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文檔簡介

5、培養基 培養基以新鮮配制為佳，低溫(4儲存不宜超過 1周。 EGF對于促進IEC貼壁十分重要，它與胰島素合用 可促進IEC生長繁殖。 生長基中加入表皮生長因子、胰島素和谷氨酰胺 等更利于原代培養的上皮細胞生長。 6、酸堿度 最適pH因細胞不同及動物種屬不同而異。 最適pH有利于細胞本身的酶及其他生長因子發揮 較好的效果，從而影響體外培養細胞的生存。 IEC培養最適pH值為7274。 IEC的鑒定 用消化酶分離培養的細胞僅憑光學顯微鏡形態學 觀察不能鑒定為IEC，尚需其他較為特意的鑒定方 法。 1、堿性磷酸酶染色法 影響因素多，陽性率低。 2、電鏡法 用電子顯微鏡掃面觀察細胞橋粒和刷狀緣是鑒定 上皮細胞很有效的方法，但價格昂貴。 3、免疫熒光法 采用特異的抗人上皮細胞膜抗原或角蛋白，特異 性強。消化酶從小腸黏膜分離下來的細胞類型主 要有IEC、成纖維細胞和平滑肌細胞，成纖維細胞 和平滑肌細胞上皮細胞膜抗原或角蛋白呈陰性， 故免疫熒光染色檢測陽性的細胞可確定為IEC。

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