1、專題一微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用專題一微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用選修1知識內(nèi)容知識內(nèi)容考綱要求考綱要求1.微生物的分離與培養(yǎng)微生物的分離與培養(yǎng)2.某種微生物數(shù)量的測定某種微生物數(shù)量的測定3.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用培養(yǎng)基對微生物的選擇作用4.利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用生物在其他方面的應(yīng)用知識點一：微生物的分離與培養(yǎng)知識點一：微生物的分離與培養(yǎng)1培養(yǎng)基培養(yǎng)基判斷正誤判斷正誤(1)據(jù)物理狀態(tài)的不同，培養(yǎng)基只有液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)據(jù)物理狀態(tài)的不同，培養(yǎng)基只有液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基兩種類型。基兩種類型。( )(2)培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無機

2、鹽四種成培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽四種成分。分。 ( )(3)在配制培養(yǎng)基時，除滿足營養(yǎng)需求外，還應(yīng)考慮在配制培養(yǎng)基時，除滿足營養(yǎng)需求外，還應(yīng)考慮pH、O2及特殊營養(yǎng)物質(zhì)的需求。及特殊營養(yǎng)物質(zhì)的需求。( )2無菌技術(shù)無菌技術(shù)連線連線倒平板倒平板 滅菌滅菌 稱量稱量 (2)純化大腸桿菌的方法：純化大腸桿菌的方法：常用的微生物接種方法有常用的微生物接種方法有 和和 。平板劃線法：是通過平板劃線法：是通過 在瓊脂固體培養(yǎng)基表在瓊脂固體培養(yǎng)基表面面 操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。面。稀釋涂布平板法：是將菌液進行一系列的稀釋涂布平板

3、法：是將菌液進行一系列的 ，然后將不同稀釋度的菌液分別然后將不同稀釋度的菌液分別 到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面。到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面。平板劃線法平板劃線法稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法接種環(huán)接種環(huán)連續(xù)劃線連續(xù)劃線梯度稀釋梯度稀釋涂布涂布1微生物的營養(yǎng)微生物的營養(yǎng)營養(yǎng)要素營養(yǎng)要素來源來源功能功能碳碳源源無機無機碳源碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳無機物等含碳無機物構(gòu)成細胞中的物質(zhì)和一些代謝構(gòu)成細胞中的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；產(chǎn)物；有機碳源既是碳源又是能源有機碳源既是碳源又是能源有機有機碳源碳源糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機酸、石油、花生粉餅等機酸、石油、花生粉餅等氮氮源源無機無機

4、氮源氮源無機氮：無機氮：NH3、銨鹽、硝、銨鹽、硝酸鹽、酸鹽、N2等等將無機氮合成含氮的代謝產(chǎn)物將無機氮合成含氮的代謝產(chǎn)物有機有機氮源氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸尿素、氨基酸合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物產(chǎn)物生長因子生長因子維生素、氨基酸、堿基維生素、氨基酸、堿基酶和核酸的組成成分；酶和核酸的組成成分；參與參與代謝過程中的酶促反應(yīng)代謝過程中的酶促反應(yīng)2.培養(yǎng)基的類型及作用培養(yǎng)基的類型及作用劃分標準劃分標準培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特點特點用途用途物理性質(zhì)物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基不加凝固劑不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)半固體培養(yǎng)基

5、基加凝固劑，加凝固劑，如瓊脂如瓊脂觀察微生物的運動、分類鑒定觀察微生物的運動、分類鑒定固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計數(shù)、保微生物分離、鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種藏菌種用途用途選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基允許特定種類的允許特定種類的微生物生長，同微生物生長，同時抑制或阻止其時抑制或阻止其他微生物生長他微生物生長培養(yǎng)、分離出特定微生物，如培養(yǎng)培養(yǎng)、分離出特定微生物，如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代根據(jù)微生物的代謝特點，在

6、培養(yǎng)謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類的微生物，如用伊紅鑒別不同種類的微生物，如用伊紅美藍培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品美藍培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌中是否有大腸桿菌(若有，菌落呈若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤深紫色，并帶有金屬光澤)3.消毒與滅菌消毒與滅菌(1)消毒和滅菌的區(qū)別消毒和滅菌的區(qū)別條件條件結(jié)果結(jié)果常用的方法常用的方法消消毒毒較為溫和的較為溫和的物理或化學(xué)物理或化學(xué)方法方法僅殺死物體表面或僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體內(nèi)部一部分對人體有害的微生物有害的微生物(不包不包括芽孢和孢子括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴煮沸消毒法、巴

7、氏消毒法、紫外氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消線或化學(xué)藥物消毒法毒法滅滅菌菌強烈的理化強烈的理化因素因素殺死物體內(nèi)外所有殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽的微生物，包括芽孢和孢子孢和孢子灼燒滅菌、干熱灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌、高壓蒸汽滅菌滅菌 用酒精消毒時，用酒精消毒時，70%的酒精殺菌效果最好，原因的酒精殺菌效果最好，原因是：濃度過高，使菌體表面蛋白質(zhì)凝固成一層保護膜，乙醇分是：濃度過高，使菌體表面蛋白質(zhì)凝固成一層保護膜，乙醇分子不能滲入其中；濃度過低，殺菌力減弱。子不能滲入其中；濃度過低，殺菌力減弱。(2)無菌技術(shù)主要操作要求無菌技術(shù)主要操作要求實驗前應(yīng)對操作空間、操作人員消毒，對所用器

8、具和培實驗前應(yīng)對操作空間、操作人員消毒，對所用器具和培養(yǎng)基滅菌。養(yǎng)基滅菌。實驗進行時需在酒精燈火焰周圍無菌區(qū)操作，另外要避實驗進行時需在酒精燈火焰周圍無菌區(qū)操作，另外要避免已滅菌處理材料再次污染。免已滅菌處理材料再次污染。解析：解析：滅菌是指殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和滅菌是指殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子，而消毒僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生孢子，而消毒僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物物(不包括芽孢和孢子不包括芽孢和孢子)。答案：答案：B2下列常用的無菌操作中錯誤的是下列常用的無菌操作中錯誤的是()A無菌操作的目的是防止雜菌污染無菌操作的目的是防止雜

9、菌污染B用酒精擦拭雙手的方法對操作者進行消毒用酒精擦拭雙手的方法對操作者進行消毒C實驗操作過程應(yīng)在酒精燈火焰附近進行實驗操作過程應(yīng)在酒精燈火焰附近進行D玻璃器皿玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿吸管、培養(yǎng)皿)可用酒精擦拭可用酒精擦拭解析：解析：對操作者應(yīng)用較溫和的方法進行消毒。實驗操作過對操作者應(yīng)用較溫和的方法進行消毒。實驗操作過程應(yīng)在酒精燈火焰附近進行，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。程應(yīng)在酒精燈火焰附近進行，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。對無菌操作用到的玻璃器皿要用干熱滅菌的方法徹底消滅其中對無菌操作用到的玻璃器皿要用干熱滅菌的方法徹底消滅其中的微生物，用酒精擦拭不能達到目的。的微生物，用酒精擦拭不能達到目

10、的。答案：答案：D知識點二：土壤中分離尿素的細菌的分離與計數(shù)知識點二：土壤中分離尿素的細菌的分離與計數(shù)1土壤中分解尿素的細菌的分離和計數(shù)土壤中分解尿素的細菌的分離和計數(shù)判斷正誤判斷正誤(1)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。( )(2)篩選分解尿素的細菌應(yīng)以尿素作為培養(yǎng)基中的唯一碳篩選分解尿素的細菌應(yīng)以尿素作為培養(yǎng)基中的唯一碳源。源。 ( )(3)統(tǒng)計樣品中的活菌一般用平板劃線法。統(tǒng)計樣品中的活菌一般用平板劃線法。 ( )(4)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變藍，則說明篩選到分解尿素的細

11、菌。示劑變藍，則說明篩選到分解尿素的細菌。( )復(fù)合酶復(fù)合酶 C1酶、酶、CX酶和葡萄糖苷酶酶和葡萄糖苷酶 纖維二糖纖維二糖 (2)篩選方法篩選方法方法：方法： 染色法，即通過是否產(chǎn)生染色法，即通過是否產(chǎn)生 來來篩選纖維素分解菌。篩選纖維素分解菌。培養(yǎng)基：以培養(yǎng)基：以 為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。剛果紅剛果紅透明圈透明圈纖維素纖維素(3)實驗流程實驗流程土壤取樣：富含土壤取樣：富含 的環(huán)境的環(huán)境選擇培養(yǎng)：用選擇培養(yǎng)：用 培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的數(shù)量的數(shù)量梯度稀釋梯度稀釋纖維素纖維素選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基涂布平板：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上

12、涂布平板：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落：產(chǎn)生挑選產(chǎn)生透明圈的菌落：產(chǎn)生 的菌落周圍出的菌落周圍出現(xiàn)透明圈現(xiàn)透明圈纖維素酶纖維素酶1微生物的純化培養(yǎng)一平板劃線法與稀釋涂布平板法微生物的純化培養(yǎng)一平板劃線法與稀釋涂布平板法方法方法平板劃線法平板劃線法稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法注意注意事項事項(1)接種環(huán)的灼燒：接種環(huán)的灼燒：第一次劃線前：殺死接種環(huán)上的第一次劃線前：殺死接種環(huán)上的微生物，避免污染培養(yǎng)物微生物，避免污染培養(yǎng)物每次劃線前：殺死殘留菌種，保每次劃線前：殺死殘留菌種，保證每次劃線菌種來自上次劃線末端證每次劃線菌種來自上次劃線末端劃線結(jié)束后：殺死殘留菌種，避劃

13、線結(jié)束后：殺死殘留菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者免污染環(huán)境和感染操作者(2)灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后再進灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后再進行操作，以免溫度太高殺死菌種行操作，以免溫度太高殺死菌種(3)劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連域相連(4)劃線用力要大小適當，防止用力劃線用力要大小適當，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破過大將培養(yǎng)基劃破(1)稀釋操作時：每支試管及其中的稀釋操作時：每支試管及其中的9 mL水、移液管等均需滅菌；操作水、移液管等均需滅菌；操作時，試管口和移液管應(yīng)在離火焰時，試管口和移液管應(yīng)在離火焰12 cm處處(2)涂布平板時：涂布平板時：涂布器用體積分數(shù)為涂布

14、器用體積分數(shù)為70%酒精消酒精消毒，取出時，讓多余酒精在燒杯中毒，取出時，讓多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃器在酒精燈火焰上引燃不要將過熱的涂布器放在盛放酒不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精精的燒杯中，以免引燃其中的酒精酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適，移酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適，移液管管頭不要接觸任何物體液管管頭不要接觸任何物體2.統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法(1)顯微鏡直接計數(shù)法顯微鏡直接計數(shù)法原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積

15、的樣品中微生物的數(shù)量。下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。方法：用計數(shù)板計數(shù)。方法：用計數(shù)板計數(shù)。缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。(2)間接計數(shù)法間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法活菌計數(shù)法)原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)就能推測出樣品中大約含有多少活菌。菌落數(shù)就能推測出樣品中大約含有多少活菌。操作操作a設(shè)置重復(fù)組，增強實驗的說服力與準確性。設(shè)置重復(fù)組，增強實驗的說服力與準確性。b為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌

16、落數(shù)在為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)在30300的平板的平板進行計數(shù)。進行計數(shù)。3兩種剛果紅染色法的比較兩種剛果紅染色法的比較優(yōu)點優(yōu)點顯示出的顏色反應(yīng)顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分基本上是纖維素分解菌的作用解菌的作用操作簡便，不存在菌落混雜問操作簡便，不存在菌落混雜問題題缺點缺點操作繁瑣，加入剛操作繁瑣，加入剛果紅溶液會使菌落果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜之間發(fā)生混雜(1)由于在纖維素粉、瓊脂和土由于在纖維素粉、瓊脂和土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)；出現(xiàn)假陽性反應(yīng)；(2)有些微生有些微生物具有降解色素的

17、能力，長時物具有降解色素的能力，長時間培養(yǎng)會降解剛果紅，從而形間培養(yǎng)會降解剛果紅，從而形成明顯的透明圈，這些微生物成明顯的透明圈，這些微生物與纖維素分解菌不易區(qū)分與纖維素分解菌不易區(qū)分(1)選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的濃度，選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的濃度，確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。(2)涉及到的微生物技術(shù)主要有：培養(yǎng)基的配制、無菌操作涉及到的微生物技術(shù)主要有：培養(yǎng)基的配制、無菌操作技術(shù)、稀釋涂布平板法、選擇培養(yǎng)基的作用、土壤取樣等。技術(shù)、稀釋涂布平板法、選擇培養(yǎng)基的作用、土壤取樣等。3可以鑒定出分解尿素的細菌的方法是可以鑒定出分解

18、尿素的細菌的方法是 ()A以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑C以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹試劑試劑D以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑解析：解析：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中，不能分解尿素獲在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中，不能分解尿素獲得氮源的細菌不能生長，而分解尿素的細菌能利用尿素作氮得氮源的細菌不能生長，而分解尿素的細菌能利用尿素作氮源，將尿素分解為氨，使源，將尿素分解為氨，使pH

19、升高。若培養(yǎng)基中加入酚紅指示升高。若培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑將變紅。此培養(yǎng)基既屬于選擇培養(yǎng)基，又屬于鑒別劑，指示劑將變紅。此培養(yǎng)基既屬于選擇培養(yǎng)基，又屬于鑒別培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。答案：答案：A4.如圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序為如圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序為12345。下。下列操作方法正確的是列操作方法正確的是()A操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B劃線操作須在火焰上進行劃線操作須在火焰上進行C在在5區(qū)域中才可以得到所需菌落區(qū)域中才可以得到所需菌落D在在12345區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌解析：解析：本題

20、考查平板劃線操作方法。在每次劃線前后都要本題考查平板劃線操作方法。在每次劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，接對接種環(huán)進行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，接種時劃線操作是在火焰邊進行。在種時劃線操作是在火焰邊進行。在5個區(qū)域中，只要有單個活細個區(qū)域中，只要有單個活細菌，通過培養(yǎng)即可獲得所需菌落。菌，通過培養(yǎng)即可獲得所需菌落。答案：答案：D (2012北京高考北京高考)高中生物學(xué)實驗中，在接種時不進行高中生物學(xué)實驗中，在接種時不進行嚴格無菌操作對實驗結(jié)果影響最大的一項是嚴格無菌操作對實驗結(jié)果影響最大的一項是A將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中將少許干酵母加入到新

21、鮮的葡萄汁中B將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上C將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上D將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上解析：解析：生產(chǎn)果酒和腐乳時對無菌的要求不是很高，接種不生產(chǎn)果酒和腐乳時對無菌的要求不是很高，接種不需要進行嚴格的無菌操作；土壤浸出液中含有多種雜菌，所以需要進行嚴格的無菌操作；土壤浸出液中含有多種雜菌，所以利用選擇培養(yǎng)基篩選土壤浸出液中特定微生物時，不進行嚴格利用選擇培養(yǎng)基篩選土壤浸出液中特定微生物時，不進行嚴格無菌操作也不會影響實驗結(jié)果；植物組織培養(yǎng)技術(shù)成功的關(guān)鍵無菌

22、操作也不會影響實驗結(jié)果；植物組織培養(yǎng)技術(shù)成功的關(guān)鍵是無菌條件，若接種時不進行嚴格無菌操作將可能導(dǎo)致實驗失是無菌條件，若接種時不進行嚴格無菌操作將可能導(dǎo)致實驗失敗，故敗，故C項符合題意。項符合題意。答案：答案：C (1)高溫加熱滅菌，其原理就是使細菌體內(nèi)蛋白高溫加熱滅菌，其原理就是使細菌體內(nèi)蛋白質(zhì)變性，而達到殺滅細菌的作用。質(zhì)變性，而達到殺滅細菌的作用。(2)化學(xué)藥劑的滅菌消毒方法，其作用原理是使細菌體內(nèi)蛋化學(xué)藥劑的滅菌消毒方法，其作用原理是使細菌體內(nèi)蛋白質(zhì)變性，但是化學(xué)物質(zhì)很難透過孢子或芽孢的堅硬外層進入白質(zhì)變性，但是化學(xué)物質(zhì)很難透過孢子或芽孢的堅硬外層進入細胞內(nèi)，因此化學(xué)方法難以消滅孢子和芽

23、孢。細胞內(nèi)，因此化學(xué)方法難以消滅孢子和芽孢。(3)培養(yǎng)基的制作是否合格的驗證：如果未接種的培養(yǎng)基在培養(yǎng)基的制作是否合格的驗證：如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫恒溫箱中保溫12天后無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功天后無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。的，否則需要重新制備。(4)平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的溫度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更的溫度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)；又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。好地揮發(fā)；又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基

24、，造成污染。(5)菌種的保藏菌種的保藏短期保存：固體斜面培養(yǎng)基上短期保存：固體斜面培養(yǎng)基上4保存，菌種易被污染或保存，菌種易被污染或產(chǎn)生變異。產(chǎn)生變異。長期保存：長期保存：20甘油管在冷凍箱中保藏。甘油管在冷凍箱中保藏。請回答：請回答：(1)在配制培養(yǎng)基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為在配制培養(yǎng)基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為Hp含有含有_，它能以尿素作為氮源；若有，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周，則菌落周圍會出現(xiàn)圍會出現(xiàn)_色環(huán)帶。色環(huán)帶。(2)下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是_滅滅菌。菌。A高壓蒸汽高壓蒸汽B紫外燈照射紫外燈照射C70%酒

25、精浸泡酒精浸泡 D過濾過濾(3)步驟步驟X表示表示_。在無菌條件下操作時，先將菌。在無菌條件下操作時，先將菌液稀釋，然后將菌液液稀釋，然后將菌液_到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得目的是為了獲得_菌落。菌落。(4)在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置并放在在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置并放在_中。若不中。若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致_。(5)臨床上用臨床上用14C呼氣試驗檢測人體是否感染呼氣試驗檢測人體是否感染Hp，其基本原，其基本原理是理是Hp能將能將14C標記的標記的_分解為分解為NH3和和14CO。 解析：解析：(1)幽門螺桿菌幽門螺桿菌(Hp)含有脲酶，能以尿素為

26、氮源，在含有脲酶，能以尿素為氮源，在加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)Hp，由于尿素經(jīng)脲酶的，由于尿素經(jīng)脲酶的降解可產(chǎn)生堿性的降解可產(chǎn)生堿性的NH3，NH3能使培養(yǎng)基中的酚紅由紅黃色變成能使培養(yǎng)基中的酚紅由紅黃色變成紅色，故菌落周圍會出現(xiàn)紅色環(huán)帶。紅色，故菌落周圍會出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)由于尿素加熱會分解，由于尿素加熱會分解，對尿素溶液進行滅菌最好用對尿素溶液進行滅菌最好用G6玻璃砂漏斗過濾。玻璃砂漏斗過濾。(3)微生物的分微生物的分離和培養(yǎng)步驟是：配制培養(yǎng)基離和培養(yǎng)步驟是：配制培養(yǎng)基滅菌、倒平板滅菌、倒平板接種接種培養(yǎng)。培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種操作前應(yīng)先將菌液

27、稀釋，然后將菌液涂布為獲得單菌落，接種操作前應(yīng)先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上即可。到培養(yǎng)基平面上即可。 (4)微生物培養(yǎng)時需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若微生物培養(yǎng)時需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，則無法形成單菌落。不倒置培養(yǎng)，則無法形成單菌落。(5)幽門螺桿菌能將幽門螺桿菌能將14C標記的標記的尿素分解為尿素分解為NH3和和14CO2，故臨床上常用，故臨床上常用14C呼氣試驗檢測人體內(nèi)呼氣試驗檢測人體內(nèi)幽門螺桿菌的存在。幽門螺桿菌的存在。答案：答案：(1)脲酶紅脲酶紅(2)D(3)接種涂布單接種涂布單(4)恒溫培養(yǎng)箱無法形成單菌落恒溫培養(yǎng)箱無法形成單菌落(5)

28、尿素尿素選擇培養(yǎng)基及應(yīng)用實例選擇培養(yǎng)基及應(yīng)用實例(1)選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進需要的微生物的生長，目的是從眾需要的微生物的生長，促進需要的微生物的生長，目的是從眾多微生物中分離所需要的微生物。多微生物中分離所需要的微生物。(2)選擇培養(yǎng)基應(yīng)用實例選擇培養(yǎng)基應(yīng)用實例培養(yǎng)基中加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。培養(yǎng)基中加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。培養(yǎng)基中缺乏氮源時，可以分離固氮微生物，因為非固培養(yǎng)基中缺乏氮源

29、時，可以分離固氮微生物，因為非固氮微生物不能在此培養(yǎng)基上生存。氮微生物不能在此培養(yǎng)基上生存。當培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時，也具有分當培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時，也具有分離效果。如石油是唯一碳源時，可以抑制不能利用石油的微生離效果。如石油是唯一碳源時，可以抑制不能利用石油的微生物的生長，使能夠利用石油的微生物生存，達到分離能消除石物的生長，使能夠利用石油的微生物生存，達到分離能消除石油污染的微生物的目的。油污染的微生物的目的。改變微生物的培養(yǎng)條件，也可以達到分離微生物的目改變微生物的培養(yǎng)條件，也可以達到分離微生物的目的，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生的，如將

30、培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。物。 1(2012山東基本能力測試山東基本能力測試)除了高溫加熱以外，其它滅菌除了高溫加熱以外，其它滅菌方法還有方法還有()A紫外線照射紫外線照射B真空包裝真空包裝C用保鮮膜密閉用保鮮膜密閉 D添加防腐劑添加防腐劑解析：解析：滅菌是使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微滅菌是使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物生物(包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子)。本題中真空包裝、添加防腐劑、用保鮮。本題中真空包裝、添加防腐劑、用保鮮膜密閉都起到了抑菌作用，紫外線照射使細菌的蛋白質(zhì)變性，膜密閉都起到了抑菌作用，紫外線照射使細菌的蛋白質(zhì)變性，核酸受破壞，是滅菌

31、方法。核酸受破壞，是滅菌方法。答案：答案：A2(2011重慶高考重慶高考)下列有關(guān)細菌培養(yǎng)的敘述，正確的是下列有關(guān)細菌培養(yǎng)的敘述，正確的是()A在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個菌落含有多種細菌在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個菌落含有多種細菌B在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進細菌生長在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進細菌生長C向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進破傷風(fēng)桿菌的生長向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進破傷風(fēng)桿菌的生長D在半固體培養(yǎng)基中接種細菌培養(yǎng)后可以觀察其運動在半固體培養(yǎng)基中接種細菌培養(yǎng)后可以觀察其運動解析：解析：單個菌落中只含有一種細菌；青霉素能抑制細菌生單個菌落中只含有一種細菌；青霉素能抑制細菌

32、生長，而對真菌沒有影響；破傷風(fēng)桿菌是厭氧型細菌，通入氧氣長，而對真菌沒有影響；破傷風(fēng)桿菌是厭氧型細菌，通入氧氣會抑制其生長。會抑制其生長。答案：答案：D3(2012上海高考上海高考)回答下列關(guān)于微生物和酶的問題。回答下列關(guān)于微生物和酶的問題。高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如圖所示。圖所示。(1)過程稱為過程稱為_，過程是為了過程是為了_。(2)I號培養(yǎng)基稱為號培養(yǎng)基稱為_(按功能分按功能分)；該培養(yǎng)基中除了加；該培養(yǎng)基中

33、除了加入淀粉外，還需加入另一種重要的營養(yǎng)成分入淀粉外，還需加入另一種重要的營養(yǎng)成分_。A瓊脂瓊脂B葡萄糖葡萄糖C硝酸銨硝酸銨D碳酸氫鈉碳酸氫鈉(3)一般對配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌，其中一般對配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌，其中“高壓高壓”是為是為了了_。在高溫淀粉酶運用到工業(yè)生產(chǎn)前，需對該酶的最佳溫度范在高溫淀粉酶運用到工業(yè)生產(chǎn)前，需對該酶的最佳溫度范圍進行測定。圖中的曲線圍進行測定。圖中的曲線表示酶在各種溫度下酶活性相對最表示酶在各種溫度下酶活性相對最高酶活性的百分比。將酶在不同溫度下保溫足夠長的時間，再高酶活性的百分比。將酶在不同溫度下保溫足夠長的時間，再在酶活性最高的溫度下測其殘余酶活性，由此

34、得到的數(shù)據(jù)為酶在酶活性最高的溫度下測其殘余酶活性，由此得到的數(shù)據(jù)為酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即圖中的曲線的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即圖中的曲線。(4)根據(jù)圖中的數(shù)據(jù)，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是根據(jù)圖中的數(shù)據(jù)，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是_。A4050 B5060C6070 D7080(5)據(jù)圖判斷下列敘述錯誤的是據(jù)圖判斷下列敘述錯誤的是_。A該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測出活性該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測出活性B曲線曲線35數(shù)據(jù)點是在數(shù)據(jù)點是在80時測得的時測得的C曲線曲線表明表明80是該酶活性最高的溫度是該酶活性最高的溫度D曲線曲線表明該酶的熱穩(wěn)定性在表明該酶的熱穩(wěn)定性在70之后急劇下降之后急劇下降解析：解析：欲

35、培養(yǎng)和分離嗜熱菌單個菌落可采用稀釋涂布平板欲培養(yǎng)和分離嗜熱菌單個菌落可采用稀釋涂布平板法；法；為稀釋過程，為稀釋過程，為篩選過程；為篩選過程；I號培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，號培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，加入硝酸銨的目的主要是補充氮元素；高溫滅菌的目的是殺死加入硝酸銨的目的主要是補充氮元素；高溫滅菌的目的是殺死包括細菌芽孢等在內(nèi)的全部生物；據(jù)圖可知，工業(yè)生產(chǎn)中該酶包括細菌芽孢等在內(nèi)的全部生物；據(jù)圖可知，工業(yè)生產(chǎn)中該酶的最佳溫度范圍為的最佳溫度范圍為6070。答案：答案：(1)稀釋單個菌落的篩選稀釋單個菌落的篩選(或篩選或篩選)(2)選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基C(3)殺死培養(yǎng)基中的細菌芽孢殺死培養(yǎng)基中的細菌芽孢(4)

36、C(5)A4(2011山東高考山東高考)研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳酸菌素研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳酸菌素(小分子小分子蛋白質(zhì)蛋白質(zhì))均有抑菌作用，兩者的提取及應(yīng)用如圖所示。均有抑菌作用，兩者的提取及應(yīng)用如圖所示。(1)柚皮易焦糊，宜采用柚皮易焦糊，宜采用_法提取柚皮精油，該過法提取柚皮精油，該過程得到的糊狀液體可通過程得到的糊狀液體可通過_除去其中的固體雜質(zhì)。除去其中的固體雜質(zhì)。(2)篩選乳酸菌篩選乳酸菌A時可選用平板劃線法或時可選用平板劃線法或_接種。接種。對新配制的培養(yǎng)基滅菌時所用的設(shè)備是對新配制的培養(yǎng)基滅菌時所用的設(shè)備是_。實驗前需。實驗前需對超凈工作臺進行對超凈工作臺進行_處理。處理。(3)培養(yǎng)基

37、中的尿素可為乳酸菌培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌A生長提供生長提供_。電。電泳法純化乳酸菌素時，若分離帶電荷相同的蛋白質(zhì)，則其分子泳法純化乳酸菌素時，若分離帶電荷相同的蛋白質(zhì)，則其分子量越大，電泳速度量越大，電泳速度_。(4)抑菌實驗時，在長滿致病菌的平板上，會出現(xiàn)以抑菌物抑菌實驗時，在長滿致病菌的平板上，會出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈。可通過測定透明圈的質(zhì)為中心的透明圈?？赏ㄟ^測定透明圈的_來比較柚來比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。解析：解析：柚皮精油宜采用壓榨法進行提取，要除去其中雜質(zhì)柚皮精油宜采用壓榨法進行提取，要除去其中雜質(zhì)可采用過濾法。培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌提供氮源。電泳法可采用過濾法。培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌提供氮源