實(shí)驗(yàn)九、細(xì)胞骨架的顯示和觀察目的要求1、掌握細(xì)胞骨_第1頁
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1 1、取材:撕取小塊洋蔥鱗莖、取材:撕取小塊洋蔥鱗莖內(nèi)皮內(nèi)皮( (約約1cm1cm2 2大小若干片大小若干片) ) ,浸于,浸于6 6 mmolmmol/L /L PBSPBS中,使其下沉,處理中,使其下沉,處理5-10min5-10min。2 2、抽提:吸去、抽提:吸去PBSPBS,加,加2 ml 1%2 ml 1%的的TritonX-100TritonX-100,于,于3737水浴處理水浴處理30min30min。 3 3、沖洗:、沖洗: 吸去吸去TritonX-100TritonX-100,用,用M M緩沖液緩沖液輕輕洗輕輕洗3 3次,每次次,每次5min5min。4 4、固定:、固定:3%3%戊二醛戊二醛固定固定20min20min。5 5、沖洗:棄戊二醛,用、沖洗:棄戊二醛,用6mmol/L PBS6mmol/L PBS液洗液洗3 3次,每次次,每次5min5min。6 6、染色:吸去、染色:吸去PBSPBS,用,用0.2%0.2%考馬斯亮藍(lán)考馬斯亮藍(lán)R250R250染色染色10min10min。7 7、制片:倒掉染液,用水洗、制片:倒掉染液,用水洗2-32-3次,在載玻片上鋪展開,加蓋玻次,在載玻片上鋪展開,加蓋玻片。鏡檢觀察。片。鏡檢觀察。8 8、實(shí)驗(yàn)繪圖:、實(shí)驗(yàn)繪圖:在光學(xué)顯微

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