1、主講：張舒婷第十章 藥物分析教研室藥物分析教研室環狀丙二酰脲類化合物環狀丙二酰脲類化合物一般為5,5-二取代，少數為1,5,5-三取代( (一一) )基本結構基本結構CCCONONC OR1R2R3561234HH典型藥物CCCONONC OH5C2H5C2HH巴比妥CCCONONC OH5C2HH苯巴比妥(Phenylbarbital)(barbital)CCCONONC ONaCH2CHCH2CHCH3C3H7H司可巴比妥鈉(Secobarbital)CNHCNHCOOOH5C2CH3(CH2)2CHCH3戊巴比妥(Pentobarbital)硫噴妥鈉HCCCONONCSNaC2H5CH3

2、CH2CH2CHCH3 巴比妥類藥物是環狀酰脲類的鎮靜催眠藥，巴比妥類藥物是環狀酰脲類的鎮靜催眠藥，巴比妥類藥物劑量由小到大，中樞抑制作用巴比妥類藥物劑量由小到大，中樞抑制作用相繼表現為鎮靜、催眠、抗驚厥和麻醉作用，相繼表現為鎮靜、催眠、抗驚厥和麻醉作用，其中苯巴比妥還具有抗癲癇的作用其中苯巴比妥還具有抗癲癇的作用。5,55,5取代的巴比妥類藥物取代的巴比妥類藥物5,55,5取代的硫代巴比妥類藥物取代的硫代巴比妥類藥物1,5,51,5,5取代的巴比妥類藥物取代的巴比妥類藥物本類藥物的結構可大致分為兩個部分：本類藥物的結構可大致分為兩個部分：1. 1. 環狀丙二酰脲、環狀丙二酰脲、1,31,3二

3、酰亞胺基團二酰亞胺基團決定巴比妥類藥物的特性決定巴比妥類藥物的特性2. 2. 取代基部分取代基部分區別各種巴比妥類藥物區別各種巴比妥類藥物( (二二) )主要性質主要性質u性狀性狀白色結晶或結晶性粉末白色結晶或結晶性粉末u溶解度溶解度微溶或極微溶于水，易溶于乙醇微溶或極微溶于水，易溶于乙醇 等有機溶劑等有機溶劑 鈉鹽易溶于水，難溶于有機溶劑鈉鹽易溶于水，難溶于有機溶劑8一母核反應類別區分1. 弱酸性性質與鑒別巴比妥類分析CCNHCNHCR1R2OOO123456N C OHN C OHCCOONHCCOCCO NHOR1R2COCCO NHR1R2NCO-COCR1R2NCCNO-O-_H+H

4、+pK1=8_H+H+pK2=121. 弱酸性 性質與鑒別COCCO NHR1R2NC ONaNaOHNHCCOCCO NHOR1R2( (pKa:7.38.4) )2.2.水解反應水解反應NHNOOOHR2R1+5NaOHCHCOONaR1R2+2Na2CO3+NH3NHNOOOHR1CHCOONaR1R2+2NH3CR1R2COONaCONHCONH2H2OH2O N H C C O C C O N H O R 1 R 2 + 5 N a O H C H C O O N a R 1 R 2 + 2 N H 3 + 2 N a 2 C O 3 水解脫羧NHNOOOHR1CHCOONaR1R2

5、+2NH3CR1R2COONaCONHCONH2H2OH2ONa 鹽NHNONaOO+2H2OONHNH2O+NaHCO3pH6789分解率(%)261741pH對苯巴比妥分解率的影響20C放置一年巴比妥鈉注射液不能預先配制進行加熱滅菌，須巴比妥鈉注射液不能預先配制進行加熱滅菌，須制成粉針劑，臨用時溶解。制成粉針劑，臨用時溶解。Company L3.與金屬離子反應a.與銀鹽的反應5,5取代的巴比妥類藥物AgNO3Na2CO3可溶性的一銀鹽AgNO3二銀鹽白色沉淀NNR1R2OONaONNR1R2OOAgONNR1R2OOAgONNR1R2OOAgAgOH+AgNO3Na2CO3NaHCO3Na

6、NO3H+AgNO3Na2CO3+NaHCO3NaNO3H14應用： 鑒別（一般鑒別試驗） 丙二酰脲類（ChP）b. 含量測定 化學計量關系 1 1(出現混濁)3. 與重金屬離子反應 3）銀鹽反應第二節 性質與鑒別Company L3.與金屬離子反應b.與銅鹽的反應巴比妥類銅吡啶顯色巴比妥類紫色或紫色沉淀硫巴比妥類綠色NNOOOR1R2HH水-吡啶NNOOR1R2OH部分離子化NNOOR1R2O-NNOOR1R2O-NCuN2+NNNHOOR1R2OCuHNNOOR1R2ON16注意事項：a. 巴比妥類藥物顯紫色溶液或沉淀 一般鑒別試驗（ChP）b. 含S巴比妥 顯綠色(硫噴妥特征反應)c.

7、吡啶作用： 1) 吸收H+使巴比妥類易解離 2) 孤對電子生成配位體3. 與重金屬離子反應 2）銅鹽反應第二節 性質與鑒別Company Lc.與鈷鹽的反應紫堇色鈷鹽巴比妥類藥物堿性CO NHCONHCOR1R22+Co2+4(CH3)2CHNH2+CoR2R1CONHCONCOR2R1NCONHCOCONHCH(CH3)2NHCH(CH3)2(CH3)2CHN+H32Co(NO3)2、CoO、Co(Ac)2異丙胺無水甲醇或乙醇18注意事項：a. 溶劑：無水乙(甲)醇無水條件b. 堿：以有機堿為好異丙胺c. 鈷鹽：醋酸鈷、硝酸鈷或氧化鈷 樣 提取液 顯色(鈉鹽、片等) H+,CHCl3在氨水瓶

8、口熏滴在濾紙上滴加Co2 +3. 與重金屬離子反應 c）鈷鹽反應第二節 性質與鑒別d.與汞鹽的反應巴比妥類藥物+汞鹽白色（可溶于氨試液）4.4.香草醛反應香草醛反應( (Vanillin) )棕紅色香草醛巴比妥類藥物濃硫酸戊巴比妥鑒別： 取戊巴比妥取戊巴比妥10mg，加香草醛約，加香草醛約10mg和硫酸和硫酸2ml，混，混合后在水浴上加熱合后在水浴上加熱2min，顯棕紅色。放冷，小心加，顯棕紅色。放冷，小心加入乙醇入乙醇5ml，即顯紫色并變成藍色。，即顯紫色并變成藍色。5.5.紫外吸收光譜特征紫外吸收光譜特征A.H2SO4液(0.05mol/L,未電離)B.pH9.9緩沖液(一級電離)C.pH

9、13NaOH液(1mol/L,二級電離)1,5,5-1,5,5-三取代巴比妥類三取代巴比妥類藥物不存在二級電離，藥物不存在二級電離，最大吸收波長不變。最大吸收波長不變。(nm)2902702502300.51.01.5A巴比妥類藥物的紫外吸收光譜ABC240nm255nm260nm3202802402000.80.50.2(nm)A238287304硫代巴比妥的紫外吸收光譜A.HCl液(0.1mol/L)B.NaOH液(0.1mol/L)22注：a. 1,5,5-三取代無二級電離 b. 硫(S)代巴比妥 1)在酸性溶液(pH=1)中有UV吸收 1=287nm,2=238nm 2)在堿性溶液(

10、pH=10) 1=304nm,2=255nm 3)在強堿溶液(pH=13) 1=304nm顯微結晶顯微結晶 藥物本身晶形藥物本身晶形反應產物晶形反應產物晶形( (一一) )丙二酰脲類的鑒別試驗丙二酰脲類的鑒別試驗u取供試品約0.1g，加碳酸鈉試液1ml與水10ml，振搖2min，濾過，濾液中逐滴加入硝酸銀試液，即生成白色沉淀，振搖，沉淀即溶解；繼續滴加過量的硝酸銀試液，沉淀不再溶解。u取供試品約50mg，加吡啶溶液(110)5 ml，溶解后，加銅吡啶試液1ml，即顯紫色或生成紫色沉淀。( (二二) )測定熔點測定熔點 巴比妥類的鈉鹽酸 游離巴比妥類藥物 過濾 洗滌 干燥 測熔點 ( (三三)

11、)利用特殊取代基或元素的鑒別試驗利用特殊取代基或元素的鑒別試驗 利用不飽和取代基的鑒別試驗(司可巴比妥鈉) 利用芳環取代基的鑒別試驗(苯巴比妥鈉) 硫色素反應(硫代巴比妥類)1.1.司可巴比妥鈉的鑒別司可巴比妥鈉的鑒別NHNNaOOOCH3CH3CH2I2NHNNaOOOCH3CH3CH2II褪色NHNNaOOOCH3CH3CH2Br BrBr2NHNNaOOOCH3CH3CH2OH OHKMnO42.2.苯巴比妥的鑒別苯巴比妥的鑒別黃色苯巴比妥423SOHKNOa.硝化反應 b.硫酸-亞硝酸鈉反應 苯巴比妥與苯巴比妥與NaNONaNO2 2-H-H2 2SOSO4 4反應生成反應生成橙黃色橙

12、黃色橙紅色橙紅色c.甲醛-硫酸反應 苯巴比妥與甲醛苯巴比妥與甲醛-H-H2 2SOSO4 4反應生成反應生成玫瑰紅色環玫瑰紅色環 區分苯巴比妥與不含芳環取代的巴比妥類藥物。3.3.硫代巴比妥類的鑒別硫代巴比妥類的鑒別硫色素反應硫色素反應NHNOOSNaH3CCH3H3C+Pb2+NaOHNHNOOSH3CCH3H3C2PbPbS硫代巴比妥類與巴比妥類的區別( (一一) )苯巴比妥苯巴比妥C2H5OH,H2SO4水解酯化CH2CONH2，CH2COOC2H5C2H5ONa OCOC2H5OC2H5CCONaCOOC2H5COOC2H5HCl酸化 ，消除CHCOOC2H5COOC2H5CCOOC2

13、H5COOC2H5C2H5C2H5Br乙基化CCOOC2H5COOC2H5C2H5CH3ONa環合CH2NH2NOCCONaC2H5CONHCONCCOC2H5CONHCONH酸析HCl1.酸度酸度中間體中間體乙酰化不完全時，乙酰化不完全時，與尿素縮合產生的雜質與尿素縮合產生的雜質COHHNHHNCHCOHNCOHNOCHCOOC2H5COOC2H5苯基丙二酰脲酸性較強檢查方法取本品0.20g，加水10ml，煮沸攪拌1min，放冷，濾過后，取濾液5ml，加甲基橙指示液1滴，不得顯紅色2.乙醇溶液澄清度乙醇溶液澄清度檢查中間體等乙醇中不溶物。取本品1.0g，加乙醇5ml，加熱回流3min，溶液應

14、澄清 3.中性或堿性物質中性或堿性物質( (提取重量法提取重量法) ) 副產物：2-苯基丁酰(胺)脲或分解產物 不溶于NaOH T.S.而溶于醚分液漏斗NaOH T.S.乙醚H2O過濾干燥濾紙蒸發皿1051hr3mg取本品取本品1.0g 1.0g 乙醚，乙醚，H H2 2O O洗洗3 3 次次 濾液濾液 蒸干蒸干 殘渣殘渣 司可巴比妥鈉的特殊雜質檢查司可巴比妥鈉的特殊雜質檢查+HBrNaOCH2 NaOH,C2H5ONa, CH3COCH3CH3CHBrCH2Br,NaOH CH3CH3NNOHOCH3CH3NNOHOHOHOHH +HH2NCONH2,C2H5ONaCOOC2H5COOC2H

15、5H CCH3CH3CH2CH2CH CH3CH2CH2CHCH3,C2H5ONaCOOC2H5COOC2H5CH2 OHONNCH3CH3CH3CH3CH2NaONNOHO縮合環合丙烯化成鹽 （1 1）溶液的澄清度）溶液的澄清度 此項檢查主要是控制水不溶性雜質，此項檢查主要是控制水不溶性雜質，巴比妥類藥物的鈉鹽極易溶于水，因此本巴比妥類藥物的鈉鹽極易溶于水，因此本品的水溶液應澄清，否則表明含有水不溶品的水溶液應澄清，否則表明含有水不溶性雜質。性雜質。 需注意的是需注意的是，因本品的水溶液易與空，因本品的水溶液易與空氣中的氣中的二氧化碳二氧化碳作用，而析出司可巴比妥，作用，而析出司可巴比妥，故

16、進行該項目檢查時，溶解樣品的故進行該項目檢查時，溶解樣品的水應新水應新沸放冷以消除水中二氧化碳的干擾沸放冷以消除水中二氧化碳的干擾。 （2 2）中性或堿性物質）中性或堿性物質 檢查的雜質是合成過程中產生的中性或堿檢查的雜質是合成過程中產生的中性或堿性副產物以及司可巴比妥鈉的分解產物，如酰性副產物以及司可巴比妥鈉的分解產物，如酰脲（脲（）、酰胺（）、酰胺（）類化合物。）類化合物。NaOCH2CH3CH3NNOHOCH2=CHCH2CH3CH2CH2CH CONHCONH2COONaH2OCCH3CH2=CHCH2CHCONHCONH2CH3CH2CH2CHCH3CH3CH3CH2CH2CHCH2

17、=CHCH2CHCONH2()() 銀量法銀量法 溴量法溴量法 巴比妥類藥物的含巴比妥類藥物的含 酸堿滴定法酸堿滴定法 量測定方法量測定方法 紫外分光光度紫外分光光度 提取重量法提取重量法 HPLCHPLC法、法、GCGC法法 371. 原理 （一）銀量法COCCONHR1R2NCONaNHCCOCCONHOR1R2Na2CO3 A g N O 3 A g N O 3 C OCC O R 1 R 2NNC O A gC O CC O R 1R 2NNC g A g O A382. 測定方法測定方法 供試品溶于供試品溶于Na2CO3溶液中溶液中, 溫度溫度1520, 用用AgNO3直接滴定直接滴

18、定 (反應摩爾比：1:1)3. 終點指示終點指示 稍過量的稍過量的Ag+與巴比妥類藥物生成與巴比妥類藥物生成白色渾濁白色渾濁 (難溶難溶性的二銀鹽性的二銀鹽) （一）銀量法苯巴比妥及其鈉鹽、異戊巴比妥及其鈉鹽以及它們的制劑，苯巴比妥及其鈉鹽、異戊巴比妥及其鈉鹽以及它們的制劑，中國藥典均采用銀量法測定其含量。中國藥典均采用銀量法測定其含量。4. 討論1) 化學計量關系：1:12) 優點: 操作簡便、專屬性強3) 缺點: a. 近終點時, 生成二銀鹽速度慢 b. 溫度影響大,滴定終點以溶液出現渾濁為終點指示難以觀察。 c. 克服方法: 以甲醇為溶劑(甲醇3無水碳酸鈉,電位法（Ag玻璃電極系統）指示

19、終點4) Na2CO3的作用 （一）銀量法(一) 銀量法 (Argentometry)0.2g甲醇甲醇 40ml異戊巴比妥測定3%無水碳酸鈉無水碳酸鈉電位滴定法(AgNO3)指示電極(Ag)參比電極(玻璃/甘汞) 測定方法與計算測定方法與計算 例如例如: :異戊巴比妥及其鈉鹽的測定：異戊巴比妥及其鈉鹽的測定： 取本品約取本品約0.2g 0.2g 加甲醇加甲醇40ml40ml使溶解使溶解 新鮮配制的新鮮配制的3%3%無無水碳酸鈉溶液水碳酸鈉溶液15ml15ml，照電位法，用硝酸銀滴定液，照電位法，用硝酸銀滴定液（0.1mol/L0.1mol/L）滴定，即得。每）滴定，即得。每1ml1ml硝酸銀滴

20、定液硝酸銀滴定液（0.1mol/L0.1mol/L）相當于）相當于22.63mg22.63mg的的C C1111H H1818N N2 2O O3 3（或（或24.83mg24.83mg的的C C1111H H1717N N2 2NaONaO3 3）。）。 原料藥：直接滴定法（容量分析法）原料藥：直接滴定法（容量分析法） %100%WTfVD 注意事項注意事項 （1 1）無水碳酸鈉應新鮮配制）無水碳酸鈉應新鮮配制 （2 2）硝酸銀滴定液應新鮮配制）硝酸銀滴定液應新鮮配制1. 原理Br2 (剩余) + 2KI 2KBr + I2I2 (生成) + 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6

21、Br2定過量C NHCNHCCOOOCH2CHCH3(CH2)2CH3CH2=CHBrH2CHBrCCH2(二) 溴量法 司可巴比妥鈉測定NHNOONaOCH2CH3CH32Na2S2O3取本品約取本品約0.1g，精密稱定，置，精密稱定，置250ml碘瓶碘瓶中，加水中，加水10ml，振搖，振搖使溶解，精密加使溶解，精密加溴滴定液溴滴定液（0.05mol/L）25ml，再加，再加鹽酸鹽酸5ml，立即立即密塞密塞并振搖并振搖1min，在，在暗處靜置暗處靜置15min后，注意后，注意微開瓶塞微開瓶塞，加加碘化鉀碘化鉀試液試液10ml，立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉滴定液，立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸

22、鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，至）滴定，至近終點時，加淀粉指示液近終點時，加淀粉指示液，繼續滴定至，繼續滴定至藍色消失，并將滴定結果用藍色消失，并將滴定結果用空白試驗校正空白試驗校正。每。每1ml溴滴定液溴滴定液（0.05mo1/L）相當于）相當于13.01mg的的C12H17N2NaO3。 原料藥原料藥 剩余滴定法剩余滴定法%100%WTfVVD樣空464. 討論1) 化學計量關系： 1:1:22) 密塞目的3) 近終點時加指示劑的原因4) 空白試驗校正KBrO35KBr6HCl3Br26KCl3H2O 溴滴定液（0.1 mol/L）的配制 取溴酸鉀3.0 g與溴化鉀15 g，加水適量使

23、溶解成1000 ml，搖勻。(三) 酸堿滴定法 (Acid-base titration method) 水-乙醇混合溶劑中滴定 膠束水溶液中滴定 非水滴定法異戊巴異戊巴比妥比妥水水醇醇溶解溶解麝香草酚酞NaOH淡藍色1.1.水水- -乙醇混合溶液乙醇混合溶液HNHNOOOCH3CH3CH3+NaOHHNHNNaOOOCH3CH3CH3+H2O終點指示：電位法終點指示：電位法原因：操作過程中易于吸收二氧化碳，而使得終點的原因：操作過程中易于吸收二氧化碳，而使得終點的淡藍色褪去，采用空白對照也難以得到滿意的效果。淡藍色褪去，采用空白對照也難以得到滿意的效果。494. 討論1) 化學計量關系： 1

24、:12) 水乙醇混合溶劑作用3) 終點指示4) 空白試驗校正原料藥原料藥 直接滴定法（有空白校正）直接滴定法（有空白校正）%100)(%0WfVVTDT T滴定度，每滴定度，每1ml1ml滴定液相當于被測組分的滴定液相當于被測組分的mgmg數數 V V滴定時，供試品消耗滴定液的體積（滴定時，供試品消耗滴定液的體積（mlml）V VO O滴定時，空白消耗滴定液的體積（滴定時，空白消耗滴定液的體積（mlml）f f濃度校正因子濃度校正因子 2. 2. 在膠束水溶液中滴定在膠束水溶液中滴定 膠束具有增溶作用，水溶液中膠束的存在能使膠束具有增溶作用，水溶液中膠束的存在能使不溶或微溶于不溶或微溶于水的有

25、機化合物的溶解度增加水的有機化合物的溶解度增加，并顯著改變弱酸、弱堿性物質，并顯著改變弱酸、弱堿性物質的解離，使其的解離，使其酸堿性增強酸堿性增強。正膠束反膠束H2O溴化十六烷基三甲基芐銨Cetyltrimethylbenzylammonium bromide，CTMA氯化四癸基二甲基芐銨Tetradecyldimethylbenzylammonium chloride，TDBA巴比妥類表面活性劑溶解麝香草酚酞指示劑NaOH滴定采用本法測定巴比妥和苯巴比妥的結果的相對標準差（RSD）均小于0.3%，并優于在水-乙醇混合溶液中的滴定方法。 巴比妥類藥物在非水溶液中的酸性增強，用堿性標準溶液滴巴比

26、妥類藥物在非水溶液中的酸性增強，用堿性標準溶液滴定時，終點較為明顯，可獲得比較滿意的結果。定時，終點較為明顯，可獲得比較滿意的結果。 常用的有機溶劑常用的有機溶劑: : 二甲基甲酰胺二甲基甲酰胺、甲醇、氯仿、丙酮、無水、甲醇、氯仿、丙酮、無水 乙醇、苯、吡啶、甲醇乙醇、苯、吡啶、甲醇- -苯（苯（15:15:8585）、乙）、乙 醇醇- -氯仿（氯仿（1 1?1010）等；）等； 常用的滴定劑：常用的滴定劑：甲醇鉀甲醇鉀（鈉）的甲醇（或乙醇）溶液、氫氧（鈉）的甲醇（或乙醇）溶液、氫氧 化四丁基銨的氯苯溶液等；化四丁基銨的氯苯溶液等； 常用的指示劑為常用的指示劑為麝香草酚藍麝香草酚藍等，也可用玻

27、璃等，也可用玻璃- -甘汞電極系統，甘汞電極系統，以電位法指示終點。以電位法指示終點。 3. 3. 非水滴定法非水滴定法 巴比妥類藥物在巴比妥類藥物在酸性酸性介質中幾乎不電離，介質中幾乎不電離，無明顯的紫無明顯的紫外吸收外吸收。 但在但在堿性介質堿性介質中電離為具有紫外吸收特征的結構，因中電離為具有紫外吸收特征的結構，因而可采用紫外分光光度法測定其含量。而可采用紫外分光光度法測定其含量。 本法靈敏度高，專屬性強，廣泛應用于巴比妥類藥物本法靈敏度高，專屬性強，廣泛應用于巴比妥類藥物的的原料及其制劑的含量測定原料及其制劑的含量測定，以及固體制劑的溶出度和含，以及固體制劑的溶出度和含量均勻度檢查，也

28、常用于體內巴比妥類藥物的檢測。量均勻度檢查，也常用于體內巴比妥類藥物的檢測。（四）紫外分光光度法（四）紫外分光光度法(4) 紫外分光光度法 藥名max(nm)E巴比妥240538苯巴比妥253320戊巴比妥240310異戊巴比妥238440司可巴比妥240330硫噴妥305930NaOH溶液(0.1mol/L)溶劑pH9.4硼酸鹽緩沖液pH9.4硼酸鹽緩沖液u直接測定的直接測定的UVUV法法u提取分離后的提取分離后的UVUV法法 1. 1. 直接測定的紫外分光光度法直接測定的紫外分光光度法 本法是將供試品溶解后，根據溶液的本法是將供試品溶解后，根據溶液的pHpH，在最大吸收波長（在最大吸收波長

29、（maxmax）處，直接測定對照）處，直接測定對照品溶液和供試品溶液的吸收度，再計算藥物品溶液和供試品溶液的吸收度，再計算藥物的含量。中國藥典對注射用硫噴妥鈉的含量的含量。中國藥典對注射用硫噴妥鈉的含量測定采用本法。測定采用本法。 Beer-LambertBeer-Lambert定律定律 A = -A = -T =ElC ACT =ElC AC 單組分定量的方法單組分定量的方法： 1. 1. 吸收系數法（絕對法）吸收系數法（絕對法）clEA%1cm1lEAc1%1cm)g/100ml(100)g/ml(1%1cmlEAc 2. 2. 標準曲線法標準曲線法 3. 3. 對照法對照法lcElcEA

30、A對供對供%1cm1%1cm1供對供對CCAA對對供供CAAC 2. 2. 提取分離后的紫外分光光度法提取分離后的紫外分光光度法 提取分離的提取分離的主要目的主要目的是消除干擾物質對測定的影響。根據是消除干擾物質對測定的影響。根據巴比妥類藥物具有弱酸性，在氯仿等有機溶劑中易溶，而其巴比妥類藥物具有弱酸性，在氯仿等有機溶劑中易溶，而其鈉鹽在水中易溶的特點。鈉鹽在水中易溶的特點。USP法測定苯巴比妥含量巴比妥類藥物適量，加巴比妥類藥物適量，加水使其溶解水使其溶解后，加后，加酸酸化酸酸化，用，用三氯甲烷三氯甲烷提取提取巴比妥類藥物，三氯甲烷提取液加入巴比妥類藥物，三氯甲烷提取液加入pH7.2pH7.

31、27.57.5的緩沖液的緩沖液，振搖，分離棄去水相緩沖液層，再用振搖，分離棄去水相緩沖液層，再用氫氧化鈉氫氧化鈉自三氯甲烷中提自三氯甲烷中提取巴比妥類藥物，調節堿提取液的取巴比妥類藥物，調節堿提取液的pHpH值值，然后選用相應的吸收，然后選用相應的吸收波長進行測定。波長進行測定。2. 2. 提取分離后的紫外分光光度法提取分離后的紫外分光光度法 本法是利用巴比妥藥物在不同本法是利用巴比妥藥物在不同pHpH值溶液中的電離級數不同，值溶液中的電離級數不同，因而產生紫外吸收光譜的情況不同，以此為依據設計測定方因而產生紫外吸收光譜的情況不同，以此為依據設計測定方法。該法常用于巴比妥類藥物的制劑分析，也可

32、用于體內巴法。該法常用于巴比妥類藥物的制劑分析，也可用于體內巴比妥類藥物的監測。比妥類藥物的監測。3. 3. 差示紫外分光光度法（差示紫外分光光度法（A A法）法） （1 1）測定方法測定方法 取兩份相等的供試溶液，分別制成兩種不同的化學環取兩份相等的供試溶液，分別制成兩種不同的化學環境（如在其一中加酸、堿或緩沖液改變溶液的境（如在其一中加酸、堿或緩沖液改變溶液的pHpH，或在，或在其一中加能與供試品發生某種化學反應的試劑），然后其一中加能與供試品發生某種化學反應的試劑），然后將兩者分別稀釋至同樣濃度，一份置樣品池中，另一份將兩者分別稀釋至同樣濃度，一份置樣品池中，另一份置參比池中，于適當波長

33、處，測其吸收度的差值（置參比池中，于適當波長處，測其吸收度的差值（ A A值）。值）。 a. a.供試品在不同的化學環境中以不同的分子形式存在，它供試品在不同的化學環境中以不同的分子形式存在，它們的吸收光譜有顯著的差異。們的吸收光譜有顯著的差異。 b.b.干擾物的吸收不受測定時化學環境的影響，光譜行為不干擾物的吸收不受測定時化學環境的影響，光譜行為不變。變。 (nm)2902702502300.51.01.5A巴比妥類藥物的紫外吸收光譜ABC（2 2）必要條件）必要條件A.H2SO4液(0.05mol/L,未電離)B.pH9.9緩沖液(一級電離)C.pH13NaOH液(1mol/L,二級電離)

34、 （3 3）定量依據）定量依據 供試品在兩種不同的化學環境中分別以供試品在兩種不同的化學環境中分別以x x、y y表示，表示，干擾物用干擾物用z z表示。表示。clAAAAAAAAAyxyxzyzx)( )()(參比樣品cA 也就是說，吸收度差值（也就是說，吸收度差值（ A A）僅與待測組分的濃）僅與待測組分的濃度有關，而與干擾組分無關，即干擾組分的干擾度有關，而與干擾組分無關，即干擾組分的干擾被消除。被消除。 可用對照法或標準曲線法定量可用對照法或標準曲線法定量 （4 4）特點特點 保留了通常的分光光度法簡易保留了通常的分光光度法簡易快速、直接讀數的優點，又無需事快速、直接讀數的優點，又無需

35、事先分離，并能消除干擾。先分離，并能消除干擾。 以復方巴比妥散中苯巴比妥的測定為例：以復方巴比妥散中苯巴比妥的測定為例： 利用復方苯巴比妥散中的阿司匹林和利用復方苯巴比妥散中的阿司匹林和水楊酸等成分在水楊酸等成分在pH5.91pH5.91和和8.048.04條件下的紫條件下的紫外吸收光譜重合，外吸收光譜重合，A A=0=0，而苯巴比妥在，而苯巴比妥在240nm240nm波長處，在波長處，在pH5.91pH5.91和和8.048.04條件下條件下A A的值最大。因此的值最大。因此A A大小只與苯巴比妥濃度大小只與苯巴比妥濃度成正比，是該法用于苯巴比妥的定量依據。成正比，是該法用于苯巴比妥的定量依據。NNClH3CO1234567892地西泮 (diazepam) 七元亞胺內酰胺環HNNOClOH奧沙西泮(Oxazepam)氯氮卓(Chlordiazepoxide)NNNCH3OClH一、鑒別試驗 (一一) 化學鑒別試驗化學鑒別試驗 1 1. .沉淀反應沉淀反應 氯氮卓氯氮卓 橙紅色橙紅色沉淀沉淀 阿普唑侖阿普唑侖 KBiI4 鹽酸氟西泮鹽酸氟西泮 也生成也生成橙紅色橙紅色沉淀沉淀 氯硝西泮氯硝西泮 放置后，沉淀顏色變深，