1、精選優質文檔-傾情為你奉上 七年制學生機能實驗設計項目申 請 書項 目 名 稱：維生素D對2型糖尿病的影響指導教師： 年級、班級：學生姓名：聯系電話：基礎醫學院 機能學實驗室2010年11 月一、 立題依據及意義（國內外研究現狀、水平和發展趨勢；創新之處和主攻關鍵）糖尿病 （diabetes mellitus）是一種在遺傳和環境因素長期共同作用下，由于胰島素分泌絕對或者相對不足所導致的漸進性蛋白質、脂肪、水和電介質代謝發生紊亂的一系列綜合征，其中以高血糖為主要標志。隨著人們的生活水平的提高、生活方式和飲食結構的變化以及人口老齡化，糖尿病的發病率呈逐年上升趨勢，目前已成為最常見的慢性病之一。而非

2、胰島素依賴性糖尿病的患者約占總數的90%，多發生于四十歲以上的人群和老年人，近年其發病年齡有下降趨勢。如果能夠通過一些方法來降低NIDDM的發病率，那對人們的健康無疑是一大好處。近年來一些調查和研究發現維生素D與糖尿病的發生存在一些關系。國際內科學雜志一篇名為Clinical progress in studies on vitamin D and type 2 diabetes的文章指出：研究發現維生素D與2型糖尿病的發生關系密切.低維生素D血癥的人群中2型糖尿病的發病率明顯增高。芬蘭赫爾辛基國家公共衛生研究所的保羅·克內克特博士說：人們一直認為，維生素含量高可能會增加人們患型糖尿

3、病的風險，但我們的研究并沒有發現這方面的證據。 克內克特博士所進行的追蹤研究中，共有人患上型糖尿病。統計數據顯示，當獲取的血液樣本排除了年齡、性別和季節因素后，血液中維生素含量和罹患型糖尿病的關系與之前的看法截然相反。PubMed中一篇名為The potential to improve diabetes control with vitamin D replacement in African American patients: case report and literature review.文章提到非籍美國黑人患NIDDM的比例較高，同時他們的維生素D缺乏率也很高，而補充維

4、生素D對他們的NIDDM也存在一定的治療作用。但是，以上這些說法是否是放之四海皆準的呢? 所以，針對這一問題，我們小組設計了這項實驗，來探索維生素D對NIDDM的發生究竟有什么作用。我們主要研究維生素D對NIDDM的預防效果，所以實驗分為三組，對照組，糖尿病組，預防組。二、技術路線（動物、藥品、儀器設備、實驗方法） 動物：120只健康雄性大鼠藥品：STZ、1,25-(OH)2D3、檸檬酸鹽緩沖液、花生油、肝素、儀器設備：哺乳動物手術器械一套、注射器、試管、便攜式血糖儀、流式細胞儀、胰島素ELISA 檢測試劑盒實驗步驟：1、模型的建立：隨機選取40只體重在2025g的健康雄性大鼠，連續5d腹腔注

5、射STZ（40 mg·kg-1），分別于注射STZ的第1、2、3、4、6周末各測一次血糖，以血糖水平持續高于11.1mmol/L為判斷成模的標準。造模期間死亡動物不計入統計范圍。2、動物分組：正常對照組，連續5d腹腔注射與糖尿病組等容量檸檬酸鹽緩沖液；糖尿病組，成模大鼠隔日腹腔注射與1,25-(OH)2D3組等容量花生油，共15次；預防組，先隔日腹腔注射1,25-(OH)2D3（5g·kg-1），共15次，然后再連續5d腹腔注射STZ（40 mg·kg-1）。3、樣本采集與處理：各組大鼠斷尾取血便攜式血糖儀檢測血糖水平；實驗結束后采集血清放射免疫法檢測血清胰島素水

6、平，采集胰腺標本免疫組化法觀察胰島細胞Bax和Bcl-xL蛋白表達水平。4、統計學分析：SPSS10.0軟件處理。結果以±s表示。同組內處理前后比較用配對t檢驗。組間比較用完全隨機設計的方差分析，若結果有意義再進行多個樣本均數間比較的SNK-q檢驗（Bax、Bcl-xL陽性率經平方根轉化后再進行統計分析）。糖尿病發病率用fisher確切概率法。P0.05表示差異有顯著性，P0.01表示差異有極顯著性。三、預期結果（研究的總體安排和進度；預期研究成果）記錄實驗結果，觀察動物血糖，血清胰島素水平和胰島細胞Bax和Bcl-xL蛋白表達水平，并作統計學分析。其中血糖濃度是反映預防效果的最重要

7、因素，為主要的觀察項目。而胰島細胞Bax和Bcl-xL蛋白表達水平則可以一定程度上表現出維生素D對胰島B細胞的保護和促進損傷的細胞修復再生的作用。各個指標要綜合來看才能最后下結論。理想的實驗結果預計：若預防組的血糖濃度較糖尿病組低，血清胰島素水平和胰島細胞Bax和Bcl-xL蛋白表達水平較糖尿病組高,則說明維生素D對NIDDM的發生有一定的預防作用。若預防組的血糖濃度較糖尿病組高，血清胰島素水平和胰島細胞Bax和Bcl-xL蛋白表達水平較糖尿病組低,則說明維生素D對NIDDM的發生有一定的促進作用。若結果沒有統計學意義，則說明維生素D與NIDDM的發生關系不大。 四、討論：糖尿病是一種代謝紊亂

8、綜合癥。它是由于胰島素分泌、活性的缺乏或是胰島素抵抗等原因而導致的以高血糖為特征的疾病。主要臨床癥狀為:多尿、多飲、多食、消瘦(三多一少)。WHO推薦糖尿病分為四種類型。1型糖尿病又稱胰島素依賴型糖尿病（IDDM），患者病狀通常出現在兒童或青少年時期。是由各種原因引起的自身免疫機制紊亂所致的胰島B細胞破壞，是胰島素分泌絕對缺乏，血糖升高。2型糖尿病又稱非胰島素依賴性糖尿病（NIDDM）目前認為，2型糖尿病的發病不僅與遺傳因素有關，還與向心性肥胖以及衰老所致的體內自由基生成增多密切相關。2型糖尿病中一部分病人以胰島素抵抗為主，病人多肥胖，因胰島素抵抗，胰島素敏感性下降，初期可能出現血中胰島素增高

9、以補償其胰島素抵抗，隨著病情的發展，出現胰島素抵抗伴胰島素分泌的絕對不足。胰島素抵抗(Insulin Resistance，IR)是指胰島素作用的靶器官對胰島素作用的敏感性下降，即正常劑量的胰島素產生低于正常生物學效應的一種狀態。維生素D可能直接地改善胰島素的作用，主要通過刺激胰島素受體的表達從而增強胰島素對葡萄糖轉運的反應。其間接作用是通過調節細胞外鈣濃度以保證正常的鈣內流來達成的。骨骼肌和脂肪組織維持一個正常的胰島素敏感性所需要的合適的鈣濃度范圍是很窄的，因此鈣濃度波動可能使得這些重要的周圍組織的胰島素信號傳導發生障礙，使得胰島素轉運子4的活性下降，從而導致胰島素抵抗。研究發現維生素D與2

10、型糖尿病的發生關系密切.低維生素D血癥的人群中2型糖尿病的發病率明顯增高.其機制可能是低維生素D抑制胰島素的合成和分泌,加重胰島素抵抗而導致糖尿病的發生發展. 這些效應可能是通過對VDR基因的作用以及對鈣磷平衡的影響而介導的，轉錄因子過氧化酶增殖物活化受體（PPAR）-在其中也扮演一定角色。適當補充維生素D可以增加胰島素的敏感性,降低血糖及減少糖尿病心血管并發癥. 維生素D有保護胰島細胞和促進損傷的細胞修復再生的作用,可改善胰島素敏感性,減輕炎癥反應，這可能源于維生素受體（VDR）介導的免疫調節作用。 而且維生素D與改善2型糖尿病患者的糖脂代謝、腎臟保護作用、防治骨質疏松癥等方面密切相關。五、

11、參考文獻 要求不少于10篇1. 2010 Mar;2(1):36-40. doi: 10.1111/j.1753-0407.2009.00057.x. Epub 2009 Oct 5Lack of effect of subtherapeutic vitamin D treatment on glycemic and lipid parameters in Type 2 diabetes: A pilot prospective randomized trial2.Int J Intem Med, 2009,36:82-83 Zhanglili ,Yuanli Clinical progres

12、s in studies on vitamin D and type 2 diabetes3. Looking for links between the sunshine vitamin and diabetes4.PubMed - in process Tenn Med. 2010 Apr;103(4):35-6. 5、維生素D2型糖尿病的"保護傘" 2009年 第12期 作者: , ,6.、醫學學實用雜志2007：23-12。王婷，徐珊，非胰島素依賴性糖尿病大樹模型的建立7、 > 作者：沈字玲張能余華榮1,25-二羥維生素D3對鏈脲菌素誘導的小鼠1型糖尿病預防作用及機制探討8、 Ezrin蛋白在糖尿病腎病鼠腎小球的表達及活性維生素D對其的影響作者：楊媛媛，鄒敏書，余 健，聶國明， 羅莉漫，徐