1、552=化學測定方法>頂空氣相色譜法測定糧食中的氰化物劉宇,趙晶,張欣,于波,權伍英2222(11沈陽市皇姑區疾病預防控制中心,沈陽 110032;21沈陽市疾病預防控制中心,沈陽 110031)摘要 目的:建立糧食中氰化物的頂空氣相色譜測定方法。方法:采用氰胺T將氰化物衍生成氯化氰,頂空氣相色譜法,電子捕獲檢測器進行檢測。結果:本法檢出限為0105mg/kg,氰化物在060Lg范圍內線性關系良好,平均回收率為9010%9614%,相對標準偏差小于715%,與國標法比較無顯著性差異。結論:該法操作簡便、快速、準確可靠,可用于糧食中氰化物的檢測。關鍵詞 氰化物;頂空氣相色譜法;糧食中圖分類

2、號 O65717+1 文獻標識碼 A 文章編號 1004-8685(2009)03-0552-02DeterminationofcyanideingrainsbyheadspacegaschromatographyLIUYu1,ZHAOJing2,ZHANGXin2,YUBo2,QUANWu-ying2(11HuangguCenterforDiseaseControlandPrevention,Shenyang110032,China;21ShenyangCenterforDiseaseControlandPrevention,Shenyang110031,China)Abstract Obj

3、ective:Todevelopaheadspacegaschromatographymethodforthedeterminationofcyanideingrains1Methods:DeterminationofcyanogenchloridederivedfromreactionofcyanideandchloramineTwascarriedoutbyhead-spacegaschromatographywithelectroncapturedetector1Results:Thelimitofquantificationwas0105mg/kg1Thecalibrationcurv

4、eshowedgoodlinearityintherangeof060Lg1Themeanrecoverywas9010%9614%andtherelativestandardderiva-tionslowerthan715%1Ithadnosignificantdifferencewithnationalstandardmethod1Conclusion:Thismethodissimple,rapidandaccurate1Itissuitablefordeterminationofcyanideingrains1Keywords Cyanide;Headspacegaschromatog

5、raphy;Grains 氰化物有劇毒,食品一旦受到污染,必將對人體造成嚴重危害,因此食品中氰化物的檢測是一項重要的指標。糧食中氰化物的國家標準檢驗方法1是先用苦味酸試紙法作定性篩查,陽性樣品再用異煙酸-吡唑酮比色法定量檢測。定性檢查存在二氧化硫及硫化氫干擾的假陽性,定量用異煙酸-吡唑酮比色法,樣品需蒸餾處理,操作繁瑣費時。目前有文獻報道采用頂空分析方法檢測酒、飲料等液體食品中的氰化物2,3以及血液中氰化物4,5,對于固體食品采用頂空氣相色譜法測定氰化物尚未見報道。本法采用氯胺T衍生化頂空氣相色譜法測定糧食中的氰化物,方法簡便、快速、準確可靠。1 材料與方法111 儀器HP-6890氣相色譜儀

6、,具有電子捕獲檢測器,色譜工作站。超聲波清洗器,恒溫水浴,100ml頂空管,微量注射器:100Ll。112 色譜條件色譜柱:FFAP彈性毛細管色譜柱25m0125mm0125Lm;柱溫:60e;檢測器溫度:250e;汽化室溫度200e;載氣:氮氣,柱流量:310ml/min。氫氣:40ml/min,空氣:400ml/min,尾吹:40ml/min,分流比:10:1。113 試劑作者簡介 劉宇(1975-),女,主管技師,主要從事理化檢驗工11311 氰化物標準儲備液:6710Lg/ml(國家標準物質研究中心)。氰化物標準使用液(以氯化氰計):將氰化物標準儲備溶液稀釋成1010Lg/ml。113

7、12 磷酸鹽緩沖溶液(pH710):稱取34g無水磷酸二氫鉀和3515g磷酸二氫鈉加水溶解稀釋至1000m。l11313 氯胺T溶液:稱取110g氯胺T(有效含量在11%以上)溶于100ml水中,臨用時現配。114 樣品處理稱取經粉碎混勻的試樣510g于100ml頂空管中加入純水至80m,l混勻,在超聲波清洗器中超聲提取20min,取出,分別加入磷酸鹽緩沖溶液110ml和1%氯胺T溶液0125m,l立即用橡膠反堵膠塞密封,混勻,置于40e恒溫水浴中,反應及平衡50min,抽取頂空氣體100Ll注入氣相色譜儀進行測定。115 標準曲線繪制取7支100ml頂空管,分別加入氰化物標準使用溶液(101

8、0Lg/ml)010、0125、0150、1100、2100、4100、6100m,l分別加水至80m,l混勻(此標準系列氰化物含量分別為0,215,510,1010,2010,4010,6010Lg)。以下按樣品處理方法操作,以峰面積與氰化物含量繪制標準曲線。2 結果與討論211 氣相色譜條件的選擇分別選用FFAP彈性毛細管色譜柱、SE-30色譜柱,經試中國衛生檢驗雜志2009年3月第19卷第3期 ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology,Mar2009;Vol19 No3553對不同的柱箱溫度、載氣流量等進行優化,確定最佳色譜條件。氰化物的保留時

9、間為0194min,色譜圖見圖1、圖2。214 平衡溫度和時間的影響在頂空分析法中,待測組分受平衡的溫度和時間影響較212 樣品提取方法選擇樣品提取以水為溶劑,分別采用震蕩和超聲提取方法進行比較,取同一濃度5Lg的氰化物標準加入樣品中,分別采用震蕩和超聲方法提取,震蕩或超聲時間分別為10、20、30、40、50、60min,每種條件重復測定3次,取其峰面積的平均值(見圖3),結果表明超聲提取20min峰面積即達到最高值,而震蕩提取需要50min才能達到最高值,故選擇超聲方法進行提取,提取時間為20min。圖3 超聲和震蕩提取時間對響應值的影響213 pH的選擇提取溶液pH的大小會影響氰化物轉化

10、成氯化氰的量,酸性時氰化物不穩定,堿性時次氯酸鹽可導致氰化物分解6。本實驗取5Lg氰化物標準,在pH515-715之間測定其峰面積(見圖4),可見pH為710時響應值最大,因此本方法選用pH為710的磷酸鹽緩沖溶液,并使樣品和標準系列的條件一致。圖4pH值對響應值的影響大。升溫有利于揮發性物質的揮發,但是也同樣使得樣品中的副反應增加。樣品中揮發性的物質達到平衡需要時間,選擇合適樣品的平衡時間有助于提高分析的重現性7。本實驗選擇平衡溫度分別為30e、35e、40e、45e、50e、55e,氰化物的響應值隨著溫度的升高而增加,但會有雜質峰干擾影響測定。平衡溫度為40e時,響應較高而無雜峰干擾,所以

11、選擇平衡溫度為40e。選擇平衡時間為20、30、40、50、60min進行實驗,50min即可達到氣液平衡,故平衡時間確定為50min。215 線性范圍及方法檢出限氰化物濃度在060Lg范圍內呈線性關系,直線回歸方程為y=31204x+01985,回歸系數r=019999。線性良好,可滿足定量分析的要求。以色譜3倍噪聲為檢出限,該含量為015Lg,按取樣量10g計算,最低檢測濃度為0105mg/kg。216 精密度與回收率以未檢出氰化物的玉米樣品為本底,分別添加0150和5100mg/kg氰化物,按本法操作測定并計算其回收率和精密度,結果見表1。表1 精密度與回收率(n=6)加入量(mg/kg

12、)平均測量值(mg/kg)平均回收率(%)41829614314217 與國標法比較在空白大米樣品中添加2100mg/kg氰化物,分別用本法和國標法測定6次,其均值分別為1188和1193mg/kg,并對兩組數據進行t檢驗,P>0105,兩方法差異無顯著性。參考文獻1GB/T5009136-20031食品衛生檢驗方法理化部分(一)S12向先國1食品和水中微量氰化物的衍生化頂空氣相色譜測定法J1現代預防醫學,2007,34(21):4148-415013時振強,肖林,劉德輝1頂空氣相色譜法測定酒中微量氰化物J.中國衛生檢驗雜志,2002,12(4):43314KarenEMurphy,MicheleMSchantz,ThereseAButler,etal.Deter-minationofcyanideinbloodbyisotope-dilutiongaschromatography-massspectrometryJ1ClinChem,2006,52(3):458-46715GambaroV,ArnoldiS,CasagniE,etal1Bloodcyanidedeterminationintwocasesoffatalintoxication:comparisonbetweenheadsp