1、u 實驗動物（laboratory animal） 經人工培育，對其攜帶微生物實行控制，遺傳背景明確，來源清楚，可用于科學研究的動物。u 溫血動物(恒溫動物) 兔、豚鼠、大鼠、小鼠 有時也用猴、狗、貓等實驗動物的選擇實驗動物的選擇小鼠小鼠 豚鼠豚鼠 實驗動物的選擇實驗動物的選擇種屬的選擇 個體選擇 年齡 體重 性別 生理狀態 健康狀況 實驗動物的選擇實驗動物的選擇種屬的選擇u 機體反應上盡量近似于人體；u 易獲得、易飼養、易管理；u 最敏感、最合適；u 選用幾種不同種屬的動物(對毒作用不清楚的化學物質)；u 借助已有毒理學研究資料選擇。 實驗動物的選擇實驗動物的選擇借助已有毒理學研究資料選擇

2、氣體、蒸氣對粘膜的刺激作用貓 毒物對皮膚的局部作用豚鼠或兔(皮膚對刺激物的反應近似于人) 過敏性反應豚鼠(易于致敏) 觀察致嘔吐作用的實驗研究狗、貓 外界環境因素引起機體體溫過高及體溫過低的反應兔或貓(大鼠、小鼠對于體溫調節不穩定) 高血壓病理狗、兔、大鼠(易出現血壓變化) 物質的致癌作用小鼠和大鼠 慢性中毒損害實質性臟器的毒物小鼠(實質性臟器容易罹患病變) 實驗動物的選擇實驗動物的選擇(1) (1) 經口染毒經口染毒 灌胃灌胃 用灌胃器將所應投給動物的藥灌到動物胃內；用灌胃器將所應投給動物的藥灌到動物胃內； 直接灌入胃內，不與口腔及食道接觸；直接灌入胃內，不與口腔及食道接觸； 給予的化學物劑

3、量準確。給予的化學物劑量準確。 喂飼喂飼 將化學物溶于無害的溶液中拌入飼料或飲用水中，使動將化學物溶于無害的溶液中拌入飼料或飲用水中，使動物自行攝入含化學物的飼料或水，然后依每日食入的飼料與物自行攝入含化學物的飼料或水，然后依每日食入的飼料與水再推算動物實際攝入化學物的劑量。水再推算動物實際攝入化學物的劑量。 (1) (1) 經口染毒經口染毒 優點：優點：接觸化學物的方式符合人類接觸污染食物與水的方式，接觸化學物的方式符合人類接觸污染食物與水的方式，方法簡便、易操作。方法簡便、易操作。 缺點缺點 進食時浪費、損失飼料多，攝入的量進食時浪費、損失飼料多，攝入的量不準確不準確； 如果化學物有異味，

4、動物可能拒食；如果化學物有異味，動物可能拒食； 如果化學物在室溫下可以揮發，或在飼料中和水中可以水解，如果化學物在室溫下可以揮發，或在飼料中和水中可以水解，則劑量也不準確；則劑量也不準確； 有經呼吸道與皮膚交叉吸收的可能；有經呼吸道與皮膚交叉吸收的可能； 更適宜進行多日染毒，急性毒性試驗一般不用之。更適宜進行多日染毒，急性毒性試驗一般不用之。 (1)(1)經口染毒經口染毒 吞咽膠囊吞咽膠囊 將所需劑量的受試化學物裝入藥用膠囊內，強制放到將所需劑量的受試化學物裝入藥用膠囊內，強制放到動物的舌后咽部迫使其咽下。動物的舌后咽部迫使其咽下。 此法劑量準確，尤其適用于易揮發、易水解和有異臭此法劑量準確，

5、尤其適用于易揮發、易水解和有異臭的化學物。的化學物。 兔、貓及狗等較大動物可用此法。兔、貓及狗等較大動物可用此法。 （3）經皮膚染毒）經皮膚染毒一、急性毒性的概念一、急性毒性的概念 急性毒性急性毒性是指機體是指機體( (人或實驗動物人或實驗動物) )一次一次或或24h24h之內之內多多次次接觸接觸( (染毒染毒) )外源化學物之后，在短期內所發生的毒性效外源化學物之后，在短期內所發生的毒性效應，包括引起死亡效應。應，包括引起死亡效應。 一次一次：瞬間染毒，如經口染毒、經注射途徑染毒，但：瞬間染毒，如經口染毒、經注射途徑染毒，但在經呼吸道與經皮膚染毒，則是指在一個特定的期間內持在經呼吸道與經皮膚

6、染毒，則是指在一個特定的期間內持續地接觸化學物的過程，續地接觸化學物的過程，“一次一次”含有時間因素。含有時間因素。 多次多次：當外源化學物毒性過低，或一次染毒劑量受機：當外源化學物毒性過低，或一次染毒劑量受機體容量限制，需給予實驗動物較大劑量時，則可在體容量限制，需給予實驗動物較大劑量時，則可在24h24h內內分次染毒。分次染毒。 二、急性毒性試驗的目的二、急性毒性試驗的目的 探求化學物的致死劑量，以初步評估其對人類的可能探求化學物的致死劑量，以初步評估其對人類的可能毒害的危險性；毒害的危險性； 求該化學物的劑量求該化學物的劑量- -反應關系，為其它毒性實驗打下反應關系，為其它毒性實驗打下選

7、擇染毒劑量的基礎。選擇染毒劑量的基礎。表示急性毒性大小：表示急性毒性大小：LD50三、急性毒性試驗的內容三、急性毒性試驗的內容（1）急性毒性測定）急性毒性測定 確定一次染毒的確定一次染毒的 LD50或或LC50；（2）經皮膚染毒實驗）經皮膚染毒實驗 考察受檢化學物質能否經皮膚進入體內，考察受檢化學物質能否經皮膚進入體內，LD50；（3）局部作用實驗）局部作用實驗 通過使受檢化學物質直接接觸皮膚及眼結膜等試驗，研究通過使受檢化學物質直接接觸皮膚及眼結膜等試驗，研究其對生物體局部有無刺激、腐蝕及其他危害作用。其對生物體局部有無刺激、腐蝕及其他危害作用。三、急性毒性試驗的內容三、急性毒性試驗的內容（

8、4）中毒癥狀的觀察）中毒癥狀的觀察 據染毒動物癥狀及體征，粗略了解毒物作用的程度和可能據染毒動物癥狀及體征，粗略了解毒物作用的程度和可能作用部位。作用部位。（5）功能及病理組織學檢查）功能及病理組織學檢查 選擇必要的功能指標，尋求毒作用劑量與功能改變的關系，選擇必要的功能指標，尋求毒作用劑量與功能改變的關系，確定急性閾劑量；確定急性閾劑量； 通過病理組織學檢查，進一步了解毒作用部位及毒害程度。通過病理組織學檢查，進一步了解毒作用部位及毒害程度。一般采用小動物，如小鼠、大鼠、豚鼠等。一般采用小動物，如小鼠、大鼠、豚鼠等。實驗動物應預先觀察實驗動物應預先觀察7天左右，以了解其健康情況及正常活天左右

9、，以了解其健康情況及正常活動狀態。動狀態。正式實驗時，按隨機分組原則分組，一般分成正式實驗時，按隨機分組原則分組，一般分成56個實驗個實驗組組(必要時備對照組必要時備對照組)，每組，每組510只動物只動物(小鼠多用小鼠多用10只只)。四、哺乳動物的急性毒性實驗四、哺乳動物的急性毒性實驗（二）急性閾劑量的測定（二）急性閾劑量的測定 2.實驗方法實驗方法（1）游泳試驗）游泳試驗主要是通過觀察動物的活動能力，揭示不同劑量的毒物對機主要是通過觀察動物的活動能力，揭示不同劑量的毒物對機體體力影響的程度，是研究閾劑量體體力影響的程度，是研究閾劑量(或濃度或濃度)的常用指標。的常用指標。實驗動物一般用小鼠或

10、大鼠。實驗動物一般用小鼠或大鼠。記錄每只動物自放入水中至口鼻沉沒到水下記錄每只動物自放入水中至口鼻沉沒到水下5秒鐘的時間，秒鐘的時間，即游泳時間。在游泳過程中記錄游泳速度、運動姿勢等。即游泳時間。在游泳過程中記錄游泳速度、運動姿勢等。比較染毒組與對照組游泳時間和速度以及游泳姿勢上的差異比較染毒組與對照組游泳時間和速度以及游泳姿勢上的差異并進行評價。并進行評價。四、哺乳動物的急性毒性實驗四、哺乳動物的急性毒性實驗（二）急性閾劑量的測定（二）急性閾劑量的測定 2.實驗方法實驗方法（2）刺激閾試驗）刺激閾試驗刺激性氣體或蒸汽，對上呼吸道、眼睛和口腔等器官的黏膜刺激性氣體或蒸汽，對上呼吸道、眼睛和口腔

11、等器官的黏膜會產生局部刺激作用，通過觀察毒物在不同濃度下引起的刺會產生局部刺激作用，通過觀察毒物在不同濃度下引起的刺激癥狀，可找出毒物引起刺激癥狀的最低濃度，即閾濃度。激癥狀，可找出毒物引起刺激癥狀的最低濃度，即閾濃度。實驗動物多用貓。實驗動物多用貓。觀察指標除一般刺激癥狀，如流淚、流涕、等以外，主要觀觀察指標除一般刺激癥狀，如流淚、流涕、等以外，主要觀察動物的流涎出現的時間及嚴重程度。察動物的流涎出現的時間及嚴重程度。將將50以上動物出現以上動物出現“有少量唾液流到口唇周圍有少量唾液流到口唇周圍”以上程度以上程度的刺激癥狀的最小濃度作為閾濃度。的刺激癥狀的最小濃度作為閾濃度。四、哺乳動物的急

12、性毒性實驗四、哺乳動物的急性毒性實驗（三）局部作用試驗（三）局部作用試驗 用于研究一些化學物質引起接觸的皮膚和黏膜的癥狀，用于研究一些化學物質引起接觸的皮膚和黏膜的癥狀，如炎癥和燒傷。如炎癥和燒傷。 1.急性皮膚刺激急性皮膚刺激/腐蝕試驗腐蝕試驗為了確定化學物質對哺乳動物的皮膚是否具有刺激或腐蝕作為了確定化學物質對哺乳動物的皮膚是否具有刺激或腐蝕作用。用。選用白色豚鼠或家兔作為實驗動物。選用白色豚鼠或家兔作為實驗動物。觀察涂抹部位的皮膚反應，對刺激作用給予全面完整的評價。觀察涂抹部位的皮膚反應，對刺激作用給予全面完整的評價。四、哺乳動物的急性毒性實驗四、哺乳動物的急性毒性實驗（三）局部作用試驗

13、（三）局部作用試驗 2.急性眼睛刺激急性眼睛刺激/腐蝕試驗腐蝕試驗結膜囊染毒試驗。結膜囊染毒試驗。試驗常選用家兔或豚鼠為實驗動物。試驗常選用家兔或豚鼠為實驗動物。將受試化學物將受試化學物0.1mL滴人一側眼結膜囊內，用手將眼瞼壓住，使滴人一側眼結膜囊內，用手將眼瞼壓住，使閉眼幾秒鐘，另一側眼滴生理鹽水作對照。閉眼幾秒鐘，另一側眼滴生理鹽水作對照。記錄滴藥后記錄滴藥后1h、12h、24h、48h、72h和和96h的局部反應，如充的局部反應，如充血、水腫、流淚、怕光、角膜、結膜和眼球損害的程度以及恢復血、水腫、流淚、怕光、角膜、結膜和眼球損害的程度以及恢復的時間等。的時間等。以規定的間隔時間觀察刺

14、激或腐蝕作用的程度，同時作進一步描以規定的間隔時間觀察刺激或腐蝕作用的程度，同時作進一步描述以便對刺激作用給予全面、完整的評價。述以便對刺激作用給予全面、完整的評價。五、水生動物毒性實驗五、水生動物毒性實驗 一些水生生物對水質變化很敏感，反應顯著。因此，在環一些水生生物對水質變化很敏感，反應顯著。因此，在環境毒理實驗中常用水生生物作為實驗動物，特別在制訂污水境毒理實驗中常用水生生物作為實驗動物，特別在制訂污水排放標準時，常進行水生生物的急性毒性實驗。排放標準時，常進行水生生物的急性毒性實驗。 魚類魚類、甲殼動物、藻類毒性實驗等方法。、甲殼動物、藻類毒性實驗等方法。魚類毒性實驗魚類毒性實驗1.

15、實驗用魚的選擇實驗用魚的選擇必須具有一定區域代表性，便于在實驗條件下飼養，對化學必須具有一定區域代表性，便于在實驗條件下飼養，對化學物質較為敏感。物質較為敏感。短期試驗多采用我國的青、草、鰱、鳙四大養殖淡水魚，一短期試驗多采用我國的青、草、鰱、鳙四大養殖淡水魚，一般體長般體長機體消除速度不斷累積毒性作用閾劑量蓄積毒性作用蓄積毒性作用 環境污染物在體內的蓄積作用的過程，表現為：物質蓄積物質蓄積：污染物不斷進入機體，其吸收量排出量，以致在體內的貯留量增多；功能蓄積功能蓄積：不斷進入機體內的環境污染物，反復作用機體，引起機體一定結構或功能的變化，并逐漸累積加重，最后導致出現損害作用。相對的區分，同時

16、存在，互為基礎蓄積毒性作用蓄積毒性作用環境污染物在體內的蓄積作用，是引起亞慢性和慢性毒性作用的基礎。常是評估環境污染物毒性作用的指標之一；制定其在環境中的衛生標準的重要參考依據。闡明污染物有無蓄積作用及其程度有重要意義。一、試驗方法一、試驗方法（一）蓄積系數法（一）蓄積系數法 固定劑量每天連續染毒法固定劑量每天連續染毒法（二）（二）2020天蓄積試驗法天蓄積試驗法（三）生物半減期法（三）生物半減期法一、試驗方法一、試驗方法（一）蓄積系數法（一）蓄積系數法（cumulative coefficient method） 分次分次給受試物后引起給受試物后引起50%受試動物出現某種毒效應的總劑受試動物

17、出現某種毒效應的總劑量（量（LD50(n)表示）與表示）與一次一次給受試物后引起給受試物后引起50%受試動物出現受試動物出現同一毒效應的劑量（以同一毒效應的劑量（以LD50(1)表示）的比值，即表示）的比值，即)1(50)(50LDLDKn蓄積作用強度分級蓄積作用強度分級一、試驗方法一、試驗方法（一）蓄積系數法（一）蓄積系數法一、試驗方法（一）蓄積系數法1.固定劑量每天連續染毒法固定劑量1/10-1/20LD50每天染毒一次觀察死亡情況5個LD50時，若動物死亡數未超過半數，K5， 表明蓄積作用不明顯。如果染毒過程中動物相繼死亡，記下受試動物出現半數死亡時的累計的染毒總劑量，按上述計算蓄積系數。分次染毒劑量為1/20 LD50時，實驗時間可長達100天，分次染毒劑量為1/10 LD50時，實驗還可長達50天。一、試驗方法一、試驗方法一、試驗方法一、試驗方法一、試驗方法一、試驗方法（三）生物半減期法（三）生物半減期法生物半減期生物半減期（T1/2）指一種外來化