1、2.2.2單克隆抗體單克隆抗體1、簡述單克隆抗體制備的過程。、簡述單克隆抗體制備的過程。2、了解單克隆抗體在醫學實踐中的應用。、了解單克隆抗體在醫學實踐中的應用。 什么是抗體？抗體是怎什么是抗體？抗體是怎么產生的？么產生的？ 抗體是機體受抗原刺激后抗體是機體受抗原刺激后產生的、并能與該抗原發生產生的、并能與該抗原發生特異性結合的具有免疫功能特異性結合的具有免疫功能的球蛋白。的球蛋白。 知識回顧知識回顧（一）獲得抗體的傳統方法（血清抗體）（一）獲得抗體的傳統方法（血清抗體）1 1、把某種抗原反復注射到動物體內，使動、把某種抗原反復注射到動物體內，使動物產生抗體，然后，從物產生抗體，然后，從動物血

2、清動物血清中分離出所中分離出所需的抗體。需的抗體。2 2、血清抗體的缺點：、血清抗體的缺點： 產量低，純度低，產量低，純度低，特異性差特異性差。為了解決血清抗體產量低、純度低，特異性差這一為了解決血清抗體產量低、純度低，特異性差這一難題，科學家們進行了多年的研究和探索。他們發難題，科學家們進行了多年的研究和探索。他們發現，現，哺乳動物感染病原體后，體內會形成相應的哺乳動物感染病原體后，體內會形成相應的B B淋淋巴細胞。巴細胞。B B淋巴細胞能分泌抗體，凝集或殺死這些病淋巴細胞能分泌抗體，凝集或殺死這些病原體。動物在免疫反應的過程中，體內產生的特異原體。動物在免疫反應的過程中，體內產生的特異性抗

3、體的種類可多達百萬種以上，但是每一個性抗體的種類可多達百萬種以上，但是每一個B B細胞細胞只分泌一種特異性抗體。只分泌一種特異性抗體。所以，要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單所以，要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的一的B淋巴細胞，形成細胞群。淋巴細胞，形成細胞群。1、B淋巴細胞是一種高度分化的細胞，有沒有可能淋巴細胞是一種高度分化的細胞，有沒有可能通過細胞培養進行無限增殖？通過細胞培養進行無限增殖？ 不可能不可能2、我們學過的什么細胞具有這樣的能力？、我們學過的什么細胞具有這樣的能力？癌細胞癌細胞3、有什么辦法讓、有什么辦法讓B淋巴細胞也具有這樣的能力？淋巴細胞也具有這樣的能力？細胞融合細

4、胞融合用用單個單個B B淋巴細胞淋巴細胞進行（無性繁殖）克隆，進行（無性繁殖）克隆，得到的得到的基因型相同基因型相同的的細胞群能夠分泌一種細胞群能夠分泌一種化化學性質單一學性質單一、特異性強特異性強的抗體。的抗體。單克隆抗單克隆抗體的概念：體的概念：（二）單克隆抗體的制備過程（二）單克隆抗體的制備過程1975年設計實驗年設計實驗1984年獲得諾貝爾生理年獲得諾貝爾生理學和醫學獎學和醫學獎單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備例題例題1 1、科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融、科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，經培養可產生大量的單克合，得到雜交細胞，經培養可產生大量的單克隆抗體，與骨

5、髓瘤細胞融合的是（隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是（ ） A A、經過免疫的、經過免疫的B B淋巴細胞淋巴細胞 B B、不經過免疫的、不經過免疫的T T淋巴細胞淋巴細胞 C C、經過免疫的、經過免疫的T T淋巴細胞淋巴細胞 D D、不經過免疫的、不經過免疫的B B淋巴細胞淋巴細胞2. 單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞淋巴細胞誘導融合后，要用特定培養基篩選出雜交瘤細胞，誘導融合后，要用特定培養基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養基上不能存活增殖的細胞是（在這種培養基上不能存活增殖的細胞是（ ） 淋巴細胞小鼠骨髓瘤細胞淋巴細胞小鼠骨髓瘤細胞B淋巴細胞自身融淋巴細

6、胞自身融 合細胞小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞合細胞小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞 雜交瘤細胞雜交瘤細胞 A B C D 1.1.在制備單克隆抗體的過程中，選用在制備單克隆抗體的過程中，選用哪兩種細胞進行融合？為什么選擇這哪兩種細胞進行融合？為什么選擇這兩種細胞？兩種細胞？漿細胞和骨髓瘤細胞漿細胞和骨髓瘤細胞漿細胞能產生漿細胞能產生單一抗體單一抗體，但不能無限，但不能無限增殖；骨髓瘤細胞增殖；骨髓瘤細胞能無限增殖能無限增殖，但不，但不能產生單一抗體。能產生單一抗體。2 2、在這過程中進行了幾次篩選？分、在這過程中進行了幾次篩選？分別在哪個步驟進行篩選？別在哪個步驟進行篩選？兩次篩選。第一次在兩次篩選。

7、第一次在B細胞和骨髓瘤細胞和骨髓瘤細胞融合以后篩選出雜交瘤細胞；細胞融合以后篩選出雜交瘤細胞；第二次在雜交瘤細胞中篩選出能產生第二次在雜交瘤細胞中篩選出能產生所需抗體的雜交瘤細胞。所需抗體的雜交瘤細胞。3 3、單克隆抗體具有哪些優點？、單克隆抗體具有哪些優點？特異性強，靈敏度高，可大量制備特異性強，靈敏度高，可大量制備3 3、動物細胞融合的目的中最重要的是（、動物細胞融合的目的中最重要的是（ ）A A、克服遠緣雜交不親和、克服遠緣雜交不親和 B B、制備單克隆抗體、制備單克隆抗體C C、培育新物種、培育新物種 D D、生產雜種細胞、生產雜種細胞（三）單克隆抗體的應用（三）單克隆抗體的應用1、作

8、為診斷試劑作為診斷試劑：在臨床生化診斷、病理組織定位、在臨床生化診斷、病理組織定位、體內腫瘤的定位等體內腫瘤的定位等, ,與常規抗體相比與常規抗體相比, ,具有具有準確、高效、準確、高效、簡易、快速簡易、快速特點特點.用用抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體抗體做成的做成的“早早孕診斷試劑早早孕診斷試劑盒盒”，靈敏度很高。在妊娠第，靈敏度很高。在妊娠第8天就可以做出診斷。比原來的診天就可以做出診斷。比原來的診斷方法提前了斷方法提前了10天左右，可以避天左右，可以避免孕婦在不知道妊娠的情況下因免孕婦在不知道妊娠的情況下因服用藥物而對胎兒造成不利影響。服用藥物而對胎兒造成不利影

9、響。該方法檢測的準確率在該方法檢測的準確率在90%以上。以上。 2、用于治療疾病和運載藥物用于治療疾病和運載藥物： 主要用于癌癥治療。主要用于癌癥治療。 生物導彈：生物導彈：抗癌細胞的單克隆抗體抗癌細胞的單克隆抗體+ +放射性放射性同位素同位素+ +化學藥物或細胞毒素化學藥物或細胞毒素。（單克隆抗。（單克隆抗體：導向。準確找到癌細胞位置，原位殺死體：導向。準確找到癌細胞位置，原位殺死癌細胞。）癌細胞。）4 4、研究單克隆抗體治療癌癥的思路是（、研究單克隆抗體治療癌癥的思路是（ ）A A利用單克隆抗體特異性地對抗癌細胞利用單克隆抗體特異性地對抗癌細胞 B B以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細胞以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細胞C C抗癌物質在克隆細胞中大量合成抗癌物質在克隆細胞中大量合成D D單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細胞單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細胞結合結合5 5只能使動物細胞融合的常用誘導方法（只能使動物細胞融合的常用誘導方法（ ） A APEGPEG B B滅活的病毒滅活的病毒 C C電刺激電刺激 D D離心離心6 6、“生物導彈生物導彈”是指是指 （ ） A.A.單克隆抗體單克隆抗體 B.B.雜交瘤細胞雜交瘤細胞 C.C.產生特定抗體的產生特定抗體的B B淋巴細胞淋巴細胞 D.D.在單在單克隆抗體克隆抗體上連接抗癌藥物上連接抗癌藥物