1、 細(xì)胞病理技術(shù)綜述 盧曉芳主要內(nèi)容細(xì)胞涂片技術(shù)細(xì)胞蠟塊制作HPV檢測技術(shù)1 12 23 3細(xì)胞病理學(xué)（細(xì)胞病理學(xué)（cytopathology ）定義：定義： 是采集人體各部位的細(xì)胞，經(jīng)染色后用顯微鏡觀察其形態(tài)，協(xié)助臨床診斷疾病的一門學(xué)科。細(xì)胞病理學(xué)（細(xì)胞病理學(xué)（cytopathology ）評價(jià)（優(yōu)點(diǎn)）：評價(jià)（優(yōu)點(diǎn)）：1.簡單易行、安全性強(qiáng)；2.對設(shè)備要求不高、費(fèi)用低；3.對患者造成的痛苦少，可反復(fù)取材檢查；4.診斷迅速，特別適用于大規(guī)模防癌普查和高危人群的隨訪觀察。 適用大規(guī)模防癌篩查適用大規(guī)模防癌篩查 適用大規(guī)模防癌篩查適用大規(guī)模防癌篩查 甲狀腺穿刺甲狀腺穿刺婦科涂片婦科涂片乳腺穿刺乳腺穿

2、刺細(xì)胞病理學(xué)（細(xì)胞病理學(xué)（cytopathology ）評價(jià)（缺點(diǎn)）：評價(jià)（缺點(diǎn)）：1.因細(xì)胞病理檢查的局限性，只能看到少數(shù)細(xì)胞，不能全面觀察病變組織結(jié)構(gòu)，有一定的漏診、誤診率；2.較難確定腫瘤的具體部位；3.不易對癌細(xì)胞做出明確的分型。 細(xì)胞病理學(xué)（細(xì)胞病理學(xué)（cytopathology ）分類（根據(jù)標(biāo)本來源）：分類（根據(jù)標(biāo)本來源）：1.1.脫落細(xì)胞學(xué)脫落細(xì)胞學(xué)（ exfoliative cytology）婦科：宮頸涂片非婦：胸腹腔積液、尿液、腦脊液、痰、乳溢、食管拉網(wǎng)等 2.2.細(xì)針吸取細(xì)胞學(xué)（細(xì)針吸取細(xì)胞學(xué)（fine needle aspiration cytology） 甲狀腺、乳腺、

3、淋巴結(jié)、體表各部位；以及在影像學(xué)引導(dǎo)下，對胸腹腔的腫塊穿刺。傳統(tǒng)制片技術(shù)傳統(tǒng)制片技術(shù)一、直接制片一、直接制片將新鮮標(biāo)本直接涂在載玻片將新鮮標(biāo)本直接涂在載玻片上1.宮頸涂片2.痰涂片3.食管拉網(wǎng)4.乳溢5.鼻咽涂片手法涂片手法傳統(tǒng)制片技術(shù)傳統(tǒng)制片技術(shù)二、普通離心制片二、普通離心制片 胸腹腔積液、心包積液、尿、腦脊液、穿刺液等液體標(biāo)本 ，需要經(jīng)離心后涂片。傳統(tǒng)制片技術(shù)傳統(tǒng)制片技術(shù)二、普通離心制片二、普通離心制片 標(biāo)本一般不少于標(biāo)本一般不少于50ml50ml（腦脊液、穿刺液除外）（腦脊液、穿刺液除外）移到離心管中移到離心管中 離心離心2500r/10min2500r/10min 倒去上清倒去上清稀釋

4、合適濃度稀釋合適濃度 重懸沉淀重懸沉淀 細(xì)胞涂片細(xì)胞涂片傳統(tǒng)制片技術(shù)傳統(tǒng)制片技術(shù)二、普通離心制片二、普通離心制片 含血較多的標(biāo)本，離心后會出現(xiàn)明顯分層含血較多的標(biāo)本，離心后會出現(xiàn)明顯分層涂片時需取涂片時需取中間白膜層中間白膜層傳統(tǒng)制片技術(shù)傳統(tǒng)制片技術(shù) 含血較多的標(biāo)本，若紅細(xì)胞過多，會干擾醫(yī)生診斷視野含血較多的標(biāo)本，若紅細(xì)胞過多，會干擾醫(yī)生診斷視野傳統(tǒng)制片技術(shù)傳統(tǒng)制片技術(shù) 紅細(xì)胞裂解液祛除紅細(xì)胞后，稀釋合適濃度，直接重懸沉淀，涂片，背景清晰紅細(xì)胞裂解液祛除紅細(xì)胞后，稀釋合適濃度，直接重懸沉淀，涂片，背景清晰 缺點(diǎn)：制成細(xì)胞蠟塊后，有含鐵血黃素生成，干擾免疫組化判讀缺點(diǎn)：制成細(xì)胞蠟塊后，有含鐵血黃

5、素生成，干擾免疫組化判讀備注：備注： 若標(biāo)本量多，可多若標(biāo)本量多，可多分裝幾管離心。分裝幾管離心。 一部分祛紅后涂片一部分祛紅后涂片; ; 另一部分，備做細(xì)另一部分，備做細(xì)胞蠟塊，以免含鐵血胞蠟塊，以免含鐵血黃素干擾。黃素干擾。傳統(tǒng)制片技術(shù)傳統(tǒng)制片技術(shù)三、特殊離心涂片技術(shù)（三、特殊離心涂片技術(shù)（細(xì)胞甩片細(xì)胞甩片）制備細(xì)胞含量很少的樣品：如腦脊液、尿液、穿刺液CytospinCytospin 外觀圖外觀圖CytospinCytospin 內(nèi)視圖內(nèi)視圖傳統(tǒng)制片技術(shù)傳統(tǒng)制片技術(shù)四、注意事項(xiàng)四、注意事項(xiàng)1.涂片時要注意避免來回反復(fù)摩擦，否則可能將細(xì)胞破壞；2.涂片盡可能均勻，太厚太薄，都不能滿足鏡下閱

6、片要求；3.涂片完成后，潮干固定，不能過于干燥，否則細(xì)胞異型，不利于診斷，更易引起誤診；4.標(biāo)本不宜放置時間過長，特別是尿液，需4冰箱冷藏，但不宜超過48h.傳統(tǒng)制片技術(shù)傳統(tǒng)制片技術(shù)五、細(xì)胞涂片固定（固定劑種類）五、細(xì)胞涂片固定（固定劑種類）1.95%乙醇：首選固定劑2.甲醇：固定作用比乙醇效果好，核結(jié)構(gòu)清晰，但有毒性毒性3.丙酮：滲透力強(qiáng)，但使細(xì)胞強(qiáng)烈皺縮，對核的固定也欠佳4.10%NBF：交聯(lián)固定，速度太慢5.Carnoy液：涂片做特染時常用固定劑傳統(tǒng)制片技術(shù)傳統(tǒng)制片技術(shù)五、細(xì)胞涂片固定（注意事項(xiàng)）五、細(xì)胞涂片固定（注意事項(xiàng)）1.一病例，一容器，避免交叉污染（理想狀態(tài)，不現(xiàn)實(shí)理想狀態(tài)，不現(xiàn)

7、實(shí)）2.固定液原則上每日更換，若為節(jié)省成本，沒有日更換，也需過濾后使用，且必須保持其濃度3.固定時間：約15mim4.4.關(guān)鍵：涂片完成后，潮干立即固定，不可干燥，否則細(xì)胞褪變。關(guān)鍵：涂片完成后，潮干立即固定，不可干燥，否則細(xì)胞褪變。傳統(tǒng)制片技術(shù)傳統(tǒng)制片技術(shù)干燥后固定，細(xì)胞褪變干燥后固定，細(xì)胞褪變正常濕固定正常濕固定液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)液基細(xì)胞學(xué)技術(shù) 定義定義 液基細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)，通過標(biāo)本采集及保存、細(xì)胞混勻、分離提取診斷細(xì)胞、全自動制片及染色等過程制作細(xì)胞薄片，全過程均在液體狀態(tài)全過程均在液體狀態(tài)下完成，故稱為液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)。 分類分類1.膜式薄層制片技術(shù)（thin-prep cytolosy t

8、est,TCT）2.LCT沉降式薄層檢測技術(shù)（ Auto Cyte PREP，LCT）傳統(tǒng)制片與液基制片技術(shù)的比較傳統(tǒng)制片與液基制片技術(shù)的比較傳統(tǒng)制片傳統(tǒng)制片液基制片液基制片約約20%20%標(biāo)本移至玻片標(biāo)本移至玻片幾乎幾乎100%100%標(biāo)本被收集至保存液中標(biāo)本被收集至保存液中制片技術(shù)不穩(wěn)定、不能重復(fù)制片制片技術(shù)不穩(wěn)定、不能重復(fù)制片技術(shù)穩(wěn)定可靠、可以重復(fù)技術(shù)穩(wěn)定可靠、可以重復(fù)易受血、粘液、炎性物遮蓋易受血、粘液、炎性物遮蓋去除血、粘液、及大量炎性遮蓋物去除血、粘液、及大量炎性遮蓋物細(xì)胞分布不均勻細(xì)胞分布不均勻, ,易重疊易重疊細(xì)胞分布均勻集中細(xì)胞分布均勻集中, ,不易重疊不易重疊涂片區(qū)域過大，

9、觀察費(fèi)時費(fèi)力涂片區(qū)域過大，觀察費(fèi)時費(fèi)力, ,易漏診易漏診制片區(qū)域集中，不易漏診制片區(qū)域集中，不易漏診液基細(xì)胞婦科標(biāo)本采集耗材液基細(xì)胞婦科標(biāo)本采集耗材液基細(xì)胞標(biāo)本采集步驟液基細(xì)胞標(biāo)本采集步驟漂洗漂洗擰緊擰緊記錄記錄液基細(xì)胞婦科標(biāo)本液基細(xì)胞婦科標(biāo)本采集注意事項(xiàng)采集注意事項(xiàng) 采樣過程中，將宮頸刷向同一方向轉(zhuǎn)采樣過程中，將宮頸刷向同一方向轉(zhuǎn)3535圈，不圈，不要太用力或轉(zhuǎn)得過多以免出血沖淡細(xì)胞并使用恰當(dāng)要太用力或轉(zhuǎn)得過多以免出血沖淡細(xì)胞并使用恰當(dāng)?shù)牧Χ缺ＷC取到更多的細(xì)胞。的力度保證取到更多的細(xì)胞。 經(jīng)期不能取材。經(jīng)期不能取材。 分泌物太多時要用干綿簽擦干凈后再取。分泌物太多時要用干綿簽擦干凈后再取。

10、宮頸糜爛嚴(yán)重的旋轉(zhuǎn)不要超過宮頸糜爛嚴(yán)重的旋轉(zhuǎn)不要超過3 3圈，以免出血。圈，以免出血。 旋轉(zhuǎn)時向同一方向，不要來回轉(zhuǎn)動以免加大創(chuàng)傷引旋轉(zhuǎn)時向同一方向，不要來回轉(zhuǎn)動以免加大創(chuàng)傷引起出血。起出血。液基細(xì)胞制片技術(shù)液基細(xì)胞制片技術(shù)膜式薄層制片技術(shù)（膜式薄層制片技術(shù)（thin-prep thin-prep cytolosycytolosy test,TCTtest,TCT）新柏氏膜式液基薄層細(xì)胞學(xué)（TCT）： 1996年5月通過美國FDA批準(zhǔn)用于臨床宮頸癌篩查。擁有超過27項(xiàng)國際專利。TCTTCT取材優(yōu)點(diǎn)取材優(yōu)點(diǎn)液基細(xì)胞制片技術(shù)液基細(xì)胞制片技術(shù)膜式薄層制片技術(shù)（膜式薄層制片技術(shù)（thin-prep t

11、hin-prep cytolosycytolosy test,TCTtest,TCT）新柏氏新柏氏T2000T2000（原理：負(fù)壓膜吸附）（原理：負(fù)壓膜吸附）液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)膜式薄層制片技術(shù)（膜式薄層制片技術(shù)（TCTTCT）制片過程）制片過程液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)膜式薄層制片技術(shù)（膜式薄層制片技術(shù)（TCTTCT）制片后巴氏染色）制片后巴氏染色 新柏氏新柏氏玻片掃描分析影像系統(tǒng)（玻片掃描分析影像系統(tǒng)（TISTIS）自動閱片系）自動閱片系統(tǒng)統(tǒng) TIS使醫(yī)生閱片技巧與計(jì)算機(jī)強(qiáng)大影像處理能力完美結(jié)合。與傳統(tǒng)涂片人工閱片相比，TIS 可幫助醫(yī)生工作效率提高75%，且可將假陰性率降低至

12、0.012%。備注：該系統(tǒng)只能掃描備注：該系統(tǒng)只能掃描TCTTCT液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)沉降式液基薄層制片技術(shù)沉降式液基薄層制片技術(shù)( (Auto Cyte PREP，LCTLCT） 該技術(shù)為沉降式沉降式原理技術(shù)。代表公司有美國BD公 司的LCT，國產(chǎn)廣州安必平公司的LBP 液基細(xì)胞制片技術(shù)液基細(xì)胞制片技術(shù)LCTLCT沉降式液基薄層制片技術(shù)原理沉降式液基薄層制片技術(shù)原理（一）用梯度密度試劑分離去除液基細(xì)胞學(xué)中的血液、黏液等干擾成分，富集細(xì)胞及診斷成份。（二）根據(jù)人體不同類型細(xì)胞其比重不同的特點(diǎn)，尤其是病變細(xì)胞比重大、沉降速度快，與特殊處理后的載玻片相互吸引，從而最大程度地捕獲病變細(xì)胞和具

13、診斷價(jià)值的成份，最終制成背景清晰、診斷線索明確的單層細(xì)胞薄片 液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)LCTLCT沉降式液基薄層制片技術(shù)原理沉降式液基薄層制片技術(shù)原理病變程度越重的細(xì)胞，沉降得越快，被玻片捕獲的機(jī)率就越大，即使選擇病變程度越重的細(xì)胞，沉降得越快，被玻片捕獲的機(jī)率就越大，即使選擇診斷面積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量為診斷面積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量為50005000個，亦是所采集的所有細(xì)胞中病變程度相對最個，亦是所采集的所有細(xì)胞中病變程度相對最重的重的50005000個細(xì)胞，可明顯提高檢出率。個細(xì)胞，可明顯提高檢出率。液基細(xì)胞制片技術(shù)液基細(xì)胞制片技術(shù)1.宮頸細(xì)胞刷宮頸細(xì)胞刷 直接入瓶，直接入瓶，通過震蕩器處理，保證細(xì)通

14、過震蕩器處理，保證細(xì)胞刷收集到的細(xì)胞胞刷收集到的細(xì)胞100%用用于制片，避免丟棄采樣刷于制片，避免丟棄采樣刷而導(dǎo)致刷上細(xì)胞丟失的情而導(dǎo)致刷上細(xì)胞丟失的情況。況。2.標(biāo)本處理液標(biāo)本處理液 主要成份為主要成份為24%乙醇，對工作環(huán)境無乙醇，對工作環(huán)境無污染。采集標(biāo)本后，在常污染。采集標(biāo)本后，在常溫下能保存四個星期。溫下能保存四個星期。廣 州 安 必 平 ( L B P ) 醫(yī) 藥 科 技 有 限 公 司 產(chǎn)品知識培訓(xùn)LCTLCT沉降式液基薄層制片過程沉降式液基薄層制片過程3密度梯度試劑程控離心密度梯度試劑程控離心能將婦科標(biāo)本中普遍存在的血液、粘液能將婦科標(biāo)本中普遍存在的血液、粘液及其他細(xì)胞碎屑與診

15、斷有效成份（包括及其他細(xì)胞碎屑與診斷有效成份（包括組織細(xì)胞、病原微生物等）剝離分層，組織細(xì)胞、病原微生物等）剝離分層，排除干擾成份，保證富集診斷成份。排除干擾成份，保證富集診斷成份。 可同時提高病變細(xì)胞及病原微生物檢出可同時提高病變細(xì)胞及病原微生物檢出率，給臨床提供準(zhǔn)確的診療指導(dǎo)。率，給臨床提供準(zhǔn)確的診療指導(dǎo)。離心 除去血液、粘液及細(xì)胞碎屑 集中診斷細(xì)胞(鱗狀上皮、腺上皮）產(chǎn)品知識培訓(xùn)廣 州 安 必 平 ( L B P ) 醫(yī) 藥 科 技 有 限 公 司 液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)LCTLCT沉降式液基薄層制片過程沉降式液基薄層制片過程4重力自然沉降制片重力自然沉降制片可可根據(jù)涂片根據(jù)涂片厚

16、薄厚薄，調(diào)整沉降，調(diào)整沉降時間，在時間，在13mm13mm診斷面積內(nèi)細(xì)診斷面積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量可選擇為胞數(shù)量可選擇為50005000120000120000，診斷面積，診斷面積較較TCTTCT小小 產(chǎn) 品 知 識 培 訓(xùn)液基細(xì)胞制片技術(shù)液基細(xì)胞制片技術(shù)LCTLCT沉降式液基薄層制片過程沉降式液基薄層制片過程宮頸宮頸尿液尿液痰痰漿膜腔漿膜腔LCTLCT沉淀式液基薄層制片效果圖沉淀式液基薄層制片效果圖羅氏羅氏P16/ki67P16/ki67雙染試劑盒液基涂片上的免疫組化染色雙染試劑盒液基涂片上的免疫組化染色細(xì)胞蠟塊制作細(xì)胞蠟塊制作定義定義 就是將送檢的胸腹水，通過病理技術(shù)流程的處理，制作成細(xì)胞學(xué)常規(guī)蠟塊

17、，將其細(xì)胞成分保存在蠟塊中，從而切片進(jìn)行常規(guī)顯微鏡下診斷，判別細(xì)胞的性質(zhì)、類型，達(dá)到較為精確的腫瘤細(xì)胞的診斷。細(xì)胞蠟塊制作細(xì)胞蠟塊制作定義定義 就是將送檢的胸腹水，通過病理技術(shù)流程的處理，制作成細(xì)胞學(xué)常規(guī)蠟塊，將其細(xì)胞成分保存在蠟塊中，從而切片進(jìn)行常規(guī)顯微鏡下診斷，判別細(xì)胞的性質(zhì)、類型，達(dá)到較為精確的腫瘤細(xì)胞的診斷。細(xì)胞蠟塊制作細(xì)胞蠟塊制作臨床意義臨床意義1、增加了細(xì)胞涂片的數(shù)量、密度，并對細(xì)胞做了很好保存，既能重復(fù)多切片，又能輔助腫瘤免疫組化檢測，提高了胸腹水中腫瘤診斷的陽性率。細(xì)胞蠟塊制作細(xì)胞蠟塊制作臨床意義臨床意義2.查到腫瘤細(xì)胞時，對細(xì)胞類型能夠做很好的分型，為腫瘤規(guī)范治療提供更多參考

18、依據(jù)。3.此項(xiàng)技術(shù)較以前脫落細(xì)胞學(xué)普通涂片準(zhǔn)確性更高，保存更方便，對疾病的診斷更加明確。細(xì)胞蠟塊制作細(xì)胞蠟塊制作制作步驟制作步驟1.接到胸腹水后，將其靜止沉淀1小時，然后吸取底部液體置入離心管中;2.離心2500r/10min，傾去上清液;3.加入適量固定液（10%NBF：95%乙醇1:1），離心2500r/10min，傾去上清液;4.將上清液控干，等待取材;5.細(xì)胞量足夠多時，取材時用包埋紙包裹即可，常規(guī)固定脫水包埋細(xì)胞蠟塊制作細(xì)胞蠟塊制作制作步驟制作步驟6.細(xì)胞量過少時，需用支撐物凝聚細(xì)胞常用： 瓊脂糖（5%濃度） 蛋清甘油點(diǎn)優(yōu)缺點(diǎn)點(diǎn)優(yōu)缺點(diǎn)l優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)l缺點(diǎn)缺點(diǎn)1.使單個分散的細(xì)胞標(biāo)本聚集起

19、來。2.解決了直接離心包埋細(xì)胞時細(xì)胞散落等問題。3.降低了細(xì)胞的損失量保留盡量多的細(xì)胞。1.瓊脂糖遇高溫即融，溫度下降后又重新凝固，溫度難以控制。2.烤片后載玻片上的蠟片間隙中瓊脂糖融化，封片后鏡下可見水珠樣空泡。3.瓊滴加瓊脂糖后，細(xì)胞懸浮，凝固后細(xì)胞不在同一層面瓊脂糖細(xì)胞蠟塊制作瓊脂糖細(xì)胞蠟塊制作細(xì)胞蠟塊切片細(xì)胞蠟塊切片細(xì)胞蠟塊切片染色細(xì)胞蠟塊切片染色細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué) 定義定義 FNA（Fine Needle Aspiration）是使用針頭（22G-24G）刺入病變區(qū)域內(nèi)，通過提插針方式將病灶內(nèi)的細(xì)胞或小組織塊切割下來，同時借助針管內(nèi)負(fù)壓將其吸出，涂片及染色后在光鏡下閱片，最

20、后完成病理診斷的一種活檢方法細(xì)針穿刺技術(shù)細(xì)針穿刺技術(shù)發(fā)展發(fā)展階段階段 1930s徒手穿刺1950s把手穿刺1996持筆試現(xiàn)在專用穿刺針為什么要進(jìn)行甲狀腺細(xì)針穿刺：為什么要進(jìn)行甲狀腺細(xì)針穿刺：1. .指南的需要指南的需要2.相對粗針穿刺安全，并發(fā)癥少 1) 穿刺針細(xì)（22G-24G）出血少，常見并發(fā)癥 出血及血腫； 虛脫； 氣胸； 誤入氣管； 2）針道播散少見 Robbin、Berg、Engcell、Zajicek、Eriksson、Sprenger、Koss、彭孝敬等。通過大量的材料證實(shí)針道播散及轉(zhuǎn)移的機(jī)率極低，不足萬分之一。并證實(shí)接受FNAC的惡性腫瘤病人與未接受FNAC的惡性腫瘤病人的長期

21、生存率并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。反之，由于FNAC工作的開展使許多惡性腫瘤病人得到及時的診斷與治療。 3.診斷效率高滿意標(biāo)本的情況下，F(xiàn)NA的敏感性，特異度均可以超過90%。 附屬第一醫(yī)院2015年度甲狀腺細(xì)針穿刺診斷與手術(shù)組織學(xué)診斷符合率（51/56, 91.07%） 細(xì)針與手術(shù)不符合共5例：其中標(biāo)本不滿意3例 粗針穿刺（-），手術(shù)（+），細(xì)針（+）： 共2例：均為PTC57怎樣進(jìn)行甲狀腺細(xì)針穿刺？怎樣進(jìn)行甲狀腺細(xì)針穿刺？HPVHPV病毒檢測技術(shù)病毒檢測技術(shù) HPV稱為人乳頭瘤狀病毒，是一類病毒的總稱，結(jié)構(gòu)為DNA雙鏈病毒。目前已分出100余種HPV DNA，其中30多種與宮頸感染和病變有關(guān)。根據(jù)其致

22、病力的大小分為高危型和低危型兩種，國際癌癥研究協(xié)會對9個國家11次病例對照研究資料分析 HPV6 ,11 ,40 ,42 ,43 ,44 ,54 ,61 ,70 ,72 ,81 ,cp6 108等12種，主要引起生殖道肛周皮膚和陰道下部的外生性濕疣類病變、扁平濕疣類病變和低度子宮頸上皮內(nèi)瘤樣變(CINI), 多呈一過性，可自然逆轉(zhuǎn) HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68，73，82等15種，主要導(dǎo)致CINII-III級病變和宮頸癌的發(fā)生, 持續(xù)高危型HPV感染的CIN級易進(jìn)展為CIN HPVHPV介紹介紹E：早期基因區(qū)編碼早期6個蛋白L：晚期基因區(qū)編

23、碼晚期2個蛋白感染后的存在狀態(tài)：狀態(tài)一：非整合狀態(tài)狀態(tài)二：整合到宿主細(xì)胞http:/ HPVHPV介紹介紹HPVHPV介紹介紹根據(jù)感染組織類型分為：皮膚組織 粘膜組織人乳頭狀病毒（人乳頭狀病毒（HPVHPV）目前根據(jù)DNA同源性將HPV分為100多種亞型，約35種型別與生殖道感染 (如：生殖器疣等) 有關(guān)，約20種型別與癌癥相關(guān)。與宮頸癌相關(guān)的高危型高危型 HPV (high-risk HPV, HPV (high-risk HPV, or or hrHPVhrHPV) )有有1414種種：16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59,66,68低危型有 6，11，4

24、0，42，43，44來自世界各地的宮頸癌組織標(biāo)本的研究發(fā)現(xiàn)，HPV16、18型感染率最高（占70%）HPV HPV 是引起宮頸癌的主要因素是引起宮頸癌的主要因素超過超過99%99%的宮頸癌都檢測到的宮頸癌都檢測到HPVHPV68HPVHPV檢查的臨床價(jià)值檢查的臨床價(jià)值HPV準(zhǔn)確分型是判斷HPV持續(xù)感染狀態(tài)的基礎(chǔ)，是篩選宮頸癌高危人群的基礎(chǔ)；HPV高危亞型病毒載量提示高度病變的風(fēng)險(xiǎn)，跟蹤和隨訪提示病毒的清除或疾病的進(jìn)展。健康人群通過體檢篩查出感染HPV高危亞型的人群，進(jìn)行定期隨訪管理，可以最終消除宮頸癌。宮頸癌臨床診斷及篩選指南宮頸細(xì)胞學(xué)檢查正常ASC-US ASC-H LSIL HSIL4-6

25、個月復(fù)查或HPV檢查HPV 陰性(高危型)HPV 陽性(高危型) 12個月復(fù)查 陰道鏡非侵襲性病變宮頸癌前病變或者宮頸癌半年或一年重或者1年重復(fù)HPV復(fù)細(xì)胞學(xué)檢查檢查 治療Logo公司公司SFDAFDAQIAGENYYHologicYYROCHEYYHPVHPV檢測三巨頭檢測三巨頭HPV-DNAHPV-DNA檢測原理檢測原理原理原理代表公司代表公司雜交捕獲QIAGEN（HC2）酶切信號放大Hologic（cervista）PCR熒光法ROCHE(cobas4800）HPVDNAHPVDNA檢測檢測QIAGEN HC2原理：基于信號放大的酶標(biāo)板技術(shù)的化學(xué)發(fā)光檢測的核酸雜交檢測方法（雜交捕獲）流程：裂解雜交捕獲反應(yīng)沖洗信號收集判讀時間：手工操作3.5小時，儀器操作4.5小時結(jié)果：檢測13種HPV高危型，不分型主要問題：與個別HPV亞型會發(fā)生交叉反應(yīng)，無內(nèi)對照，約5%假陽 性率DML2