1、第3頁共7頁檢測（十八）“生物技術實踐”課后強訓卷1.（1）如圖是利用法進行微生物接種，把聚集的菌種_逐步稀釋分散到培養基的表面得到的結果。'廠,.（2）分析下面培養基的配方：NaNO3、KH2P。4、Na2HPO4、KCl、MgS047H2。、H2O。若此培養基用于篩選分解尿素的細菌，則應除去上述成分，并加入和葡萄糖，以補充源。（3）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和,以提高萃取效率。鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時，通常采用法，在鑒定過程中需要用作為對照。（4）橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸儲時會發生部分水解，使用水中蒸儲法又會產生問題，所以一般采用壓榨法。解析：

2、（1）據圖分析，圖示接種方法為平板劃線法，平板劃線操作就是將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面。（2）題干所給的培養基配方中缺少碳源，氮源是NaN03,若此培養基用于培養分解尿素的細菌，則應該使用以尿素為唯一氮源的選擇培養基，同時尿素分解菌屬于異養型生物，需加入葡萄糖作為碳源。（3）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和干燥，以提高萃取效率。鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時，通常采用紙層析法，在鑒定過程中需要用標準樣品作為對照。（4）橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸儲時會發生部分水解，使用水中蒸儲法又會產生原料焦糊問題，所以一般采用壓榨法。答案：（1）平板劃線（2）NaN03尿素

3、碳源和氮源（3）干燥紙層析標準樣品（4）原料焦糊2.（2018珠海一模）地球上的植物每年產生的纖維素超過70億噸，其中40%60%被土壤中的某些微生物分解利用，這是因為它們能夠產生纖維素酶，某研究小組欲從土壤中分離得到纖維素分解菌，其操作流程如下所示，請回答相關問題。土壤取樣一選擇培養一梯度稀釋一鑒別培養基培養一挑選產生透明圈的菌落（1）研究小組將濾紙埋在土壤里，30天后再從已經腐爛的濾紙上提取土樣篩選纖維素分解菌。請說說這么做的道理是什么？。（2）上述流程成功的關鍵，是選擇培養基的配方中要以為唯一碳源。流程一常用染色法，一過程利用染色法能夠挑選出纖維素分解菌的原因是（3）獲得純凈培養物的關鍵

4、是防止外來雜菌的入侵，無菌技術就是圍繞如何避免雜菌的污染展開的。請列舉幾項該研究小組應該實施的無菌操作（如實驗操作應在酒精燈火焰附近進行）（答出兩點即可）。為了證明培養基是否受到外來雜菌污染。需要設置空白對照，對照培養基的處理是（4）若用稀釋涂布平板法來統計纖維素分解菌落的數量，發現測定的結果往往比實際活菌數量要少，原因是。解析：（1）濾紙富含纖維素，能使纖維素分解菌相對聚集，故研究小組將濾紙埋在土壤里，30天后再從已經腐爛的濾紙上提取土樣能篩選出纖維素分解菌。（2）要篩選出纖維素分解菌，在培養基中應該加入纖維素作為唯一的碳源，流程一常用剛果紅染色法，一過程利用染色法能夠挑選出纖維素分解菌的原

5、因是剛果紅與培養基中的纖維素形成紅色復合物，纖維素分解菌分泌的纖維素酶可以分解纖維素，使培養基中出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，通過透明圈即可挑選纖維素分解菌。（3）獲得純凈培養物的關鍵是防止外來雜菌的入侵，無菌技術是實驗成敗的關鍵，如對實驗操作空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒，對實驗器皿、接種用具和培養基等進行滅菌。為了證明培養基是否受到外來雜菌污染。需要設置空白對照，對照培養基的處理是接種等量的無菌水，置于實驗組相同的環境條件下培養。（4）當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，故用稀釋涂布平板法來統計纖維素分解菌落的數量，測定的結果往往比實際活菌數量要少。答案：（1

6、）濾紙富含纖維素，能使纖維素分解菌相對聚集（或人工設置纖維素分解菌生存的適宜環境）（2）纖維素剛果紅剛果紅與培養基中的纖維素形成紅色復合物，纖維素分解菌分泌的纖維素酶可以分解纖維素，使培養基中出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，通過透明圈即可挑選纖維素分解菌（3）對實驗操作空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒，對實驗器皿、接種用具和培養基等進行滅菌接種等量的無菌水，置于與實驗組相同的環境條件下培養（4）當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落3.根據生物技術實踐的有關知識，回答下列問題：（1）從土壤中分離能分解尿素的細菌時，所用的選擇培養基應以為唯一氮源。分解尿素的細菌由于含有月尿

7、酶，可將而使周圍環境的pH上升，在選擇培養基中加入指示劑，對其進行分離、鑒別。（2）由果酒制作轉為果醋制作時，需要調整的溫度范圍是。在制作腐乳的過程中，加鹽和加酒都能夠抑制。（3）玫瑰精油是制作高級香水的主要成分，其適合用水蒸氣蒸儲法提取，理由是玫瑰精油具有的性質。當蒸儲瓶中的水和原料量一定時，蒸儲過程中影響玫瑰精油提取量的主要因素有蒸儲時間和。如果蒸儲過程中不進行冷卻，則玫瑰精油提取量會下降，原因是。（4）DNA在濃度為mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。使用體積分數為95%的冷卻酒精可使DNA（填“析出”或“溶解”）。解析：（1）從土壤中分離分解尿素的細菌時，應該選用以尿素為唯一氮源的選

8、擇培養基。尿素分解菌合成的月尿酶，將尿素分解成氨，氨會使培養基的堿性增強，pH升高，導致酚紅指示劑變成紅色。（2）酒精發酵時一般將溫度控制在1825C,醋酸發酵時一般將溫度控制在3035C。在制作腐乳過程中，加鹽的目的是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，同時抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質；加酒的目的是抑制微生物的生長，同時使腐乳具有獨特的香味。（3）玫瑰精油具有易揮發、難溶于水、化學性質穩定等性質，故適合用水蒸氣蒸儲法提取。蒸儲時許多因素都會影響產品的品質，如蒸儲溫度、蒸儲時間等。蒸儲過程中要進行冷卻，讓混合物重新分出油層和水層，若不冷卻則會有部分玫瑰精油隨水蒸氣揮發而流失，使玫瑰精油提取

9、量下降。（4）DNA在濃度為0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。使用體積分數為95%的冷卻酒精可使DNA析出。答案：（1）尿素尿素分解成氨酚紅（2）由1825c調整為3035c微生物的生長（3）易揮發、難溶于水、化學性質穩定失（4）0.14 析出蒸儲溫度部分玫瑰精油會隨水蒸氣揮發而流4. 葡萄種植基地為解決葡萄滯銷易腐爛問題，引進果酒、果醋生產線進行葡萄的深加工，獲得了較好效益。其生產流程如圖所示，據圖回答:常福殳果汁一支舄一果p 一發息時 果檎%必果城%品（1）在篩選菌種A時，需要在接種前用法對葡萄果汁進行滅菌。對于需要長期保存的菌種，可以采用的方法。（2）在純化菌種A時接種了5個

10、平板，每個平板均接種了0.1mL樣品并培養。其中乙平板的菌落分布如圖，純化菌種A的接種方法是,推測出現平板乙可能的操作失誤是涂布不均勻。其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落數分別是180、220、480、200,則樣品中菌種A的數量為個/mL,用該方法統計的結果，一般（填“低于”或“高于”）實際值。解析：（1）葡萄果汁作為篩選菌種A時的培養基，需要在接種前用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌；需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏法。（2）分析圖中乙平板的菌落分布特點，可以推知采用的純化方法是稀釋涂布平板法；根據題意，樣品中菌種A的數量為（180+220+200）30.1=2000（個/mL）;由于稀釋涂布平板法

11、的個別菌落可能來自兩個或多個細胞，所以用該方法統計的結果，一般低于實際值。答案：（1）高壓蒸汽滅菌甘油管藏（2）稀釋涂布平板法2000低于5. 青蒿素是從黃花蒿的莖葉中提取的無色針狀晶體，易溶于有機溶劑，不溶于水，不易揮發。請回答以下問題：（1）從黃花蒿中提取青蒿素時，應采用法，所選用的有機溶劑為（填“乙醇”或“乙酸乙酯”），通常在提取前將黃花蒿莖葉進行粉碎和,以提高效率。提取過程中宜采用加熱以防止燃燒、爆炸，加熱時瓶口要安裝裝置，所得液體濃縮前進行。（2）玫瑰精油是從玫瑰花中提取的，其原理是利用水蒸氣將揮發性較強的植物芳香油攜帶出來，形成油水混合的乳濁液呈色，此時向乳濁液中加入氯化鈉，就會出

12、現明顯的分層現象，可用分液漏斗將其分開，然后再加入,經過濾可得到純精油。解析：（1）根據題干信息“青蒿素易溶于有機溶劑、不溶于水、不易揮發”，所以應采用萃取法從黃花蒿中提取青蒿素。乙醇是水溶性有機溶劑，萃取中能與水混溶而影響萃取效果，所以乙醇不能用于青蒿素的萃取；乙酸乙酯不與水混溶，沸點高，因此可用于青蒿素的萃取。通常在提取前將黃花蒿莖葉進行粉碎和干燥，以提高效率。提取過程中宜采用水浴加熱以防止燃燒、爆炸，加熱時瓶口要安裝回流冷凝裝置，所得液體濃縮前進行過濾。（2）玫瑰精油是從玫瑰花中提取的，其原理是利用水蒸氣將揮發性較強的植物芳香油攜帶出來，形成油水混合的乳濁液呈乳白色，此時向乳濁液中加入氯

13、化鈉，就會出現明顯的分層現象，可用分液漏斗將其分開，然后再加入無水硫酸鈉吸水，經過濾可得到純精油。答案：（1）萃取乙酸乙酯干燥水浴回流冷凝（冷凝回流或冷凝）過濾（2）乳白無水硫酸鈉第7頁共7頁6. （2018重慶模擬）下圖是從土壤中篩選產月尿酶細菌的過程。請回答:土墻樣品 培養菜 培養攀 培養密 的種（1）圖中選擇培養基應以為唯一氮源；鑒別培養基還需添加作指示劑，產月尿酶細菌在該培養基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成色。（2）腐乳制作的實驗流程示意圖如下：豆腐長出毛霉一回->|加鹵湯裝瓶|->|密封腌制圖中A代表。在配制鹵湯中酒的含量一般控制在左右。（3）工廠利用蘋果生產

14、果汁、果酒和果醋的大致工藝流程如下：嚴格控制發酵條件是保證發酵正常進行的關鍵，直接關系到是否能得到質量高、產量多的理想產物，通常所指的發酵條件包括（至少寫出兩項）。（4）玫瑰精油的提取實驗中，對初步接收到的乳濁液進行如下處理：玫瑰油與水 的混合物試劑A裝置B過濾較純凈的玫瑰精油試劑A是，試劑C的作用是（5）校樹油一般從新鮮的核樹葉中提取，過程如下：I枝樹葉I由水|r-nI卜囚T混:物H油層卜回亞提取核樹油采用的方法是解析：（1）月尿酶能夠催化尿素分解為氨，故圖中選擇培養基應以尿素為唯一氮源，鑒別培養基還需添加酚紅作指示劑。由于尿素被月尿酶分解成氨，氨會使培養基的堿性增強，pH升高，從而使酚紅指

15、示劑變紅。（2）腐乳制作的實驗流程：豆腐長出毛霉一加鹽腌制一加鹵湯裝瓶一密封腌制。在配制鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右。（3）生產果酒、果醋時需控制的發酵條件包括：溫度、溶氧量、pH等。（4）玫瑰精油的提取實驗中，對初步接收到的乳濁液要先用NaCl改變溶液的密度，使其出現分層現象，然后用分液漏斗獲得含有一定水的油層，再加入無水硫酸鈉，除去玫瑰油中的水分，再過濾除去固體硫酸鈉就可以得到玫瑰精油了。（5）提取核樹油采用的方法是水蒸氣蒸儲法。答案：尿素酚紅紅（2）加鹽腌制12%7. （2018南充模擬）泡菜制作簡單，易于儲存，開胃提神，醒酒去膩，老少適宜，是家喻戶曉的一種佐餐菜肴。以下是有關泡菜

16、制作的一些問題，請分析作答：（1）制備泡菜的鹽水中鹽與清水的質量比約為,鹽水需煮沸并冷卻后才可使用，原因是。（2）在泡菜腌制過程中經常向壇口邊緣的水槽中補充水分目的是提供環境。在發酵初期會有氣泡從壇沿水槽內的水中間歇性溢出，這些氣泡來源于（3）發酵后期，乳酸含量繼續增加，當達到1.2%以上時，發酵速度漸漸變緩甚至停止，主要原因是。（4）若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是。（5）發酵過程中會產生亞硝酸鹽，亞硝酸鹽在特定條件下會轉變成致癌物,所以在發酵過程中應定期測定亞硝酸鹽的含量，以把握取食泡菜的最佳時機。亞硝酸鹽含量的檢測方法是,在檢測泡菜中亞硝酸鹽含量的實驗中，必須先制備已知濃度的,將

17、顯色反應后的樣品與其進行比對。解析：（1）制備泡菜的鹽水中鹽與清水的質量比約為1：4,鹽水需煮沸并冷卻后才可使用，加熱煮沸是為了殺滅雜菌，冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響。（2）在泡菜腌制過程中，經常向壇口邊緣的水槽中補充水分目的是提供無氧環境。在發酵初期會有氣泡從壇沿水槽內的水中間歇性溢出，這些氣泡是微生物呼吸作用產生的氣體和泡菜壇中剩余的空氣。（3）發酵后期，乳酸含量繼續增加，當達到1.2%以上時，pH過低會抑制了乳酸菌的生長，從而使發酵速度漸漸變緩甚至停止。（4）若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能是鹽過多抑制了乳酸菌發酵。（5）發酵過程中會產生亞硝酸鹽，亞硝酸鹽在特定

18、條件下會轉變成致癌物亞硝胺，所以在發酵過程中應定期測定亞硝酸鹽的含量，以把握取食泡菜的最佳時機。亞硝酸鹽含量的測定利用比色法，在檢測泡菜中亞硝酸鹽含量的實驗中，必須先制備已知濃度的標準顯色液，將顯色反應后的樣品與其進行比對。答案：（1）1：4加熱煮沸是為了殺滅雜菌，冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響（2）無氧微生物呼吸作用產生的氣體和泡菜壇中剩余的空氣（3）pH過低抑制了乳酸菌的生長（4）鹽過多抑制了乳酸菌發酵（5）亞硝胺比色法標準顯色液8. （2018遂寧模擬）檸檬是常用的食品、工業原料，利用檸檬可生產檸檬果汁、檸檬精油、檸檬酒、檸檬醋、檸檬果醬等。利用有關知識回答下列問題。因是。為了提高出油率，要將檸檬皮,并用石灰水浸泡。（2）如果用檸檬的果肉來生產檸檬酒，需要接種酵母菌，從混雜的微生物中分離出酵母菌應使用培養基。檸檬醋的生產是利用了的發酵作用，當檸檬酒流經檸檬醋發酵瓶時，。2消耗和CO2產生的情況是。（3）檸檬果醬是利用檸檬果汁加糖熬制的甜蜜醬，以家庭生產玻璃瓶裝檸檬果醬為例，如何做到減少甚至避免雜菌污染？（答3點）。解析：（1）用檸檬皮提取檸檬精油時，一般采用壓榨法，采用水蒸氣蒸儲法會由于