng con ditions:colu mn ,Ci8,the mobile phase was acet on itrile-0.25% diethylamine(30: 70,pH 2.5 adjusted with phosphoric acid),thewavele ngth o

4、f the UV detector was set at 271 nm .RESULTS:The lin ear range was75.9 227.8 卩 g/ml,r=0.9999(naphthoquine phosphate) or 26.7 80.2 卩g/ml,r=0.9999(trimethoprim).The recovery was 100.5%,RSD 0.3%, n=6( naphthoquine phosphate) or 99.7%,RSD0.7%, n=6(trimethoprim).CONCLUSION:The method was simple,accurate

5、andsuitable for qua ntitati on an alysis of the preparati on.KEY WORDSHPLC,compou nd naphthoqui ne tablets, naphthoqu inephosphate,trimethoprim復方萘酚喹片是新研制的抗瘧藥，有效成分有磷酸萘酚喹和甲氧芐啶等。前者的含量測定有非水滴定法：1，但未見有 HPLC 法的報道；后者的含量測定 有 HPLC 法|24：和非水滴定法等。本文采用的 HPLC 法，可同時測定兩者的含 量，方法簡便，定量準確，可用于該制劑的含量測定。1 儀器與試藥1.1儀器島津 LC-1

6、0AD 高效液相色譜儀，SPD-10A 紫外檢測器，C-R4A 數據處理機1.2試藥復方萘酚喹片及輔料（廣州某研究單位提供）；磷酸萘酚喹對照品含量99.0%（上海第六制藥廠，960405），甲氧芐啶含量 100.0%（廣東制藥廠，970402） ;乙腈為色譜純，二乙胺和磷酸為分析純，水為超純水。2 方法與結果2.1色譜條件固定相：十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相：乙腈 -0.25%二乙胺（30 : 70,混 合后用磷酸調 pH 至 2.5）;流速：1.0ml/min ;檢測波長 271 nm 進樣量： 20 卩 l。在此色譜條件下，得色譜見 1。1 HPLCfe譜1-甲氧芐啶；2-磷酸萘酚喹2.2

7、線性關系取經 105C干燥至恒重的磷酸萘酚喹對照品和甲氧芐啶對照品適量，用流動相制成含磷酸萘酚喹 75.9，106.3，151.8，182.2 和 227.8 卩 g/ml 及含甲氧 芐啶26.7，37.4，53.4，64.1 和 80.2 卩 g/ml 的溶液，取 20 卩 l 注入液相色譜 儀，記錄色譜，以峰面積對濃度進行線性回歸，得線性回歸方程：磷酸萘酚喹:丫=8.32X10乂1.21X104，r=0.9999（n=5），線性范圍:75.9 227.8 卩 g/ml。甲氧芐啶：Y=1.38X104X-4.43X103，r=0.9999（n=5），線性范圍：26.7 80.2 卩 g/ml

8、。2.3 回收率試驗2.3.1對照品溶液的制備取經 105C干燥至恒重的甲氧芐啶對照品約10mg和磷酸萘酚喹對照品約 30mg 精密稱定，置 200ml 量瓶中，加流動相適量，超 聲振蕩使溶解，放冷至室溫，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。2.3.2回收溶液的制備 取經 105C干燥至恒重的甲氧芐啶對照品約 8，10 和 12mg和磷酸萘酚喹對照品約 24，30 和 36mg 精密稱定，置 200ml 量瓶中，按處 方配比，加入輔料，加流動相適量，置超聲波浴中振蕩 30 分鐘，取出放冷至室 溫，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為回收溶液。2.3.3測定法 精密量取對照品溶液和

9、回收溶液各 20 卩 l，分別注入液相色譜 儀，記錄色譜，按外標法以峰面積計算甲氧芐啶和磷酸萘酚喹的回收率，結果見表 1,平均回收率分別為 99.7%,RSD 0.7%, n=6 和 100.5%,RSD 0.3%, n=6。表 1 回收率試驗結果編號甲氧芐啶磷酸萘酚喹投入量/mg測得量/mg 回收率/% 投入量/mg 測得量/mg回收率/%18.068.0399.624.0224.24100.928.328.33100.124.3924.43100.2310.5710.5099.330.1230.36100.8410.8810.97100.830.0630.18100.4512.4412.2

10、898.736.7536.84100.2612.8512.7999.536.2436.35100.32.4 樣品測定取本品 20 片，精密稱定，研細，精密稱取細粉適量（約相當于甲氧芐啶10mg）,置 200ml 量瓶中，加流動相適量，置超聲波浴中振蕩30min,取出放冷至室溫，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為樣品溶液。精密量 取對照品溶液（同 2.3.1）和樣品溶液各 20 卩 l，同 2.3.3 項下方法測定并計算含 量，結果見表 2。表 2 樣品含量測定結果/相當標示量的%批號甲氧芐啶磷酸奈酚喹970326 97.396.7101.3100.6970327 95.895.999

11、.499.0970616 95.295.098.499.42.5 精密度試驗 取同一樣品溶液，連續進樣 6 次，記錄甲氧芐啶和磷酸萘酚 喹的峰面積，計算 RSD 分別為 0.6%和 0.7%（n=6）。3 討論3.1波長的確定 取磷酸萘酚喹和甲氧芐啶對照品適量，用流動相制成適當濃度的溶液，在 400200nm 波長范圍分別掃描紫外吸收光譜，甲氧芐啶在271 nm波長處有最大吸收，而磷酸萘酚喹在此波長處為接近峰谷，考慮到復方制劑中 磷酸萘酚喹的標示量是甲氧芐啶的 3 倍，為協調兩者的吸收，選擇 271 nm 作為 檢測波長。3.2流動相的選擇參考甲氧芐啶的HPLC測定方法:24：， 經調整并篩選

12、出乙 腈-0.25%二乙胺（30 : 70,混合后用磷酸調 pH 至 2.5）為流動相，效果較佳。3.3色譜柱的比較試驗了兩種牌號的色譜柱（YWG C 10 卩 m 250X4.6mm 和EC150/4.6 Nucleosil 100-5 C偲），柱效見表 3。表 3 不同牌號色譜柱的柱效比較色譜柱參數(I)YWG C810 卩 m250X4.6mm(n)EC150/4.6 Nucleosil100-5 C18I NRTNRT甲氧芐啶46575.41.638426.71.8磷酸奈酚喹22095.42.733656.72.2從柱效比較來看，色譜柱(n)優于色譜柱(I)，但前者為原裝進口高效 柱，

13、其應用尚不廣泛。張玉英(廣州市藥品檢驗所 廣州 510160) 潘錫強(廣州市藥品檢驗所 廣州 510160)參考文獻1, 衛生部藥品標準.WS-84(X-67)-93.2,全紅， 董燕.高效液相色譜法測定增效聯磺片中三組分的含量.山西預防醫學 雜志，1997，6(2) : 128.3，Men ally V,Le nehanKelly MT,et al.High-performa nee liquid- chromatographicdeterm in ati on of trimethoprim and sulphadiaz ine in medicated fish feedstoek.AnalLett,1990,23(12): 2215.4， Alvinerie M,Sutra JF,Galt