1、山東科源制藥有限公司 Shandong Keyuan Pharmaceutical Co., Ltd標(biāo)題Title潔凈室（區(qū)）沉降菌監(jiān)測(cè)操作規(guī)程文件編號(hào)：SOP-ZL-006Document No.Page 2 of 7起草人：Written by日期：Date 部門：質(zhì)量管理部Dept.生效日期：Effective Date審核人:Reviewed by日期：Date 部門：質(zhì)量管理部Dept.替代版本：04Replaced Version批準(zhǔn)人:Approved by日期：Date 部門：分管副總Dept.版 本 號(hào)：05Version No.分發(fā)部門：質(zhì)量管理部 Distribution

2、1 目的確定醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測(cè)試方法和標(biāo)準(zhǔn)。2 范圍適用于不同潔凈室（區(qū)）（包括潔凈工作臺(tái)）的沉降菌的測(cè)定和環(huán)境驗(yàn)證。3 責(zé)任QC微生物室負(fù)責(zé)潔凈室（區(qū)）沉降菌的監(jiān)測(cè)。4 內(nèi)容4.1 參考標(biāo)準(zhǔn)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T16294-19962010醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測(cè)試方法。中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部發(fā)布的藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）。4.2 監(jiān)測(cè)程序4.2.1 設(shè)備高壓消毒鍋恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)皿：一般采用90mm15mm的硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿。4.2.2 培養(yǎng)基及平皿制備4.2.2.1 一般采用普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基或其他藥典認(rèn)可的培養(yǎng)基4.2.2.2 制備過(guò)程如下：u 將培

3、養(yǎng)皿與用三角瓶裝好的培養(yǎng)基在高壓消毒鍋內(nèi)置于121濕熱滅菌20分鐘或180干熱滅菌2小時(shí)；u 將培養(yǎng)基加熱溶化，冷至45時(shí)，在無(wú)菌操作要求下將培養(yǎng)基注入培養(yǎng)皿，每皿約15ml。u 待瓊脂凝固后，將培養(yǎng)基平皿倒置于3035恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)，若培養(yǎng)基平皿上確無(wú)菌落生長(zhǎng)，即可供采樣用。u 制備好的培養(yǎng)基平皿倒置在28的環(huán)境中存放，注意避免污染。4.2.3 采樣點(diǎn)和監(jiān)測(cè)頻次保密文件山東科源制藥有限公司 Shandong Keyuan Pharmaceutical Co., Ltd標(biāo)題Title潔凈室（區(qū)）沉降菌監(jiān)測(cè)操作規(guī)程文件編號(hào)：S0P-ZL-006Document No.版本號(hào)Versio

4、n No.：05Page 7 of 94.2.3.1 采樣點(diǎn)的布置力求均勻，避免采樣點(diǎn)在某局部區(qū)域過(guò)于集中，按照潔凈區(qū)的面積大小，而制定最少采樣點(diǎn)數(shù)目（附件），在滿足最少采樣點(diǎn)數(shù)的同時(shí)，還宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)和采樣點(diǎn)布置（附件）。4.2.3.2 工作區(qū)采樣點(diǎn)的位置離地0.8米1.5米左右（略高于工作面）。并在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加采樣點(diǎn)。4.2.3.3 監(jiān)測(cè)頻次：每月一次，特殊情況及時(shí)監(jiān)測(cè)。4.2.4 測(cè)試規(guī)則4.2.4.1 沉降菌測(cè)試前，被測(cè)試潔凈室（區(qū)）的溫濕度必須達(dá)到規(guī)定的要求，靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。4.2.4.2 測(cè)試前被測(cè)試潔凈室（區(qū)）已經(jīng)過(guò)消毒。4.

5、2.4.3 測(cè)試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級(jí)別的工作服。4.2.4.4 測(cè)試時(shí)間：u 對(duì)單向流（如A100級(jí)凈化房間及層流工作臺(tái)），測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于10分鐘后開(kāi)始。u 對(duì)非單向流，如10,000B級(jí)、100,000C級(jí)以上的凈化房間，測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30分鐘后開(kāi)始。4.3 測(cè)試步驟4.3.1 采樣將已制備好的培養(yǎng)皿按要求放置，使培養(yǎng)基表面暴露0.5小時(shí)。4.3.2 培養(yǎng)全部采樣結(jié)束后將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中，在3035培養(yǎng)，時(shí)間不少于48小時(shí)。每批培養(yǎng)基應(yīng)有對(duì)照試驗(yàn)，每批可選定3只培養(yǎng)皿作對(duì)照培養(yǎng)。4.3.3 菌落計(jì)數(shù)用肉眼直接計(jì)數(shù)，標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)

6、計(jì)，并用510倍放大鏡檢查，有否遺漏。4.3.4 注意事項(xiàng)測(cè)試時(shí)應(yīng)注意如下事項(xiàng)：u 防止人為對(duì)樣本的污染。u 對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。u 般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察，應(yīng)注意培養(yǎng)皿邊緣生長(zhǎng)的菌落，并注意菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別。u 采樣時(shí)應(yīng)仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。4.3.5 結(jié)果計(jì)算用計(jì)數(shù)方法得出各個(gè)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)，按下式計(jì)算：平均菌落數(shù)MM1M2-Mnn式中：M11號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)M22號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù) Mnn號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù) n培養(yǎng)皿總數(shù)4.3.6 結(jié)果評(píng)定4.3.6.1 潔凈度級(jí)別沉降菌最大允許值（菌數(shù)/皿）靜 態(tài)靜 態(tài)*A級(jí)1C級(jí)1

7、000033D級(jí)1000001010“*”動(dòng)態(tài)標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)產(chǎn)品及驗(yàn)證情況修訂。4.3.6.2 用平均菌落數(shù)判斷潔凈室（區(qū)）空氣中的微生物。u 潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平均菌落數(shù)必須低于所選定的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)。u 若某潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平均菌落數(shù)超過(guò)評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，則必須對(duì)此區(qū)預(yù)先進(jìn)行消毒，然后重新采樣兩次，測(cè)試結(jié)果均須合格。4.3.7 警戒限度和糾偏限度潔凈度級(jí)別沉降菌警戒限度（菌數(shù)/皿）動(dòng) 態(tài)A級(jí)1C級(jí)2D級(jí)5潔凈度級(jí)別沉降菌糾偏限度（菌數(shù)/皿）動(dòng) 態(tài)A級(jí)1C級(jí)2.5D級(jí)84.3.8 異常情況的處理4.3.8.1 當(dāng)連續(xù)三次樣品測(cè)試結(jié)果超過(guò)警戒警戒標(biāo)準(zhǔn)或單個(gè)樣品的結(jié)果特別高時(shí)調(diào)查原因，必要時(shí)采取相應(yīng)糾偏措施。4.3.

8、8.2 當(dāng)空調(diào)系統(tǒng)維修（如更換高效過(guò)濾器）或停用超過(guò)30天時(shí)，重新啟用空調(diào)系統(tǒng)后應(yīng)及時(shí)對(duì)潔凈室（區(qū)）進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測(cè)。5 修訂記錄版本號(hào)主要變更內(nèi)容描述變更原因生效日期備注新建文件 2004.03.0101增加文件版號(hào)文件版本升級(jí)2006.01.0102變更登記號(hào)文件版本升級(jí)2009.10.2603潔凈區(qū)更改潔凈級(jí)別客戶審計(jì)2010.08.0104增加異常情況處理的描述客戶審計(jì)2012.06.2005增加了警戒限度和糾偏限度，升級(jí)潔凈區(qū)級(jí)別，同時(shí)調(diào)整文件格式文件版本升級(jí)6 附錄附件1 沉降菌監(jiān)測(cè)的最少采樣點(diǎn)數(shù)目附件2 沉降菌監(jiān)測(cè)的最少培養(yǎng)皿數(shù)附件3 沉降菌監(jiān)測(cè)的采樣點(diǎn)布置附件4 房間編號(hào)一覽表SO

9、P-ZL-006-FJ1 潔凈室（區(qū)）沉降菌監(jiān)測(cè)記錄附件1 沉降菌監(jiān)測(cè)的最少采樣點(diǎn)數(shù)目 面 積m2潔 凈 度 級(jí) 別A級(jí)C級(jí)D級(jí)1010 2020 4040 100100 200200 400400 10001000 20002000234816408016040080022241020401002002 22236133263注：對(duì)于單向流潔凈室，是指送風(fēng)面積。對(duì)于非單向流潔凈室是指房間面積。附件2 沉降菌監(jiān)測(cè)的最少培養(yǎng)皿數(shù)潔凈度級(jí)別所需90mm培養(yǎng)皿數(shù)（以沉降0.5小時(shí)計(jì)）100A級(jí)1C級(jí)100000D級(jí)1422附件3 沉降菌監(jiān)測(cè)的采樣點(diǎn)布置. . . . . . .“ .”為采樣點(diǎn)采樣點(diǎn)

10、布置 “.” 為采樣點(diǎn)山東科源制藥有限公司 Shandong Keyuan Pharmaceutical Co., Ltd標(biāo)題Title潔凈室（區(qū)）沉降菌監(jiān)測(cè)操作規(guī)程文件編號(hào)：S0P-ZL-006Document No.版本號(hào)Version No.：04Page 9 of 7附件4 房間編號(hào)一覽表鹽酸二甲雙胍潔凈區(qū)女二更 101男二更 102氣閘室（人） 103洗衣間 104走廊 105結(jié)晶離心室 106潔具間 107干燥間 108待檢室 109粉碎間 110容器清洗間 111包材間 112氣閘室（包材） 113內(nèi)包間 114氣閘室（成品） 115格列齊特潔凈區(qū)二樓樓梯間（二樓）201走廊 2

11、02潔具間 203干燥間 204結(jié)晶離心室 205粉碎間 206容器清洗間 207格列齊特潔凈區(qū)一樓女二更 208男二更 209手消毒室 210氣閘室（人） 211走廊 212洗衣間 213容器清洗間 214潔具間 215包材間 216內(nèi)包間 217成品暫存間 218異氟烷潔凈區(qū)女一更 301手清潔間（女） 302女二更 303男一更 304手清潔間（男） 305男二更 306氣閘室（人） 307洗衣間 308走廊 309潔具室 310容器清洗間 311氣閘室（包材） 312瓶暫存間 313瓶洗間 314烘瓶室 315灌裝間 316待檢室 317氣閘室（成品） 318綜合潔凈區(qū)女二更 401男二更 402氣閘室（人） 403洗衣間 404走廊 405潔具間 406結(jié)晶離心室（北） 407干燥間 408結(jié)晶離心室（南） 409粉碎間 410混料間 411待檢室 412容器清洗間 413包材間 414氣閘室（包材） 415內(nèi)包間 416成品暫