1、組織學與胚胎學劉明Antonie van Leeuwenhoek列文虎克1674年他開始觀察細菌和原生動物即他所謂的“非常微小的動物”。他還測算了它們的大小。1677年首次描述了昆蟲、狗和人的精子。1684年他準確地描述了紅細胞。1665年，英國科學家胡克（R.Hooke，16351703）使用誕生不久的顯微鏡觀察軟木塞切片，首次發現蜂窩狀的植物細胞。此后100多年間，許多學者對動植物細胞進行了廣泛的觀察，但對細胞的內在結構、功能及其在生物體內的地位尚不明了。1838年，德國植物學家施萊登（M.J.Schleiden，18041881）在前人研究成果的基礎上提出：細

2、胞是一切植物的基本構造；細胞不僅本身是獨立的生命，并且是植物體生命的一部分，并維系著整個植物體的生命。1839年，德國動物學家施旺（T.A.H.Schwann，18101882）受到施萊登的啟發，結合自身的動物細胞研究成果，把細胞說擴大到動物界，提出一切動物組織均由細胞組成，從而建立了生物學中統一的細胞學說。組織學（histology）：研究機體微細結構及其相關功能的科學細胞(cell) 細胞外基質(extracellular matrix)組織(tissue)上皮組織結締組織肌肉組織神經組織器官和系統(organ & system)人體一、組織胚胎學的研究內容Microscopic anat

3、omy（一）組織學研究內容：生殖細胞精子和卵子發生的研究受 精受精和早期胚胎發育的研究早期胚胎發生和發育胚胎器官的發育胚胎發育異常胚胎學（embryology）：研究人體出生前發生、發育過程及其規律的一門科學（二）胚胎學研究內容：受精卵(zygote)胚(embryo)(28w)胎(fetal)(938w)兒(baby)產科學和計劃生育解剖學器官位置、形態、變異出生缺陷意義二、組織胚胎學研究方法（一）普通光學顯微鏡（light microscope, LM）分辨率：分辨率：0.2 m放大倍數：放大倍數：1000倍倍組織切片標本光學顯微鏡技術: 組織標本制備方法：切片，涂片，撕片，磨片等 切片制

4、作過程：取材固定包埋切片染色H-E染色：蘇木精（Hematoxylin）伊紅（Eosin）染色堿性染料將嗜堿性物質（本身酸性）染成紫藍色酸性染料將嗜酸性物質（本身堿性）染成淡紅色細胞核中的DNA、RNA細胞質中的RNA細胞質、膜性結構smear spread section ground section 2. 其他制片技術涂片(smear) 鋪片(spread section )磨片(ground section)（二）電子顯微鏡（electron microscope, EM） 分辨率0.2nm, 是光鏡1000倍所見結構稱超微結構（ultra-structure）透射電鏡（transmis

5、sion electron microscope） 觀察細胞內部結構掃描電鏡（scanning electron microscope) 觀察組織或細胞表面的立體結構（1）透射電子顯微鏡 放大倍數幾萬倍到幾十萬倍。因此，電鏡能觀察到細胞的更微細結構。組織標本須用戍二醛或鋨酸固定，樹脂包埋，切厚5080nm超薄切片，經鉛鹽等重金屬鹽染色后鏡下觀察。電鏡下所見結構稱為。又稱為電鏡結構。（2）掃描電子顯微鏡固定后的標本，在其表面噴鍍金，在熒光屏上即可顯示細胞或組織表面的立體結構，如細胞表面的突起、微絨毛、纖毛等。各種顯微鏡的分辨率與人眼的比較分辨率人眼0.2 mm普通光鏡超高分辨率0.2 m20-1

6、00nm透射電鏡0.10.2 nm掃描電鏡2.5 nm應用化學反應或物理反應，使細胞、組織的某種化學成分形成有色終末產物，在鏡下觀察，從而對這種化學成分進行定位、定性和定量的研究。 過碘酸-Schiff反應（PAS反應)：過碘酸氧化多糖，形成a-醛基，再與Schiff試劑結合，形成紫紅色沉淀物。用于判定多糖的存在部位。 過碘酸 亞硫酸品紅乙二醇基乙二醛基紅色化合物（3）組織化學技術2、免疫組織化學（、免疫組織化學（immunohistochemistry） 利用抗原（利用抗原（antigen, Ag），抗體（），抗體（antibody, Ab）特）特異結合的原理，用已知抗體檢測未知抗原的一種方法。異結合的原理，用已知抗體檢測未知抗原的一種方法。標記物為熒光素、過氧化物酶或金顆粒標記物為熒光素、過氧化物酶或金顆粒（4）免疫組織化學技術（三）幾種特殊顯微鏡術1、相差顯微鏡（ phase contrast microscope）2、熒光顯微鏡（fluorescence microscope） 3、激光共聚焦掃描顯微鏡（ confocal laser scanning microscope） 激光共聚焦超高分辨率透射電鏡（六）組織培養（tissue culture）是將離體的細胞、組織或器官置于培養基中，在無菌和適宜溫度及酸堿度條件下進