1、直擊考綱1.微生物的分離和培養。2.培養基對微生物的選擇作用。3.利用微生物發酵來生產特定的產物。4.從生物材料中提取某些特定的成分。5.運用發酵加工食品的基本方法。6.植物的組織培養?？键c39微生物的利用1判斷下列有關微生物的培養與應用的敘述(1)常用液體培養基分離獲得細菌單菌落(2012·大綱全國，5B)(×)(2)用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養基，經高溫、高壓滅菌后倒平板(2009·安徽，6A)()(3)純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法(2011·新課標全國，39節選)()(4)測定培養液中微生物數量，可選用顯

2、微鏡直接計數法計數(2010·山東，34節選)()(5)玉米秸稈中的纖維素經充分水解后的產物可被酵母菌利用發酵生產酒精。培養酵母菌時，該水解產物為酵母菌的生長提供碳源。發酵過程中檢測酵母菌數量可采用顯微鏡直接計數法或稀釋涂布平板法計數(2014·山東，35節選)()2(2013·新課標全國，39)臨床使用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實驗步驟操作，以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉栴}：(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用_法或_法將樣本接種于固體培養基表面，經過選擇培養、鑒別等步驟獲得。(2)

3、取該單菌落適當稀釋，用_法接種于固體培養基表面，在37 培養箱中培養24 h，使其均勻生長，布滿平板。(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D 四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養一段時間后，含A的濾紙片周圍出現透明圈，說明該致病菌對抗生素A_；含B的濾紙片周圍沒有出現透明圈，說明該致病菌對抗生素B_；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明_；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的_。(4)根據上述實驗結果，為達到抗菌目的，最好應選用抗生素_。答案(1)劃線(平板劃線)稀釋涂布(

4、或涂布)(2)涂布(3)敏感不敏感該致病菌對C的敏感性比對A的弱耐藥菌(4)A解析(1)微生物純化的方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)根據微生物的特點對其進行一系列濃度梯度稀釋，然后用涂布法接種于固體培養基表面，再在適宜條件下培養。(3)對某種抗生素越敏感的致病菌，在該抗生素存在的范圍內越不易生存，形成的透明圈就越大。故含A的濾紙片周圍出現透明圈，說明有抗生素A的地方該致病菌受到抑制；B的周圍沒有透明圈，說明致病菌對抗生素B不敏感，通過含C的透明圈要比A的透明圈小，說明該致病菌對C的敏感性比A的弱；D出現了透明圈，說明該致病菌對D敏感，但是在透明圈上出現一個菌落，又排除雜菌污染，判斷

5、此菌落的微生物對抗生素D產生了耐藥性。(4)根據以上分析，為達到抗菌的目的，最好選擇抗生素A。3(2013·四川，10節選)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人將地衣芽孢桿菌的淀粉酶基因轉入酵母菌中，經篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種(過程如圖甲所示)。(1)圖甲中，過程需要的酶有_。為達到篩選目的，平板內的固體培養基應以_作為唯一碳源。、過程需重復幾次，目的是_。(2)某同學嘗試過程的操作，其中一個平板經培養后的菌落分布如圖乙所示。該同學的接種方法是_；推測該同學接種時可能的操作失誤是_。(3)以淀粉為原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發酵，接種_菌的發

6、酵罐需要先排氣，其原因是_。答案(1)限制性核酸內切酶、DNA連接酶淀粉進一步篩選純化獲得分解淀粉能力強的酵母菌(2)稀釋涂布平板法涂布不均勻(3)工程酵母工程酵母菌分解淀粉產生葡萄糖的能力強，導致酒精發酵產生CO2的速率更快解析(1)圖甲中過程為構建基因表達載體，需要的酶有限制性核酸內切酶及DNA連接酶；欲篩選可直接利用淀粉的菌種，宜制備以淀粉為唯一碳源的選擇培養基；圖示、過程需重復幾次，其作用在于“純化”，從而進一步篩選出分解淀粉能力更強的酵母菌。(2)圖乙所示培養基平板中的菌落呈分散分布，應為采用稀釋涂布平板法接種的結果，然而，該平板上菌落并非“均勻分布”而是相對集中于左側，這可能是由于

7、制作平板時“涂布不均勻”所致。(3)若以“淀粉”為原料，則相對于普通菌種，工程酵母菌因轉入了淀粉酶基因，其利用淀粉的能力將更強，故發酵產生CO2的能力更強，因此需要先排氣。1微生物的培養(1)無菌技術：主要包括消毒和滅菌。消毒方法：常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。常用滅菌方法：灼燒滅菌接種環、接種針等金屬器具；干熱滅菌主要針對玻璃器皿等；高壓蒸汽滅菌主要針對培養基等。(2)如圖為倒平板操作過程，操作時要待培養基冷卻至50 左右時，在酒精燈火焰附近進行。制備固體培養基最后要將平板倒置，其主要目的是防止培養皿蓋上的水珠滴入培養基造成污染。(3)平板劃線操作(4)稀釋涂布平板法：先將菌液進行一系列梯度稀

8、釋后涂布平板，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而在培養基表面形成單個菌落。如圖所示：2某種微生物的分離與計數(1)分離選擇培養基培養基中加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。培養基中加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。培養基中缺乏氮源時，可以分離得到固氮微生物。當培養基的某種營養成分為特定化學成分時，也具有分離效果。改變微生物的培養條件，也可以達到分離微生物的目的，如將培養基放在高溫環境中培養只能得到耐高溫的微生物。(2)計數土壤中分解尿素的細菌的分離與計數a篩選菌株：利用以尿素為唯一氮源的選擇培養基篩選菌株。b計數方法：活菌計數法和顯微鏡直接計數法。前者為了增強

9、實驗的說服力和準確性，則需設置重復組，一般選擇菌落數在30300的平板進行計數。c過程：土壤取樣樣品的稀釋微生物的培養與觀察。分解纖維素的微生物的分離a實驗原理即：可根據是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。b流程：土壤取樣選擇培養梯度稀釋涂布平板挑選菌落。(3)鑒定方法鑒定分解尿素的細菌含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養基細菌指示劑變紅，則該菌能分解尿素鑒定纖維素分解菌1下列有關實驗室中微生物培養和分離的敘述，錯誤的是()A獲得純凈培養物的關鍵是防止外來雜菌的入侵B高溫滅菌的目的是殺死所有微生物C劃線分離可在培養基上獲得均勻分布的單菌落D稀釋涂布平板法可用于計數活菌數目答案C解析微生物培養過程中

10、要進行無菌操作，防止外來雜菌的入侵，A正確；高溫滅菌可殺死所有微生物，B正確；劃線分離可在培養基上獲得逐漸變稀分布的單菌落，C錯誤；稀釋涂布平板法中根據菌落的數目可計數活菌數目，D正確。2某學者欲研究被石油污染過的土壤中細菌數量，并從中篩選出能分解石油的細菌。下列操作錯誤的是()A利用平板劃線法對細菌進行計數B以石油為唯一碳源的培養基篩選C采用稀釋涂布平板法分離菌種D稱取和稀釋土壤時應在火焰旁答案A解析稀釋涂布平板法有利于將細菌分離形成單個菌落，利于計數，因此，如果是通過菌落數來估算細菌的數量，應該采用稀釋涂布平板法對細菌進行計數；要篩選出能分解石油的細菌，應該采用選擇培養基，即以石油作為唯一

11、碳源進行培養，在這種培養基上只有能分解石油的細菌才能生長繁殖；操作時要無菌操作，稱取和稀釋土壤應在火焰旁。3下列關于微生物的營養，說法正確的是()A同一種物質不可能既作碳源又作氮源B凡是碳源都能提供能量C除水以外的無機物僅提供無機鹽D無機氮源也可能提供能量答案D解析此題考查我們對微生物的營養和能源的理解。對一些微生物來說，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源。CO2是光能自養細菌的碳源，但不能提供能量。CO2和N2是無機物，也是微生物的碳源和氮源。硝化細菌所利用的氮源是無機氮源氨，同時氨也為硝化細菌提供用以化能合成作用的能源。4下列對無菌操作轉接培養物的操作順序的敘述，正確的是()接種環

12、在火焰上灼燒滅菌在火焰旁冷卻接種環，并打開棉塞打開棉塞的試管口通過火焰將已冷卻的接種環伸入菌液，沾取一環菌液轉移到一裝有無菌培養基的試管中將試管口塞上棉塞接種環再次灼燒滅菌A BC D答案C5(2014·新課標全國，39)為了調查某河流的水質狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養了一段時間，這樣做的目的是_；然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經適當培養后，3個平板上的菌落數分別為39、38和3

13、7。據此可得出每升水樣中的活菌數為_。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環通過_滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是_。(3)示意圖A和圖B中，_表示的是用稀釋涂布平板法接種培養后得到的結果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養基中并混勻，一部分進行靜置培養，另一部分進行振蕩培養。結果發現：振蕩培養的細菌比靜置培養的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養能提高培養液中_的含量，同時可使菌體與培養液充分接觸，提高_的利用率。答案(1)檢測培養基平板滅菌是否合格3.8×107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3

14、)B(4)溶解氧營養物質解析(1)為了檢測培養基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機取滅菌后的空白平板先行培養一段時間。0.1 mL稀釋液中平均有(393837)/338個活菌，則每毫升稀釋液中活菌的數目為38/0.1380，則稀釋前每毫升水樣中活菌數目為380×1003.8×104，則每升水樣中活菌數目為3.8×104×1 0003.8×107。(2)接種環、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，以達到迅速徹底滅菌的目的。在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。(3

15、)比較圖A和圖B可以看出：A培養基中細菌的分布呈線性，是用平板劃線法接種培養后得到的結果；B培養基中細菌均勻分布，是用稀釋涂布平板法接種培養后得到的結果。(4)振蕩培養可以提高培養液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養液充分接觸，提高了營養物質的利用率，因此振蕩培養的細菌比靜置培養的細菌生長速度快。6(2014·四川，10)有機農藥苯磺隆是一種除草劑，長期使用會污染環境。研究發現，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲、圖乙所示。(1)微生物生長繁殖所需的主要營養物質有碳源、水、_四類，該實驗所用的選擇培養基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因

16、是_。(2)與微生物培養基相比，植物組織培養的培養基常需添加生長素和_，這些植物激素一般需要事先單獨配制成_保存備用。(3)純化菌株時，通常使用的劃線工具是_。劃線的某個平板培養后，第一劃線區域的劃線上都不間斷地長滿了菌，第二劃線區域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有_。(4)為探究苯磺隆的降解機制，將該菌種的培養液過濾離心，取上清液做圖乙所示實驗。該實驗的假設是_，該實驗設計是否合理？為什么？_。答案(1)氮源和無機鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長繁殖(2)細胞分裂素母液(3)接種環接種環灼燒后未冷卻；劃線未從第一區域末端開始(4)目的菌株能分泌降解

17、苯磺隆的蛋白質不合理，缺少空白對照解析(1)微生物生長繁殖需要的主要營養物質包括碳源、氮源、水和無機鹽四類。根據題意可知，土壤中某些微生物有降解苯磺隆的能力，該實驗的目的是探索其降解機制，因此，需要分離出有降解苯磺隆能力的土壤中的某些微生物，故選擇培養時為了排除其他碳源的干擾，培養基中唯一碳源只能是苯磺隆。(2)與微生物培養基相比，植物組織培養的培養基需要添加生長素和細胞分裂素，用于調節植物細胞再分化；這些植物激素一般需要事先單獨配制成母液保存備用。(3)純化菌株時，通常使用的劃線工具是無菌接種環。劃線的平板培養后，發現第一劃線區域的劃線上不間斷地長滿了菌，第二劃線區域所劃的第一條線上無菌落，

18、而其他劃線上有菌落。造成此現象的原因可能有兩個：一是接種環灼燒后未冷卻，菌種接觸到高溫的接種環而死亡；二是劃第二劃線區域第一條線時未從第一區域末端開始。(4)根據圖乙所示實驗中的上清液加入蛋白酶溶液推測，實驗目的是探究目的菌株是否能分泌降解苯磺隆的蛋白質，實驗設計不合理之處是缺少不加蛋白酶溶液、其他條件同圖乙的空白對照。7研究被石油污染過的土壤中細菌數量，并從中篩選出能分解石油的細菌。為了分離和純化高效分解石油的細菌，科研人員利用被石油污染過的土壤進行如圖A所示的實驗。(1)配制好的培養基通?？梢允褂胈法滅菌。與步驟中培養基成分相比，步驟中培養基成分的最大區別是_。(2)接種細菌常用的方法有_

19、。若經過過程后獲得的結果為圖B所示，則所操作方法如圖_所示。(3)步驟后取樣測定石油含量的目的是_。對步驟某瓶中細菌計數的方法有兩種，一種方法是_，其菌落數可代表活菌數；另一種方法是_，該方法需要借助一塊特殊的載玻片，其名稱為_。答案(1)高壓蒸汽滅菌石油是唯一碳源(2)平板劃線法和稀釋涂布平板法甲(3)篩選出分解石油能力最好的細菌稀釋涂布平板法顯微鏡直接計數(血細胞計數板計數法)血細胞計數板(血球計數板)解析(1)培養基滅菌用高壓蒸汽滅菌，為篩選出能分解石油的細菌，所以石油是唯一碳源。(2)接種細菌常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。圖B為平板劃線法，如圖甲所示。(3)步驟進一步操作是為

20、篩選出分解石油能力最好的細菌，微生物計數可用稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數法(血細胞計數板計數法)?？键c40微生物在傳統發酵技術中的應用1判斷下列有關傳統發酵技術的敘述(1)在果酒發酵后期擰開瓶蓋的間隔時間可延長(2012·江蘇，21A)()(2)在家庭中用鮮葡萄制作果酒時，讓發酵裝置接受光照并放在45 處(2010·北京，1AD)(×)(3)在果酒和果醋制作過程中，果酒的制作過程是在缺氧條件下，而果醋整個制作過程一直處于有氧條件下(2010·江蘇，7AC改編)(×)(4)與果醋、果酒制作相比，腐乳的制作所需要的適宜溫度最高，所用菌種為乳酸菌(

21、2011·江蘇，3AC改編)(×)(5)在腐乳制作過程中必須有能產生蛋白酶的微生物參與，所用豆腐的含水量為70%左右，水分過多腐乳不易成形(2008·江蘇，17AB改編)()2(2013·江蘇，14)某研究性學習小組以櫻桃番茄為材料進行果酒、果醋發酵實驗。下列相關敘述正確的是()A酵母菌是嗜溫菌，所以果酒發酵所需的最適溫度較高B先供氧進行果醋發酵，然后隔絕空氣進行果酒發酵C與人工接種的發酵相比，自然發酵獲得的產品品質更好D適當加大接種量可以提高發酵速率、抑制雜菌生長繁殖答案D解析醋酸菌是嗜熱菌，果醋發酵所需的最適溫度較高，A錯誤；進行果酒、果醋發酵實驗，

22、要先隔絕空氣進行果酒發酵，再供氧進行果醋發酵，B錯誤；人工接種的菌種品質更好，且不容易存在雜菌污染，故比自然發酵獲得的產品品質更好，C錯誤；適當加大接種量，讓菌體快速形成優勢菌群，可以抑制雜菌生長，提高發酵速率，D正確。3(2013·新課標全國，39)回答下列有關泡菜制作的習題：(1)制作泡菜時，所用鹽水需煮沸，其目的是_。為了縮短制作時間，有人還會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液，加入陳泡菜液的目的是_。(2)泡菜制作過程中，乳酸發酵的過程即為乳酸菌進行_的過程。該過程發生在乳酸菌細胞的_中。(3)泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有_、_和_等。(4)從開始制作到泡菜品質最佳這

23、段時間內，泡菜液逐漸變酸。這段時間內泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長規律是_，原因是_。答案(1)殺滅雜菌增加乳酸菌數量(2)無氧呼吸細胞質(3)溫度腌制時間食鹽用量(4)乳酸菌數量增多，雜菌數量減少乳酸菌比雜菌更為耐酸解析根據泡菜制作過程中乳酸菌的來源、呼吸類型、呼吸產物所引起的環境變化回答相應問題，還要注意每步操作的目的以及一些相關物質的變化。微生物在傳統發酵技術中的應用項目內容果酒和果醋的制作腐乳制作泡菜制作作用菌類果酒：酵母菌果醋：醋酸菌毛霉乳酸菌原理(1)酵母菌在無氧條件下將葡萄糖氧化成乙醇；(2)醋酸菌在有氧條件下將乙醇氧化為醋酸毛霉將蛋白質、脂肪分解成小分子有機物乳酸菌將糖轉化為乳

24、酸原料選擇新鮮葡萄(或蘋果)豆腐大白菜、花椰菜等新鮮干凈的蔬菜實驗流程讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制制泡菜：裝壇發酵成品操作注意事項材料選擇與處理；防止發酵液污染，控制好發酵條件材料用量；防止雜菌污染；控制溫度及酒精含量泡菜壇的選擇；腌制條件(無氧)共同點都是天然的發酵，利用了微生物新陳代謝過程中代謝產物的作用或直接獲取代謝產物1下列有關傳統果酒、果醋發酵和腐乳制作的比較正確的是()A果酒、腐乳發酵的主要微生物屬于真核生物，果醋發酵菌種屬于原核生物B果酒制成后只需將裝置轉移至溫度較高的環境中即可制作果醋C果酒和果醋發酵在無氧環境下進行，腐乳發酵在有氧條件下進行D果酒、果醋和腐乳制作

25、過程利用的都是微生物胞內酶答案A解析果酒發酵的微生物是酵母菌，為真核生物，腐乳發酵的微生物是毛霉，為真核生物，果醋發酵的微生物為醋酸菌，為原核生物，故A正確；果酒制成后轉移至較高溫度的環境中，還需要通入氧氣，才可以制作果醋，故B錯誤；果酒發酵在無氧條件下進行，而果醋和腐乳發酵都需要有氧條件，故C錯誤；制作果酒、果醋利用的是微生物的胞內酶，腐乳利用的是微生物的胞外酶(主要是毛霉分泌的蛋白酶和脂肪酶)，故D錯誤。2利用如圖裝置制作果酒和果醋，下列敘述正確的是()A制作果酒時應關閉閥b，適時打開閥a幾秒鐘B制作果酒時如果關閉閥a，打開閥b，會導致爆瓶C制作果醋時需打開閥a通氣，打開閥b排氣D制作果醋

26、時把發酵裝置放到25 環境中比較適宜答案A解析圖示裝置中，閥a控制排氣，閥b控制進氣，所以制作果酒時應關閉閥b，適時打開閥a幾秒鐘以排出產生的氣體；如果關閉閥a，打開b，產生的氣體不能排出，會使發酵液從右側導管排出，不會導致爆瓶；制作果醋時，打開閥a是為了排氣，打開閥b是為了通氣；制作果醋時發酵裝置應放到3035 環境中比較適宜。3下列關于腐乳制作的敘述中，錯誤的是()A毛霉可利用蛋白酶將蛋白質分解成小分子肽和氨基酸B豆腐胚表面有毛霉、青霉、曲霉等微生物，它們之間存在競爭關系C腐乳的前期制作溫度應控制在1518 環境條件下D加入較多的香辛料既能調味又能縮短腐乳成熟的時間答案D解析制作腐乳主要是

27、利用毛霉等微生物產生的蛋白酶和脂肪酶將豆腐內的蛋白質分解成小分子肽和氨基酸，脂肪分解成甘油和脂肪酸，從而改變豆腐的成分和口味；豆腐胚表面長有毛霉、青霉、曲霉等微生物，它們都利用豆腐內的營養來維持生命活動，因而存在競爭關系；毛霉生長的適宜溫度是1518 ；加入較多的香辛料能調味，殺菌防腐，酒精含量越高，對蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長。4用酵母菌使葡萄汁產生葡萄酒，當酒精含量達到12%16%時，發酵就停止了。有關敘述不正確的是()A酒精對酵母菌有毒害作用，后期細胞生命活動減弱B產生酒精的同時也有CO2生成，所以發酵過程中需擰松瓶蓋放氣C產物積累使pH值下降，同時營養物質減少，種群數量下

28、降D氧氣過少導致其無法呼吸，細胞中即無法合成ATP答案D解析酒精具有消毒的作用，對酵母菌同樣有毒害作用，A正確；產生酒精的同時也有CO2生成，所以發酵過程中需擰松瓶蓋放氣，B正確；酒精發酵過程中，產物積累使pH值發生改變，營養物質減少，種群數量下降，C正確；酒精發酵是在無氧條件下，不需要氧氣，D錯誤。5某生物興趣小組的同學利用新鮮蘋果榨取果汁并制作果酒，簡要流程如下：發酵果酒(1)實驗過程中，有同學發現榨取的果汁非常渾濁，解決的方法是_。(2)分離酵母菌應使用_培養基，固定化酵母細胞常采用_法。(3)酵母菌的酒精發酵過程一般控制在_溫度范圍最適合酵母菌繁殖，請簡要說明理由_。(4)在酸性條件下

29、，可用_來檢測發酵產物中是否有酒精產生。若想進一步檢測所得果酒中酵母菌的密度，可采用_法。(5)果汁為酵母菌的生長和繁殖提供的營養成分是_。(6)發酵完成后，生物興趣小組同學制作的果酒品質非常好。為了方便后續年級使用，可將菌液_保存。答案(1)用果膠酶處理(2)選擇包埋(3)1825 在此溫度下，酶的活性最強，代謝最旺盛(4)重鉻酸鉀稀釋涂布平板(5)碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子等(6)轉移到甘油中，與甘油充分混合后，放在20 的冷藏箱中解析(1)果膠是植物細胞壁以及胞間層的主要組成成分之一，若發現榨取的果汁非常渾濁，用果膠酶處理，可使果汁變得澄清。(2)分離酵母菌應使用選擇培養基，因為細

30、胞比酶分子大，故制備固定化細胞時常采用包埋法。(3)酵母菌進行酒精發酵的適宜溫度是1825 ，(4)果汁發酵后，可以用重鉻酸鉀來檢驗是否有酒精生成，在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應呈灰綠色，稀釋涂布平板法能用于酵母菌的計數。(5)微生物的營養物質有碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子等，故果汁為酵母菌的生長和繁殖提供的營養成分是碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子等。(6)長期保存菌種應將菌種轉移到甘油中，與甘油充分混合后，放在20 的冷藏箱中。6葡萄糖經酒精發酵可以產生葡萄酒，進一步經醋酸發酵可以產生葡萄醋，請利用相關的知識回答問題：(1)從將葡萄汁裝入發酵瓶到酒精發酵完畢的過程中，酵母菌進行的細胞

31、呼吸方式是_。(2)甲、乙兩位同學將葡萄榨成汁后分別裝入相應的發酵瓶中，在溫度等適宜的條件下進行發酵，如下圖所示。在排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接，其目的是_。請找出圖中實驗操作的錯誤：甲圖中的錯誤是_，乙圖中的錯誤是_。(3)為了提高果酒的品質，更好地抑制其他微生物的生長，常常加入人工培養的酵母菌。為了分離純化酵母菌，最簡便的接種方法是_。(4)若果汁中混雜有醋酸菌，在果酒發酵旺盛時，醋酸菌_(能/不能)將果汁中的糖發酵形成醋酸，其原因是_。答案(1)有氧呼吸、無氧呼吸(2)防止空氣中的微生物污染發酵瓶甲：未夾住發酵瓶的進氣管乙：瓶中發酵液過多，淹沒了排氣管在瓶內的管口(3)平板劃

32、線法(4)不能果酒發酵時的缺氧環境能抑制醋酸菌生長，果酒發酵的最適溫度也低于醋酸菌生長的最適溫度解析(1)利用葡萄汁制作葡萄酒，裝入發酵瓶后，一開始酵母菌進行有氧呼吸，迅速增加數量，隨著氧氣消耗，后期進行無氧呼吸，產生酒精。(2)為防止空氣中的微生物污染發酵瓶，在排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接。甲圖中未夾住發酵瓶的進氣管，這樣酵母菌會一直進行有氧呼吸，不能產生酒精；乙圖中瓶中發酵液過多，淹沒了排氣管在瓶內的管口，這樣不能排出氣體，可能會排出發酵液。(3)分離純化酵母菌，常用的接種方法是平板劃線法。(4)醋酸菌進行有氧呼吸，若果汁中混雜有醋酸菌，在果酒發酵旺盛時，果酒發酵時的缺氧環境能

33、抑制醋酸菌生長，同時果酒發酵的最適溫度也低于醋酸菌生長的最適溫度，所以醋酸菌不能將果汁中的糖發酵形成醋酸。7腐乳是我國古代勞動人民創造出的一種經過微生物發酵的大豆食品。下面是腐乳制作的流程示意圖：讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制(1)現代科學研究表明，許多種微生物參與了豆腐的發酵，其中起主要作用的是毛霉，毛霉是一種_狀真菌。(2)腐乳制作的原理是_。(3)傳統的制作過程中，豆腐塊上生長的毛霉來自_。而現代的腐乳生產是在嚴格的無菌條件下，將優良的毛霉菌種接種在豆腐上，這樣可以_。(4)加鹽的作用是_和_。(5)鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的，加酒的作用是_和_。答案(1)絲(2)毛霉

34、等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶能將脂肪水解成甘油和脂肪酸(3)空氣中的毛霉孢子避免其他菌種的污染，保證產品的質量(4)析出豆腐中的水分，使豆腐變硬抑制微生物的生長，避免豆腐腐敗變質(5)抑制微生物的生長使腐乳具有獨特的風味解析(1)毛霉是一種絲狀真菌。(2)腐乳的制作原理是毛霉等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶能將脂肪水解成甘油和脂肪酸。(3)傳統的腐乳制作過程中，不接種微生物，只能來自空氣中的毛霉孢子；現代的腐乳生產在無菌條件下進行操作，可以防止雜菌污染，保證產品質量。(4)制作腐乳的過程中，加鹽的作用有兩方面：析出

35、豆腐中的水分，使豆腐變硬；抑制微生物的生長，避免豆腐腐敗變質。(5)鹵湯中加酒的作用有兩方面：抑制微生物的生長和使腐乳具有獨特的風味?？键c41植物有效成分的提取1判斷下列關于植物有效成分提取的敘述(2011·海南，30和2008·寧夏，37改編)(1)薄荷油是揮發性物質，提取薄荷油時應選用干薄荷葉作原料，可采用水蒸氣蒸餾法提取(×)(2)用萃取法提取薄荷油時，采用的溶劑是乙醚，原理是薄荷油易溶于有機溶劑乙醚中()(3)萃取法提取胡蘿卜素的主要步驟是：干燥、粉碎、萃取、濃縮、過濾(×)(4)在胡蘿卜顆粒的加熱干燥過程中，溫度過高和時間過長會導致胡蘿卜素分解

36、()(5)提取的胡蘿卜素可通過紙層析法進行鑒定，在鑒定過程中不需要對照(×)2(2013·山東，34)胡蘿卜素是一種常用的食用色素，可分別從胡蘿卜或產胡蘿卜素的微生物菌體中提取獲得，流程如下：(1)篩選產胡蘿卜素的酵母菌R時，可選用_或平板劃線法接種。采用平板劃線法接種時需先灼燒接種環，其目的是_。(2)培養酵母菌R時，培養基中的蔗糖和硝酸鹽可分別為酵母菌R的生長提供_和_。(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，干燥過程應控制好溫度和_以防止胡蘿卜素的分解；萃取過程中宜采用_方式加熱以防止溫度過高；萃取液濃縮前需進行過濾，其目的是_。(4)紙層析法可用于鑒定所提取的胡蘿卜素。鑒定

37、過程中需用胡蘿卜素標準品作為_。答案(1)稀釋涂布平板法殺滅接種環上的微生物(2)碳源氮源(3)干燥時間水浴加熱濾去萃取液中的不溶物(4)(實驗)對照解析(1)接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法，接種過程為了避免其他雜菌的污染，要做無菌操作，所以接種前需對接種環進行滅菌。(2)蔗糖主要提供碳源，當然也可以作為能源物質，硝酸鹽含氮元素，可提供氮源。(3)溫度過高、干燥時間過長會導致胡蘿卜素分解；由于萃取劑往往有揮發性，直接加熱時揮發出來的有機溶劑遇明火易爆炸；萃取后需將原料中不溶于萃取劑的成分濾去。(4)提取出來的胡蘿卜素往往不是純的，用胡蘿卜素標準品主要起一個對照的作用。1植物芳

38、香油三種提取方法的比較提取方法實驗原理適用范圍水蒸氣蒸餾法利用水蒸氣將揮發性較強的植物芳香油攜帶出來，形成油水混合物，冷卻后，混合物又會重新分出油層和水層適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發性較強的芳香油壓榨法通過機械加壓，壓榨出果皮中的芳香油適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料中芳香油的提取有機溶劑萃取使芳香油溶解在有機溶劑中，蒸發溶劑后就可獲得芳香油適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細小，能充分溶解在有機溶劑中2.實驗流程設計(1)玫瑰精油提取的實驗流程鮮玫瑰花清水(14)水蒸氣蒸餾油水混合物 分離油層除水過濾,玫瑰油。(2)橘皮精油提取的實驗流程石灰水浸泡橘皮漂洗壓榨過濾靜置再次過濾橘皮油。(3)提取

39、胡蘿卜素的實驗流程胡蘿卜粉碎干燥萃取過濾濃縮胡蘿卜素。1如圖1是在發酵罐內利用三孢布拉氏霉發酵生產­胡蘿卜素過程中，菌體生物量及­胡蘿卜素產量隨時間變化的曲線圖。圖2是樣品層析結果及與­胡蘿卜素標準樣品的比對。請回答下列問題：(1)發酵罐內三孢布拉氏霉培養基按物理形態分應為_，玉米粉和豆餅為微生物的生長分別主要提供_。在接入菌種前，應對培養基進行_，以避免雜菌污染。(2)圖1中，菌體的最快增長出現在第_h，菌體的生物量到達最大值后下降，其原因是_，為保證連續的生產，應采取的措施是_。(3)­胡蘿卜素常用的提取方法為_法，實驗表明，石油醚的提取效果遠好于丙

40、酮和酒精，原因是_。(4)將萃取的胡蘿卜素樣品與­胡蘿卜素標準樣進行比對，結果如圖2。從圖中分析可知，色帶_為­胡蘿卜素。答案(1)液體培養基碳源和氮源高壓蒸汽滅菌(2)100營養物質缺乏，有害代謝產物積累連續加入新的培養液，同時排出代謝產物 (3)有機溶劑萃取石油醚為水不溶性有機溶劑，萃取效果好(4)解析(1)發酵罐內三孢布拉氏霉培養基按物理形態分應為液體培養基，玉米粉和豆餅為微生物的生長分別主要提供碳源和氮源。在接入菌種前，應對培養基進行高壓蒸汽滅菌，以避免雜菌污染。(2)圖1中，菌體的最快增長出現在第100 h，菌體的生物量到達最大值后下降，其原因是營養物質缺乏，有害

41、代謝產物積累，為保證連續的生產，應采取的措施是連續加入新的培養液，同時排出代謝產物。(3)提取­胡蘿卜素常用的方法為有機溶劑萃取法，實驗表明，石油醚的提取效果遠好于丙酮和酒精，原因是石油醚為水不溶性有機溶劑，萃取效果好。2檸檬油是植物芳香油中的一種，它是一種廣譜性的殺蟲劑，可殺死蚊子、蒼蠅、蟑螂和臭蟲等傳染疾病的害蟲，以及危害糧食、蔬菜的常見害蟲，包括幼蟲、蛹等，被稱為一種綠色殺蟲劑。提取檸檬油的操作步驟如圖。請根據實驗流程圖回答下列問題：(1)新鮮的檸檬果皮中含有大量的_和水分，如果直接壓榨，出油率較低。(2)壓榨是個機械加壓過程，要求既要將原料壓緊，防止原料滑脫，又要將_擠壓出來

42、。(3)A是_，目的是破壞細胞結構，分解果膠，防止壓榨時果皮滑脫，提高_。B過程一般加入相當于檸檬果皮質量0.25%的小蘇打和5%的硫酸鈉，其目的是使檸檬油易與水分離，并調節pH至_。(4)C過程為用_過濾，目的是除去固體物和殘渣。(5)檸檬油是食品、化妝品和香水配料的優質原料，具有很高的經濟價值，提取檸檬油不采取水中蒸餾的原因是：水中蒸餾會導致_的問題。檸檬果皮精油的提取適宜采用_法。答案(1)果蠟、果膠(2)油分(3)石灰水出油率78(4)普通布袋(5)原料焦糊和有效成分水解壓榨解析(1)新鮮的檸檬果皮中含有大量的果蠟、果膠、水分，會影響出油率。(2)壓榨過程要將原料壓緊，防止滑脫，將油分

43、擠壓出來。(3)為了提高出油率，壓榨前，需要將橘皮用石灰水浸泡，這樣可以破壞細胞結構，降低壓榨液的黏稠度，過濾時不會堵塞篩眼。(4)圖中C過程為過濾，用普通布袋，可以除去固體物和殘渣。(5)水中蒸餾時，檸檬油中有效成分會水解，也容易發生原料焦糊問題，因此宜采用壓榨法。3回答下列有關植物有效成分提取的問題。(1)提取玫瑰精油可用_法，對裝有玫瑰花瓣和水的蒸餾瓶加熱，可在錐形瓶中收集到油水混合物，再向油水混合物中加入_，可以使油水混合物分層，通過分液漏斗獲取油層，此時油層中還有一定水分，一般還要加入一定量的_吸水。(2)用壓榨法提取橘皮精油，為防止壓榨時滑脫，提高出油率，可以將橘皮干燥去水后用_浸

44、泡再壓榨；在壓榨液中加入小蘇打和硫酸鈉的目的是_。(3)胡蘿卜素不易揮發，一般考慮_法提取，在乙醇、丙酮、石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳中，_最適合用于提取胡蘿卜素。整個過程不用明火加熱是為了_，蒸餾瓶上加裝冷凝回流裝置是為了_。答案(1)水蒸氣蒸餾(蒸餾)NaCl無水硫酸鈉(2)石灰水促進油和水的分離(3)萃取石油醚防止引起燃燒或爆炸防止加熱時有機溶劑揮發解析(1)提取玫瑰精油可用水蒸氣蒸餾法；收集油水混合物后，向其中加入NaCl，可促進油水混合物分層；油層中的水分可以用無水硫酸鈉吸收。(2)提取橘皮精油時，將橘皮干燥去水后用石灰水浸泡，可以防止壓榨時滑脫，提高出油率；在壓榨液中加入小

45、蘇打和硫酸鈉的目的是促進油和水的分層。(3)胡蘿卜素不易揮發，一般采用萃取法提??；在乙醇、丙酮、石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳中，乙醇和丙酮易溶于水，不適合用萃取法，石油醚的沸點最高，且不易揮發，最適合用于提取胡蘿卜素；由于萃取劑易燃易爆炸，不能明火加熱；蒸餾瓶上加上冷凝回流裝置是為了防止加熱時有機溶劑揮發。4請回答下列與實驗室提取芳香油有關的問題。(1)植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、_和_。(2)芳香油溶解性的特點是不溶于_，易溶于_，因此可用_作為提取劑來提取芳香油。(3)橘子果實含有芳香油，通?？捎胈作為材料提取芳香油，而且提取時往往選用新鮮的材料，理由是_。(4)對材料壓

46、榨后可得到糊狀液體，為除去其中的固體物獲得乳狀液可采用的方法是_。(5)得到的乳狀液加入氯化鈉并放置一段時間后，芳香油將分布于液體的_層，原因是_。加入氯化鈉的作用是_。(6)從乳狀液中分離得到的芳香油中要加入無水硫酸鈉，此劑的作用是_。答案(1)蒸餾法萃取法(2)水有機溶劑有機溶劑(其他合理答案也可)(3)橘子皮芳香油含量較高(4)過濾(其他合理答案也可)(5)上油的密度比水小(其他合理答案也可)增加水層密度，使油和水分層(6)吸收芳香油中殘留的水分解析(1)植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、蒸餾法、萃取法。(2)芳香油溶解性的特點是不溶于水，易溶于有機溶劑，因此可用有機溶劑作為提取劑來

47、提取芳香油。(3)一般采用新鮮的橘子皮來提取橘皮精油，因為新鮮的含有芳香油多。(4)除去液體中的固體常用方法是過濾。(5)芳香油密度比水小，且不溶于水，會浮在液體的表面。加入氯化鈉會增加水層密度，使油和水分層。(6)無水硫酸鈉的作用可以吸收芳香油中殘留的水分。5胡蘿卜素可用于治療因缺乏維生素A而引起的各種疾??；還是常用的食品色素；還具有使癌變細胞恢復為正常細胞的作用。下圖是提取胡蘿卜素的實驗流程示意圖，請回答下列相關問題。(1)除了可以從植物中提取天然胡蘿卜素外，還可以從養殖的巖藻中獲得或者利用_生產。(2)新鮮的胡蘿卜含有大量的水分，在胡蘿卜素的提取過程中，要對新鮮的胡蘿卜進行_處理，但要注

48、意控制_和時間，這是因為_。(3)圖中A過程表示_，此過程用到的有機溶劑應該具有很高的_，能夠充分_胡蘿卜素，并且不與水混溶。(4)圖中B過程表示_，濃縮之前進行過濾的目的是_。答案(1)微生物的發酵(2)干燥溫度溫度太高、干燥時間太長會導致胡蘿卜素分解(3)萃取溶點溶解(4)濃縮除去萃取液中的不溶物解析(1)天然胡蘿卜素除取自植物外，還可以從養殖的巖藻中獲得或利用微生物發酵生產。(2)進行有機溶劑萃取時宜對原料進行干燥處理。(3)圖中A為萃取，該過程所用到的有機溶劑應具有很高的溶點，能充分溶解胡蘿卜素，且不與水混溶。(4)圖中B為濃縮，在濃縮前宜進行過濾以除去萃取液中的不溶物?？键c42植物組

49、織培養1判斷下列有關植物的組織培養技術的敘述(1)外植體可以來自于植物的任何細胞(2011·上海，22A)(×)(2)愈傷組織是一團有特定結構和功能的薄壁細胞(2011·江蘇，16A)(×)(3)二倍體植株的花粉經脫分化與再分化后得到穩定遺傳的植株(2011·江蘇，16B)(×)(4)以花粉作為外植體可得到單倍體植株(2011·上海，22C)()(5)用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子(2011·江蘇，16C)(×)(6)植物耐鹽突變體可通過添加適量NaCl的培養基培養篩選而獲得(2011·江蘇