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文檔簡介

1、植物生理學實驗報告 實驗題目：過氧化物酶活性的測定姓名 班級 學號 一、 實驗原理和目的 原理：過氧化物酶廣泛分布于植物的各個組織器官中。在有過氧化氫存在下，過氧化物酶能使愈創木酚氧化生成醌類化合物，此化合物進一步縮合或與其它分子縮合，生成茶褐色物質，該化合物在470nm處有最大的吸收值，可用分光度計測量生成物的含量。 目的：學習測定植物組織中過氧化物酶活性的方法。二、 實驗器具和步驟材料：女貞樹葉器具：分光光度計、離心機、秒表、天平、研缽、磁力攪拌器試劑： 0.1mo1/L過氧化氫；，0.1mo1/L磷酸緩沖液pH7.0； 0.3%愈創木酚反應液：100 mmo1L磷酸緩沖液（pH 70）1

2、00 ml于燒杯中，加入愈創木酚0.3ml ，于磁力攪拌器上加熱攪拌，直至愈創木酚溶解。 步驟：1稱取植物材料約0.2g，加入，0.1mo1/L磷酸緩沖液 (pH7.0) 6ml(分次加入2ml,2ml,2ml,最后用于洗研缽)，在研缽中研磨成勻漿，過濾或以 8000rmin 離心15min，上清液為酶的提取液。 2.1ml0.3%愈創木酚反應液，加0.8ml磷酸緩沖液7.0，加2ml0.1mo1/L過氧化氫，最后加酶液200ul （視酶活性大小而定，如酶濃度高可稀釋后再測定），搖勻，立即在分光光度計470nm下測吸光度，從加入酶液時立即開啟秒表記錄時間，1min讀數一次（也可2min，視材料

3、而定）。3以每分鐘吸光度變化0.01為一個酶活力單位。過氧化物酶活性(U)=A470 ×稀釋倍數/g.Fw.min.0.01 三、 實驗數據和作業過氧化物酶活性(U)=A470 ×=(0.133-0.124)*20/（0.2*2*0.01）=45四、 數據分析A470的值太小可能是由于葉片放置過久導致過氧化物酶活性喪失。五、 思考題1） 過氧化物酶在植物體內的主要作用是什么？答：它與光合作用、呼吸作用及生長素的氧化等都有關系。在植物生長發育過程中它的活性不斷發生變化。一般老化組織中活性較高，幼嫩組織中活性較弱。這是因為過氧化物酶能使組織中所含的某些碳水化合物轉化成木質素，增加木質化程度，而且發現早衰減產的水稻根系中過氧化物酶的活性增加，所以過氧化物酶可作為組織老化的一種生理指標

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