1、抗中性粒細胞胞漿抗體（抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）的檢測與應用的檢測與應用李云紅李云紅血管炎 簡介簡介 血管炎是血管壁及血管周圍有炎癥細胞浸潤，并伴有血管損傷，包括纖維素沉積、膠原纖維變性、內皮細胞及肌細胞壞死的炎癥，又稱脈管炎。 致病因素直接作用于血管壁引起者為原發性血管炎，在血管炎癥基礎上產生一定的臨床癥狀和體征者為血管炎疾病;由鄰近組織炎癥病變波及血管壁引起者為繼發性血管炎，只是多種組織的病理改變之一，與血管炎疾病不同。病癥特征病癥特征n1、肺部 n2、 n3、肝臟 n4、心血管： n5、神經系統：n6、鼻咽部：n7、皮膚： 病理病因病理病因 n血清病n藥物變態反應及感染n乙型肝炎病

2、毒n中華巨細胞病毒n單純皰疹病毒n成人T細胞白血病病毒病理分類病理分類 n變應性白細胞破碎性(壞死性)血管炎：n結節性多動脈炎：n血栓形成性血管炎：n肉芽腫性血管炎n淋巴細胞性血管炎：n結節性血管炎n血液成分異常性血管炎：臨床表現臨床表現 n1、主要表現有： 多系統損害； n 活動性腎小球腎炎； n 缺血性或瘀血性癥狀和體征，特別見于年輕人； n 隆起性癜及其他結節性壞死性皮疹； n 多發性單神經炎及不明原因的發熱。組織活檢對本病有診斷意義，其他檢查有血管造影檢查、自身抗體檢查等。 2、皮膚型變應性血管炎；紅斑、結節、紫癜、風團、血皰、丘疹、壞死、潰瘍、 膿皰3、系統型變應性血管炎；多臟器受累

3、 頭痛、發熱、乏力、關節及肌肉疼痛 粘膜:鼻衄、咯血、便血、 腎：蛋白尿、血尿 腸道；腹痛、脂肪痢、急性膽囊炎、胰腺炎、糖尿病 胸；胸腔積液 神經系統；腦血栓、癱瘓 心臟；心肌梗死、心包炎 眼部治療流程治療流程 n 去除病因，消除過敏原; n 治療基礎疾病 n 局限于皮膚的血管炎，常用抗組胺類藥，如氯苯那敏苯茚胺，吲哚美辛(消炎痛)、布洛芬 n 全身性血管炎可用潑尼松，或加用環磷酰胺; n 抗血小松聚集劑可用阿司匹林，硝苯地平或硝酸異山梨醇(消心痛) 飲食保健飲食保健 n 1、丹參酒：n2、赤豆煮米仁：n3、黃豆冬瓜皮湯：n4、赤豆桃仁蓮藕湯：n5、桑椹湯：注意事項注意事項 n 1、一個雞蛋每

4、天最多一個 n2、牛奶最多半斤 n3、綠色蔬菜多吃 n4、海帶、紫菜、木耳多食 n5、豆制品+粗糧多吃 n6、精神要放松、不要每天都想著自己的病患 n7、要適當活動與人交流 n8、絕對不能抽煙、喝酒、低鹽飲食為好。 ANCA簡介 抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）： ANCA是一組以人中性粒細胞胞漿成分為靶抗原，與臨床多種小血管炎疾病密切相關的自身抗體,是系統性血管炎的標志性抗體。除了系統性壞死性血管炎，ANCA也可見于慢性炎性腸病和自身免疫性肝炎。常采用間接免疫熒光法檢測ANCA。cANCA pANCA主要的ANCA有三型：胞漿型（cytoplasmic,cANCA）和核周型（peripher

5、al,pANCA） ，非典型ANCA（a ANCA ）cANCA針對的靶抗原為蛋白酶3（proteinase 3.PR3）,為中性粒細胞嗜天青顆粒的主要成分，能水解彈性蛋白酶、IV型膠原纖維等多種組織成分。pANCA針對的靶抗原為髓過氧化物酶（MPO），為中性粒細胞嗜天青顆粒的另一主要成分。pANCA的靶抗原還有：殺傷/膜通透性增高蛋白(BPI)、人類白細胞彈性蛋白酶（HLE）、乳鐵蛋白（LF）、組織蛋白G（cathepsin G,CG）等。PR3 和 MPOPR3和抗MPO抗體在參與小血管炎的發病過程中起重要作用，它們可激活中性粒細胞導致脫顆粒反應，使大量的蛋白水解酶活化，作用于小血管壁，并

6、在其他免疫炎性介質的協同作用下，造成血管炎癥。間接免疫熒光法測定ANCAn原理n檢測ANCA的經典方法為間接免疫熒光法，這是一種初篩試驗。抗原片是用葡萄糖自健康人血清中分離出嗜中性粒細胞，按每高倍鏡視野10-20個細胞滴片制成，干燥后用甲醛或95%乙醇固定。依次向細胞片上滴加待測血清和熒光素標記抗人IgG抗體，再用熒光顯微鏡檢查。結果判定n胞漿型（cytoplasmic,cANCA）是在整個細胞質中均勻分布由粗到細的顆粒型熒光，在細胞核葉間的熒光著染加深而核本身不著染。n核周型（peripheral,pANCA）是圍繞在核周圍出現平滑的絲帶狀熒光，細胞核為陰性。臨床意義 ncANCA陽性主要見

7、于韋格納肉芽腫（WG）以及全身性血管炎，特異性97%,敏感性在初發非活動期患者為50%,活動期患者可達100%。npANCA多見于顯微鏡下多血管炎、變態反應性肉芽腫性脈管炎、壞死性新月體型腎小球腎炎等。線性免疫分析法檢測ANCAn實驗原理n本試劑盒應用線性免疫分析法（LIA），將抗原印跡于硝化纖維膜上。n 包被抗原 特性n PR3 天然的n MPO 天然的n GBM 天然的n封閉纖維膜阻止非特異反應區發生反應。檢測時，膜條與稀釋的病人血清共同孵育使血清中的抗體與膜條上的抗原結合。利用辣根過氧化物酶標記抗人IgG二抗檢測此結合抗體。加入底物后，此結合抗體表現為可見的藍色條帶，終止反應后為棕色。將

8、實驗結果與試劑盒提供的LIA特異判讀卡比較，可判斷病人的自身抗體特性。臨床意義n1.蛋白酶3（proteinase 3.PR3）,為中性粒細胞嗜天青顆粒的主要成分，是cANCA的主要靶抗原。 PR3在WG肉芽腫患者陽性率為85%，。該抗體水平與疾病活動性密切相關。常用作判斷療效和疾病復發的評估指標。n2.髓過氧化物酶（MPO） 是pANCA的主要靶抗原，MPO的陽性率在壞死性新月體型腎小球腎炎為65%，變應性肉芽腫性脈管炎為60%，而在WG肉芽腫患者陽性率僅10%。此抗體水平也與病情活動性相關，可用于療效及預后判斷n3.抗GBM抗體 抗GBM抗體 （抗腎小球基底膜抗體）可在大約90%的Good

9、pasture（肺出血腎炎）綜合癥病人中查到。盡管抗Goodpasture綜合癥發病率低（0.5%的腎臟病人），但該病會快速發展，如果不予治療死亡率達75-90%。早期診斷和及時準確的治療大大降低了死亡率。ANCA的臨床應用 ANCA被認為是原發性小血管炎的特異性血清標志物。ANCA檢測是原發性小血管炎患者的診斷、療效觀察、病情活動和復發的一項重要指標。許多研究已經證明，原發性小血管炎患者血清中ANCA的效價與疾病活動性相關，ANCA效價的增高或持續增高，提示病情惡化或緩解后再發。ANCA的效價升高往往出現在疾病復發之前，故對ANCA的動態監測對預測疾病復發具有重要意義。ANCA的臨床應用的臨床應用最常見的疾病如韋格納肉芽腫（WG）、原發性局灶節段壞死性腎小球腎炎（NCGN）、結節性多動脈炎（PAN）等均可檢出ANCA。WG的cANCA陽性率可高達90%，抗PR3抗體是診斷WG的特異性指標。在壞死性或新月型腎小球腎炎患者，ANCA的陽性率可達80%，pANCA對應的特異性抗原主要為MPO