1、大孔吸附樹脂分離純化龍須藤總黃酮的工藝研究         作者：徐偉，張淑玲，洪振豐，鄭海音 【摘要】 目的 研究AB8大孔樹脂分離純化龍須藤黃酮的工藝條件。方法 通過靜態吸附解吸附實驗篩選最佳大孔樹脂，并以總黃酮含量為考核指標，采用L9（34）正交試驗法對影響AB8大孔樹脂分離純化龍須藤黃酮的因素進行考察，確定                 

2、              作者：徐偉，張淑玲，洪振豐，鄭海音【摘要】  目的 研究AB8大孔樹脂分離純化龍須藤黃酮的工藝條件。方法 通過靜態吸附解吸附實驗篩選最佳大孔樹脂，并以總黃酮含量為考核指標，采用L9（34）正交試驗法對影響AB8大孔樹脂分離純化龍須藤黃酮的因素進行考察，確定最佳工藝條件。結果 最佳工藝條件為：采用AB8型大孔樹脂，取龍須藤黃酮提取液(含生藥0.5 g/mL)上樣，樹脂用量為4倍生藥量，洗脫劑采用體積分數50乙醇，用量為16倍生藥量

3、。結論 該工藝條件科學合理，可有效地用于龍須藤黃酮的分離富集。 【關鍵詞】  龍須藤 大孔樹脂 正交設計法 總黃酮Abstract:Objective To optimize the separation and purification procedure of total flavonoids from Bauhinia championii Benth by AB8 macroporus resin. Methods  The yield of total flavonoids was used as a maker. The static and dynamic a

4、dsorption/desorption methods and orthogonal design L9（34）were used to evaluate factors such as concentration of alcohol，ratio of alcohol to raw material and ratio of resin to raw material. The content of total flavonoids was determined by UVVis spectrophotometer. Results  The optimum conditions

5、 were as following: ratio of resin to raw material was 4, 50% of alcohol was used for eluent, ratio of alcohol to raw material was 16. Conclusion This procedure is reasonable, which could be used to separate and purify the total flavonoids from Bauhinia championii Benth.Key words:Bauhinia championii

6、 Benth；macroporus resin；orthogonal test；total flavonoids龍須藤 (Bauhinia championii Benth.)為雙子葉植物豆科羊蹄甲屬植物多年生藤，具有祛風濕、行血氣的功效。文獻研究表明龍須藤具有鎮痛抗炎、抗風濕骨痛、抗血小板凝集等藥理作用，主要含有黃酮、氰苷、沒食子酸等成分1。其中黃酮類是主要有效成分，具有較強的鎮痛抗炎2、抗血小板凝集3等活性。大孔吸附樹脂是一類有機高聚物吸附劑，兼具吸附和分子篩分離原理，對有機化合物具有良好的吸附分離性能。本文采用靜態吸附解吸實驗，篩選最佳大孔樹脂，利用正交試驗法對大孔樹脂分離純化龍須藤黃酮

7、的主要影響因素進行考察，優化樹脂分離工藝參數，為開發利用龍須藤黃酮提供實驗依據。1  儀器與試藥    WFZ800D3B紫外可見分光光度計(北京瑞利分析儀器公司)；KQ2500B超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，BS200S電子天平（賽多利斯公司）。龍須藤采集于福建永泰縣青云山地區，由福建中醫學院藥學系鑒定為豆科羊蹄甲屬植物龍須藤(Bauhinia championii Benth.)的藤。蘆丁對照品(中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用，批號100080200306)，其他試劑均為分析純。2  方法與結果2.1  龍須藤黃酮

8、的提取4    取粉碎過篩的龍須藤藥材適量，加10倍(生藥量)的體積分數60乙醇浸泡3 h，回流提取3次，每次2 h，過濾，合并濾液，回收至無醇味，加水溶解至每1 mL含0.5 g生藥，離心(4 000 r/min )15 min，過濾，備用。測得總黃酮質量分數為6.91。2.2  總黃酮含量測定42.2.1  標準曲線繪制  精密稱取干燥至恒重的蘆丁對照品23.0 mg,置50 mL量瓶中，加體積分數95%乙醇超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，備用。精密吸取對照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL，分別置25 mL量

9、瓶中，加水至6.0 mL；加入5% NaNO2溶液1.0 mL，使混勻，放置6 min；加入10% Al(NO3)3 1.0 mL，搖勻，放置6 min；再加入4NaOH溶液10.0 mL，加水至刻度，搖勻，放置15 min，于500 nm波長處測定吸光度。以吸光度（A）對質量濃度()進行線性回歸，得回歸方程：A=0.0055+0.024,r=0.999 87，表明蘆丁對照品質量濃度在18.40110.4 g/mL范圍內線性關系良好。2.2.2  樣品含量測定  龍須藤洗凈，晾干，置恒溫干燥箱中于75 下干燥8 h，取出粉碎，過篩(20目)，所得粉末干燥保存備用。按下述試驗

10、條件回流提取后，將粗提取液過濾，濃縮，放置冷卻后定容于100 mL量瓶中。精密吸取樣品溶液1.0 mL置10 mL量瓶中，再精密吸取溶液1.0 mL，按“2.2.1”項下方法，自“加水至6.0 mL”起依法測定吸光度，代入回歸方程計算出樣品溶液中總黃酮的提取率（總黃酮提取率總黃酮質量/龍須藤質量×100）。2.3  大孔樹脂的篩選    選擇4種極性、孔徑、比表面等參數不同的大孔樹脂(DA101、AB8、HP20和H103)，分別用靜態吸附法和靜態解吸法測定其吸附與解吸性能，以確定實驗用樹脂。2.3.1  大孔樹脂預處理  稱取上述4種樹脂適量，用乙醇浸泡樹脂24 h后，分別上柱進行預處理，用體積分數95乙醇流動清洗，檢查流出的乙醇液至乙醇液與水15混合不呈白色混濁為止，然后以大量蒸餾水沖洗，至水洗液無醇味為止。2.3.2  靜態吸附實驗  稱取4種處理好的大孔樹脂(DA101，AB8，HP20，H103)2 g，分別加入龍須藤黃酮提取液10 mL置25 mL三角瓶中，每間隔10 min振蕩1次，持續4 h后，靜置24 h，使達到飽和吸附，過濾，測定濾液中黃酮含量，按吸附率=(初始濃度-吸附后濃度)初始濃度×100計算吸附率，結