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文檔簡介

1、1什么是順式作用元件和反式作用因子,并舉例。答:順式作用元件是指對基因表達有調節活性的DNA序列,它作為一種原位順序,其活性只影響與其自身處在同一個DNA分子上的基因;同時,這種DNA序列通常不編碼蛋白質,多位于基因旁側或內含子中。簡單的說,順式作用元件是指影響自身基因表達活性的DNA序列(如轉錄啟動子和增強子)。反式作用因子是指其基因產物將從合成的場所擴散到其發揮作用的其他場所,游離的基因產物擴散至目標場所的過程為反式作用。調控轉錄的各種蛋白因子總稱反式作用因子。其編碼基因與其識別或結合的靶核苷酸序列不在同一個DNA分子上。如RNA聚合酶。2簡述tRNA三級結構特點與其功能之間的關系。答:t

2、RNA三級結構是在二級結構的基礎上經過進一步折疊扭曲形成倒L形。此結構反映了tRNA的生物學功能,因為tRNA上所運載的氨基酸必須靠近位于核糖體大亞基上的多肽合成位點,而tRNA的反密碼子必須與小亞基上的mRNA相配對,所以兩個不同的功能基團最大限度分離。這個結構很可能滿足了蛋白質合成過程中對tRNA的各種要求而成為tRNA的通式,tRNA的性質由反密碼子決定。該結構形成雙螺旋,堿基配對增加,有利于堿基堆積力的增強,空間位阻效應減小,利于與氨基酸結合,利于實現轉運功能。3請列出至少5種真核生物蛋白質的翻譯后加工方式。答:N端fMet或Met的切除;二硫鍵的合成;特定氨基酸的修飾(磷酸化、糖基化

3、、甲基化、乙基化等);切除新生肽鏈中的非功能片段;信號序列的切除。4簡述亮氨酸拉鏈的結構特征。答:亮氨酸拉鏈結構域通常被定義為一行4-7個周期重復的亮氨酸殘基,其距離大約跨越8個螺旋轉彎,通式為L-x(6)-L-x(6)-L-x(6)-L,有時典型的亮氨酸殘基會被異亮氨酸或纈氨酸所代替。結構分析發現亮氨酸拉鏈由平行的卷曲螺旋型螺旋構成,它們通過亮氨酸側鏈的疏水作用互相纏繞,亮氨酸統一排列在螺旋的一側,而所有帶電荷的氨基酸殘基排在另一側。當2個蛋白質分子平行排列時,亮氨酸之間相互作用形成二聚體,形成“拉鏈”。在“拉鏈”式的蛋白質分子中,亮氨酸以外帶電荷的氨基酸形式同DNA結合。亮氨酸拉鏈的二級結

4、構分析可以發現,該結構域呈“螺旋-環-螺旋”的結構,利于形成同源二聚體。5試寫出一個基因可產生不同表達產物的可能機制。答:一個基因轉錄起始位點的選擇不同可導致產生不同類型的酶;同一個基因,相同的初始mRNA,但由于5端,內含子及3末端等選擇的不同,使成熟的mRNA也不同,結果編碼了功能不同的蛋白。6.簡述增強子的特征。 1,、增強子效應十分明顯,2、增強子效應與其位置和取向無關,3、大多為重復序列,4、其增強效應有嚴密的組織和細胞特異性,5、沒有基因專一性,可以在不同的基因組合上表現增強效應,6、許多增強子還受外部信號的調控7.什么是叫C值和C值反常。 答:C值通常指一種生物單倍體基因組DNA

5、的總量,以每種細胞內的皮克(pg)數表示。C值反常也稱C值謬誤,指C值往往與種系的進化復雜性不一致的現象,即基因組大小與遺傳復雜性之間沒有必然關系,某些低等生物C值很大,如一些兩棲動物的C值甚至比哺乳動物的還大。8.請列出5種RNA分子,并說明其主要作用1轉運RNA tRNA 轉運氨基酸 2核蛋白體RNA rRNA 核蛋白體組成成 3信使RNA mRNA 蛋白質合成模板 4不均一核RNA hnRNA 成熟mRNA的前體 5小核RNA snRNA 參與hnRNA的剪接 6小胞漿RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白質內質網定位合成的信號識別體的組成成分 7反義RNA anRNA/micRNA

6、對基因的表達起調節作用 8核 酶 Ribozyme RNA 有酶活性的RNA二、問答題1.什么叫PCR?試比較PCR與DNA復制的不同點。答案:略2.請畫出大腸桿菌色氨酸操縱子的結構示意圖,簡述其表達調控中的轉錄弱化作用。 3.請畫出大腸桿菌乳糖操縱子的結構示意圖,闡述其正調控和負調控機制。在乳糖操縱子調控模型中,負控誘導調節模式是主要的。具體來說,在沒有誘導物,如乳糖、IPTG、ONPG等存在時,LacI基因轉錄產物為阻遏物單體,再結合成四聚體,它們能與O區DNA相結合,從而阻遏基因轉錄,當有誘導物存在時,可使阻遏物變成不能與O區相結合的非活性形式,從而RNA聚合酶可與Lac啟動區相結合,起

7、始基因轉錄。此外,正調控模式也有體現,大腸桿菌中的代謝蛋白cAMP-CRP是激活Lac轉錄的重要成分,當有效應物如葡萄糖存在時,cAMP濃度很低,從而轉錄不能進行,即此調控為正控阻遏調節。4.真核生物與原核生物基因組DNA有何不同?答:真核生物基因組特征:具有致密的染色體結構,且染色體數量多,結構復雜;基因組大,結構復雜,DNA有多個復制起點,每個基因組中含有數萬個基因;DNA順序可分為非重復序列、中度重復和高度重復序列;真核基因具有不連續性;來源相同,結構相似,功能相關的基因常能組成單一基因簇或基因家族;還具有細胞器基因。原核基因組特征:染色體是由一個核酸分子(DNA或RNA)組成的,DNA(RNA)呈環狀或線性;功能相關的基因大多以操縱子形式出現;蛋白質基因通常以單拷貝的形式存在,且一般是連續不間斷的;編碼RNA的基因通常是多拷貝的。5.簡述重組DNA技術的操作過程,并輔以圖示。答:操作過程:目的基因的制備(質粒DNA的提取與純化、電泳檢測目的基因片段PCR、酶切反應) 載體的制備連接、轉化、篩選、鑒定(包括酶切產物的連接、轉化和篩選)誘導表達、產物分析.操作圖略。6.轉座的基本機制是什么?轉座有什么生物學意義?答:轉座是由可移位因子介導的遺傳物質重排現象。轉座時發生的插入作用有一個普遍的特征,那就是受體分子中

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